2025年高級衛(wèi)生專業(yè)技術資格考試藥物分析(110)(副高級)試卷及答案指一、單項選擇題（每題1分，共30題）1.關于《中國藥典》2025年版凡例中“恒重”的定義，正確的是（）A.兩次稱量結果的絕對差值≤0.3mgB.連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱量的差異≤0.3mgC.連續(xù)三次干燥或熾灼后稱量的平均值與末次稱量的差異≤0.3mgD.干燥或熾灼至前后兩次稱量的質量差≤0.5mg答案：B2.采用高效液相色譜法（HPLC）測定某藥物含量時，若流動相pH值偏離方法驗證范圍，最可能影響的參數是（）A.精密度B.專屬性C.線性D.耐用性答案：D3.生物樣品（血漿）中藥物濃度測定時，常用內標法的主要目的是（）A.提高檢測靈敏度B.校正樣品前處理和進樣過程中的損失C.減少基質效應D.簡化樣品前處理步驟答案：B4.手性藥物分析中，若采用高效液相色譜法分離對映體，最常用的固定相是（）A.十八烷基硅烷鍵合硅膠（C18）B.環(huán)糊精鍵合硅膠C.氨基鍵合硅膠D.氰基鍵合硅膠答案：B5.紅外分光光度法（IR）用于藥物鑒別時，最關鍵的特征是（）A.吸收峰的強度B.吸收峰的位置（波數）C.吸收峰的形狀D.吸收峰的數目答案：B6.對于大分子生物藥物（如單克隆抗體），最適合的純度分析方法是（）A.高效液相色譜-紫外檢測（HPLC-UV）B.毛細管電泳-激光誘導熒光檢測（CE-LIF）C.尺寸排阻色譜-多角度激光散射（SEC-MALS）D.薄層色譜（TLC）答案：C7.藥物中有關物質檢查時，若采用主成分自身對照法，需驗證的關鍵參數是（）A.檢測限B.定量限C.準確度D.線性范圍答案：B8.氣相色譜法（GC）測定揮發(fā)性藥物時，若出現色譜峰拖尾，最可能的原因是（）A.柱溫過高B.進樣量過大C.固定相流失D.載氣流速過低答案：B9.質譜法（MS）中，電噴霧離子化（ESI）最適合分析的藥物類型是（）A.小分子揮發(fā)性藥物B.大分子極性藥物（如多肽）C.脂溶性藥物D.無機金屬離子答案：B10.中藥注射劑質量控制中，需重點控制的指標不包括（）A.總固體含量B.指紋圖譜相似度C.重金屬及有害元素D.溶出度答案：D11.藥物溶出度測定時，若采用槳法（50rpm），溶出介質體積通常為（）A.500mLB.900mLC.1000mLD.1500mL答案：B12.采用原子吸收分光光度法（AAS）測定藥物中重金屬（如鉛）時，最常用的原子化方法是（）A.火焰原子化B.石墨爐原子化C.氫化物發(fā)生原子化D.冷蒸氣原子化答案：B13.生物等效性研究中，評價吸收速度的主要指標是（）A.藥時曲線下面積（AUC）B.達峰濃度（Cmax）C.達峰時間（Tmax）D.消除半衰期（t1/2）答案：B14.藥物穩(wěn)定性試驗中，長期試驗的條件是（）A.25℃±2℃，相對濕度60%±5%B.30℃±2℃，相對濕度65%±5%C.40℃±2℃，相對濕度75%±5%D.60℃±2℃，開放放置答案：A15.高效液相色譜-串聯質譜（HPLC-MS/MS）測定生物樣品時，基質效應的評價方法是（）A.比較空白基質提取液加樣與純溶劑加樣的響應值B.比較不同批次基質的回收率C.比較不同色譜柱的分離效果D.比較不同流動相的離子化效率答案：A16.藥物晶型研究中，最直接的鑒別方法是（）A.差示掃描量熱法（DSC）B.X射線粉末衍射法（XRPD）C.熱重分析法（TGA）D.紅外光譜法（IR）答案：B17.緩釋制劑釋放度測定時，通常需要測定的時間點是（）A.1個時間點B.2個時間點C.3個時間點D.4個時間點答案：C18.采用紫外-可見分光光度法（UV-Vis）測定藥物含量時，若供試品溶液濃度超出線性范圍，正確的處理方法是（）A.直接稀釋至線性范圍內測定B.調整儀器波長重新測定C.增加比色皿光徑D.降低光源強度答案：A19.基因治療藥物（如腺相關病毒載體）的質量控制中，關鍵指標不包括（）A.病毒滴度（感染性滴度）B.空殼與完整顆粒比例C.宿主細胞DNA殘留量D.溶出度答案：D20.藥物雜質研究中，對于超過鑒定閾值的雜質，需進行的研究是（）A.僅需定性B.需定性和定量C.需進行安全性評估D.需進行強制降解試驗答案：C21.毛細管電泳（CE）分離帶電藥物時，影響遷移速度的主要因素是（）A.緩沖液pH值B.柱溫C.進樣量D.檢測器類型答案：A22.放射性藥物質量控制中，需重點檢測的指標是（）A.放射化學純度B.溶出度C.崩解時限D.含量均勻度答案：A23.采用核磁共振波譜法（NMR）進行藥物結構確證時，最常用的核是（）A.1H和13CB.19F和31PC.15N和2HD.7Li和23Na答案：A24.藥物制劑含量均勻度檢查時，若供試品為10片（粒），判斷合格的標準是（）A.A+1.80S≤15.0B.A+1.45S≤15.0C.A+2.0S≤20.0D.全部片（粒）含量在85%-115%之間答案：A25.疫苗類生物制品質量控制中，效力試驗的核心目的是（）A.確認安全性B.確認免疫原性C.確認純度D.確認穩(wěn)定性答案：B26.藥物分析方法轉移時，接收方需驗證的關鍵參數是（）A.專屬性和準確度B.精密度和耐用性C.線性和范圍D.檢測限和定量限答案：B27.采用電感耦合等離子體質譜法（ICP-MS）測定藥物中元素雜質時，需校正的干擾是（）A.同重離子干擾（如40Ar+對40Ca+）B.色譜峰拖尾C.基質效應導致的信號抑制D.光源不穩(wěn)定答案：A28.藥物溶出曲線相似性評價時，f2因子的計算需滿足的條件是（）A.f2≥50B.f2≥60C.f2≥70D.f2≥80答案：C29.生物藥物（如胰島素）的一級結構確證方法不包括（）A.氨基酸組成分析B.肽圖分析（PeptideMapping）C.質譜法（MS）D.圓二色譜（CD）答案：D30.藥物分析中，“定量限（LOQ）”的定義是（）A.能被檢測到的最低濃度B.能被定量測定的最低濃度，且準確度和精密度符合要求C.標準曲線的最低濃度點D.信噪比（S/N）≥3時的濃度答案：B二、多項選擇題（每題2分，共10題）1.藥物分析方法驗證中，需驗證的參數包括（）A.專屬性B.精密度C.溶出度D.耐用性E.含量均勻度答案：ABD2.影響高效液相色譜分離度的因素有（）A.色譜柱填料（如C18、C8）B.流動相pH值C.柱溫D.進樣量E.檢測器類型答案：ABCD3.生物樣品（血漿）前處理常用的方法包括（）A.蛋白沉淀（如加入乙腈）B.液-液萃取（LLE）C.固相萃取（SPE）D.超濾E.熾灼灰化答案：ABCD4.中藥質量控制的多維度指標包括（）A.有效成分含量B.指紋圖譜C.重金屬及農殘D.微生物限度E.溶出度答案：ABCD5.質譜法（MS）在藥物分析中的應用包括（）A.分子量測定（如多肽）B.雜質結構鑒定C.手性分離D.生物樣品中藥物定量（LC-MS/MS）E.晶型鑒別答案：ABD6.藥物穩(wěn)定性試驗包括（）A.影響因素試驗（高溫、高濕、強光）B.加速試驗C.長期試驗D.中間條件試驗（如30℃/65%RH）E.強制降解試驗答案：ABCDE7.基因治療藥物質量控制的關鍵指標有（）A.病毒載體滴度（感染性滴度）B.宿主細胞蛋白（HCP）殘留量C.插入序列完整性D.內毒素E.溶出度答案：ABCD8.藥物溶出度測定時，可能影響結果的因素有（）A.溶出介質的pH值B.轉速C.介質體積D.溫度（37℃±0.5℃）E.樣品稱量誤差答案：ABCD9.原子吸收分光光度法（AAS）的定量方法包括（）A.標準曲線法B.內標法C.標準加入法D.外標一點法E.面積歸一化法答案：AC10.生物等效性研究中，需滿足的統計學要求是（）A.受試制劑與參比制劑的AUC幾何均值比在80%-125%B.Cmax幾何均值比在80%-125%C.Tmax的90%置信區(qū)間在75%-133%D.樣本量≥12例E.采用交叉設計答案：ABE三、案例分析題（每題10分，共3題）案例1：某創(chuàng)新藥（小分子化學藥）研發(fā)階段的質量研究某公司研發(fā)了一種新型抗腫瘤藥物（分子式C18H20N4O5，分子量372.38），臨床前研究顯示其在pH1.2（模擬胃酸）中溶解度僅為0.5mg/mL，在pH6.8（模擬腸液）中溶解度為15mg/mL，且對光敏感（光照條件下易氧化降解）?，F需開展原料藥及片劑的質量研究。問題1：原料藥的關鍵質量屬性（CQA）應包括哪些？需重點關注的檢查項目有哪些？問題2：片劑處方設計中，為提高藥物溶出度，可采取哪些措施？需驗證的溶出度方法參數有哪些？問題3：穩(wěn)定性研究中，影響因素試驗需考察哪些條件？光照試驗的具體要求是什么？答案：問題1：關鍵質量屬性（CQA）包括：含量、有關物質（降解產物）、晶型、粒度（影響溶出）、水分（可能影響穩(wěn)定性）、重金屬及元素雜質（ICHQ3D）。重點檢查項目：有關物質（需明確強制降解產生的雜質結構）、晶型（XRPD或DSC）、溶解度（不同pH介質）、干燥失重/水分（卡爾費休法）、元素雜質（ICP-MS）。問題2：提高溶出度的措施：采用微粉化工藝減小粒徑；加入親水性輔料（如羥丙甲纖維素HPMC）；使用固體分散體技術；選擇pH依賴性釋放的包衣材料（如腸溶材料，因藥物在pH6.8溶解度高）。溶出度方法需驗證的參數：專屬性（排除輔料干擾）、精密度（重復性、中間精密度）、線性（濃度與響應值的關系）、范圍（覆蓋溶出限度）、耐用性（介質pH±0.1、轉速±5rpm、溫度±0.5℃的影響）。問題3：影響因素試驗條件：高溫（60℃）、高濕（90%RH±5%）、強光（4500lx±500lx）、酸（0.1mol/LHCl）、堿（0.1mol/LNaOH）、氧化（3%H2O2）。光照試驗要求：采用符合ICHQ1B的光源（冷白熒光燈+紫外燈），總照度≥120萬lux·小時，紫外能量≥200瓦·小時/平方米，考察外觀、含量、有關物質的變化，明確光降解產物結構。案例2：仿制藥一致性評價中的溶出曲線差異問題某仿制藥企業(yè)申報的鹽酸二甲雙胍片（0.5g）與原研藥的溶出曲線在pH4.5介質中差異顯著（f2=45），而在pH1.2和pH6.8介質中f2均>70。經檢查，仿制藥與原研藥的主藥粒徑分布、處方（微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉）、工藝（濕法制粒）均一致。問題1：可能導致溶出曲線差異的原因有哪些？需進一步排查的因素是什么？問題2：若經排查發(fā)現是原輔料來源差異導致，應如何設計試驗確認？問題3：若最終確認是輔料（微晶纖維素）的吸濕性差異導致，可采取哪些改進措施？答案：問題1：可能原因：輔料的功能性質差異（如微晶纖維素的堆密度、比表面積、孔隙率）、制粒過程中粘合劑用量或干燥溫度的細微差異（影響顆粒硬度）、壓片時的壓力差異（影響片劑硬度和孔隙率）。需進一步排查：輔料的關鍵功能屬性（如微晶纖維素的流動性、吸濕性、膨脹度）、顆粒的堆密度和孔隙率、片劑的硬度和脆碎度。問題2：驗證方法：①更換為與原研藥相同來源的微晶纖維素，重新制備樣品，測定溶出曲線；②對不同來源的微晶纖維素進行表征（比表面積BET、孔徑分布、XPS表面化學分析），關聯其與溶出的關系；③采用設計空間（QbD）方法，考察輔料屬性對溶出的影響（如DoE試驗設計）。問題3：改進措施：①選擇與原研藥輔料吸濕性一致的微晶纖維素（如控制平衡水分在3%-5%）；②調整制粒工藝（如降低干燥溫度至50℃以下，減少水分損失）；③加入抗吸濕性輔料（如硬脂酸鎂）或調整其用量（0.5%-1.0%）；④優(yōu)化壓片壓力（降低壓力，增加片劑孔隙率），但需確保脆碎度符合要求（≤1.0%）。案例3：生物藥（單克隆抗體）質量控制中的異常峰問題某公司生產的抗PD-1單克隆抗體（分子量約150kDa）在SEC-HPLC（尺寸排阻色譜）檢測中，發(fā)現主峰前出現一個異常峰（保留時間較主峰短，面積占比3.2%），而原液生產過程中該峰面積僅為0.5%。問題1：異常峰可能的性質是什么？需采用哪些方法確證其結構？問題2：可能導致該峰在制劑中增加的生產環(huán)節(jié)有哪些？問題3：若確認為抗體聚集體（二聚體），需制定的質量標準是什么？長期穩(wěn)定性試驗中需關注哪些指標？答案：問題1：異常峰可能是抗體的聚集體（如二聚體、多聚體）或片段（如Fab片段）。因保留時間短于主峰（SEC中分子量大的物質先出峰），更可能為聚集體（二聚體分子量約300kDa）。確證方法：①SEC-MALS（多角度激光散射）測定分子量；②非還原SDS（觀察高分子量條帶）；③質譜法（ESI-MS測定完整分子量）；④動態(tài)光散射（DLS）測定粒徑分布。問題2：可能的生產環(huán)節(jié)：①制劑緩沖液pH或離子強度變化（如pH偏離等電點，導致電荷排斥減弱）；②凍融過程（制劑需冷凍保存時，反復凍融可能破壞分子間作用力）；③過濾工藝（孔徑過小或壓力過高導致機械應力）；④儲存溫度波動（如長期2-8℃儲存時溫度升高至10℃以上）；⑤表面吸附（與灌裝容器（如西林瓶）的硅化程度不足，導致界面應力）。問題3：質量標準：聚集體（二聚體+多聚體）含量≤2.0%（參考ICHQ6B，治療用單克隆抗體通常要求聚集體≤2%-5%）。長期穩(wěn)定性試驗關注指標：①聚集體含量（SEC-HPLC）；②主峰純度（SEC、CE-SDS）；③電荷異質性（IEX-HPLC，聚集體可能伴隨電荷變體增加）；④生物學活性（如細胞結合試驗、功能活性試驗）；⑤外觀（是否出現可見顆粒）。四、論述題（每題20分，共2題）論述題1：結合實例，論述現代分析技術在生物藥物質量控制中的應用進展答案要點：生物藥物（如單克隆抗體、融合蛋白、疫苗）結構復雜，需從一級結構、高級結構、翻譯后修飾（PTMs）、純度/雜質等多維度控制質量?，F代分析技術的進展顯著提升了生物藥質量控制的精準度，具體應用如下：1.一級結構確證：高分辨質譜（HR-MS）：如Orbitrap質譜可直接測定完整抗體分子量（誤差<5ppm），結合酶解肽圖（如胰酶消化后LC-MS/MS）可確證氨基酸序列、二硫鍵位置（如曲妥珠單抗的22對二硫鍵）。毛細管電泳-質譜聯用（CE-MS）：用于分析小肽類藥物（如胰島素）的序列，避免HPLC中強有機溶劑對肽段的破壞。2.高級結構分析：圓二色譜（CD）：通過遠紫外區(qū)（190-250nm）的信號分析α-螺旋、β-折疊含量（如阿達木單抗的β-折疊結構占比≥60%）；近紫外區(qū)（250-320nm）分析側鏈構象。核磁共振（NMR）：用于小分子蛋白（如生長激素，分子量22kDa）的三維結構解析，通過1H-15NHSQC譜監(jiān)測構象變化。3.翻譯后修飾（PTMs）分析：糖基化：HPLC-熒光檢測（如2-AB標記寡糖）結合質譜（如MALDI-TOF）分析糖型分布（如利妥昔單抗的巖藻糖含量影響ADCC活性）；氧化/脫酰胺：LC-MS/MS結合特征性質量偏移（氧化+16Da，脫酰胺+1Da）定位修飾位點（如帕博利珠單抗CDR區(qū)的天冬酰胺脫酰胺需控制≤5%）。4.純度與雜質控制：尺寸排阻色譜-多角度激光散射（SEC-MALS）：無需標準品即可準確測定聚集體分子量（如檢測抗體二聚體，分子量約300kDa）；毛細管電泳-十二烷基硫酸鈉（CE-SDS）：分離抗體片段（如Fab、Fc片段），分辨率高于傳統SDS（如檢測曲妥珠單抗的Fab片段含量≤1.0%）。5.生物活性評價：表面等離子共振（SPR）：測定抗體與抗原的結合親和力（KD值，如納武利尤單抗與PD-1的KD≤1nM）；細胞-based功能試驗：通過報告基因細胞株檢測抗體的中和活性（如抗IL-6受體抗體對IL-6誘導的STAT3磷酸化的抑制率≥90%）。實例：某抗新冠病毒單克隆抗體的質量控制中，采用LC-MS/MS確證其可變區(qū)序列與設計一致，通過CE-SDS確認無異常片段（純度>98%），利用SPR驗證其與S蛋白受體結合域（RBD）的高親和力（KD=0.3nM），并通過SEC-MALS監(jiān)測儲存過程中聚集體含量（長期2-8℃儲存6個月，聚集體<2%）。綜上，現代分析技術（如高分辨質譜、多維色譜-質譜聯用、生物物理技術）的整合應用，實現了生物藥從結構到功能的全方位表征，為其安全性、有效性提供了關鍵保障。論述題2：試論藥物雜質研究的重要性及ICHQ3系列指南對雜質控制的指導意義答案要點：一、藥物雜質研究的重要性雜質是藥物中存在的非目標物質，可能影響藥物的安全性、有效性和穩(wěn)定性。其重要性體現在：1.安全性：部分雜質具有毒性（如基因毒性雜質，GTIs），可能導致致癌、致畸或器官損傷（如甲氨蝶呤中的二聚體雜質可增加腎毒性）；2.有效性：雜質可能與主藥競爭靶點（如手性藥物中的對映體雜質無活性或活性相反，降低療效）；3.穩(wěn)定性：雜質可能作為降解起點（如藥物中的水分可促進水解，產生更多雜質）；4.法規(guī)要求：各國藥典（如ChP、USP、EP）及ICH指南均要求對雜質進行定性、定量和控制。二、ICHQ3系列指南的核心內容及指導意義ICHQ3系列指南（Q3A-Q3E）系統規(guī)范了不同類型藥物的雜質研究要求，是全球制藥行業(yè)的黃金標準：1.Q3A（新原料藥中的雜質）：定義了雜質分類（有機雜質、無機雜