ICS

CCS

團體標(biāo)準(zhǔn)

T/CI0XX—2022

靈芝孢子中藥標(biāo)準(zhǔn)

TCMstandardofGanodermalucidumspores

（征求意見稿）

2022-X-XX發(fā)布2022-X-XX實施

中國國際科技促進會發(fā)布

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》

的規(guī)定起草。

某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。

本文件由中國國際科技促進會標(biāo)準(zhǔn)化工作委員會提出。

本文件由中國國際科技促進會歸口。

本文件主要起草單位：北京中醫(yī)藥大學(xué)、武義壽仙谷中藥飲片有限公司、北京采瑞醫(yī)藥

科技有限公司、云南中醫(yī)藥大學(xué)、安利（上海）科技發(fā)展有限公司、北京大學(xué)、康奧科技集

團有限公司、陜西功能食品工程中心有限公司。

本文件主要起草人：張建軍、王林元等。

本文件為首次發(fā)布。

III

靈芝孢子中藥標(biāo)準(zhǔn)

1范圍

本文件制定了靈芝孢子的來源、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、試驗方法、中藥藥性、標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、

運輸和貯藏。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于靈芝孢子生產(chǎn)、檢驗與銷售以及國際貿(mào)易和交流。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期

的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版權(quán)本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包

括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T191包裝儲運圖示標(biāo)志

GB/T4553工業(yè)硝酸鈉

GB5009.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測定

GB5009.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測定

GB5009.11食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機砷的測定

GB5009.12食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測定

GB5009.15食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鎘的測定

GB5009.17食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總汞及有機汞的測定

GB/T5009.19食品中有機氯農(nóng)藥多組分殘留量的測定

GB/T5009.103植物性食品中甲胺磷和乙酰甲胺磷農(nóng)藥殘留量的測定

GB5009.123食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉻的測定

GB5009.138食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鎳的測定

GB/T5009.145植物性食品中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多種殘留的測定

GB/T5009.176茶葉、水果、食用植物油中三氯殺螨醇殘留量的測定

GB5009.227食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中過氧化值的測定

GB23200.8食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定

氣相色譜-質(zhì)譜法

GB23200.13食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)茶葉中448種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定液相

色譜-質(zhì)譜法

1

GB23200.110食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中氯吡脲殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜

聯(lián)用法

GB23200.113食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

GB23200.116食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中90種有機磷類農(nóng)藥及其代謝物殘留

量的測定氣相色譜法

GB/T20769水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜

法

SN/T4591出口水果蔬菜中脫落酸等60種農(nóng)藥殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局令（2005）第5號《定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法》

國家市場監(jiān)督管理總局國家衛(wèi)生健康委員會國家中醫(yī)藥管理局2020年第54號公告《輔

Q10等五種保健食品原料目錄》附件2《保健食品原料目錄破壁靈芝孢子粉》（以下簡稱公告

附錄2）

《中國藥典》

《四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》2010年版

《福建省中藥飲片炮制規(guī)范》2012年版

《浙江省中藥炮制規(guī)范》2015年版

《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)第三冊》2019年版

《安徽省中藥飲片炮制規(guī)范》2019年版

《重慶市中藥材標(biāo)準(zhǔn)》（DB50/YC044-2022）

3來源

靈芝孢子為多孔菌科真菌赤芝（Ganodermalucidum(Leyss.exFr.)Karst.）、紫芝

（GanodermasinenseZhao,XuetZhang）、松杉靈芝（Ganodermatsugae）的干燥成熟孢子。

4質(zhì)量要求

4.1性狀

棕褐色粉末。體輕，手捻有滑膩感易附著手指上。氣微，味淡或微苦。

4.2鑒別

4.2.1

取本品，置顯微鏡下觀察。孢子棕黃色至棕褐色，卵形，頂端平截，長6-12μm，直徑5

-8μm，孢壁雙層，外壁光滑，內(nèi)壁具細小疣狀突起。

2

4.2.2

取本品2g，加乙醚50ml，超聲處理30分鐘（功率300W，頻率40kHz)，放冷，濾過，濾

液低溫蒸干，殘渣加三氯甲烷lml使溶解，作為供試品溶液。另取靈芝孢子對照藥材2g，

同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》通則0502）試驗，吸取上述兩種溶液各2

μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（4:1）為展開劑，展開，取出，晾干，

噴以10%硫酸乙醇溶液，置紫外光燈（365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)

的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

4.2.3

取本品lg，加水50ml，加熱回流1小時，趁熱濾過，濾液置蒸發(fā)皿中，用少量水分次

洗滌容器，合并洗液與濾液，置水浴上蒸干，殘渣用水5ml溶解，置50ml離心管中，緩緩

加入乙醇25ml，不斷攪拌，放置1小時，離心（轉(zhuǎn)速4000轉(zhuǎn)/分鐘），沉淀物用乙醇10ml

洗滌，離心。取沉淀物，烘干，放冷，加4mol/L三氟乙酸溶液2ml，置10ml頂空瓶（或安

瓿瓶）中，封口，混勻，在120℃水解3小時放冷，水解液轉(zhuǎn)移至50ml燒瓶中，用2ml水

洗滌容器，洗滌液并入燒瓶中，60℃減壓蒸干，用70%乙醇2ml溶解，置離心管中，離心，

取上清液作為供試品溶液。另取靈芝孢子對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。再取半乳

糖對照品、葡萄糖對照品、甘露糖對照品適量，精密稱定，加70%乙醇制成每lml各含0.1

mg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》通則0502）試驗，吸取上述

三種溶液各3μ1，分別點于同一硅膠G薄層板（Merck或效能相當(dāng)?shù)谋影澹┥?，以正丁?/p>

-丙酮-水（5:1:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以對氨基苯甲酸溶液（取4-氨基苯甲

酸0.5g，溶于冰醋酸9ml中，加水10ml和85%磷酸溶液0.5ml，混勾，即得），在105℃加

熱約10分鐘，置紫外光燈（365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色

譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

4.3檢查

4.3.1理化指標(biāo)應(yīng)符合表1規(guī)定

表1理化指標(biāo)

項目指標(biāo)檢驗方法

水分，%≤9.0GB5009.3

總灰分，%≤3.0GB5009.4

鉛（以Pb計），mg/kg≤2.0GB5009.12

3

總砷（以As計），mg/kg≤1GB5009.11

總汞（以Hg計），mg/kg≤0.1GB5009.17

鎘（以Cd計），mg/kg≤0.5GB5009.15

鎳（以Ni計），mg/kg≤1.0GB5009.138

鉻（以Cr計），mg/kg≤2.0GB5009.123

過氧化值（以靈芝孢子油計），g/100g≤0.20GB5009.227

4.3.2農(nóng)藥殘留應(yīng)符合表2規(guī)定

表2農(nóng)藥殘留指標(biāo)

最大殘留量

農(nóng)藥名稱殘留物檢測方法

mg/kg

丁硫克百威丁硫克百威0.01GB23200.13

GB23200.113、GB

樂果樂果0.0123200.116、GB/T

5009.145、GB/T20769、

α-硫丹和β-硫丹及硫丹

硫丹0.05GB/T5009.19

硫酸酯之和

GB23200.8、GB

殺撲磷殺撲磷0.0523200.113、GB23200.116、

GB/T4553、

GB23200.113、GB

乙酰甲胺磷乙酰甲胺磷0.0523200.116、GB/T

5009.103、GB/T5009.145

特丁硫磷及其氧類似物

特丁硫磷（亞砜、砜）之和，以特0.01SN/T4591

丁硫磷表示。

三氯沙螨醇（o，p'-異構(gòu)GB23200.110、

三氯沙螨醇0.01

體和p,p'-異構(gòu)體之和GB/T5009.176

4

4.4浸出物

照水溶性浸出物測定法（《中國藥典》通則2201）項下的熱浸法測定，不得少于7.0%。

4.5特征圖譜

照高效液相色譜法（《中國藥典》通則0512）測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以二氯甲烷-乙腈（32:68）

為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測。理論塔板數(shù)按甘油三油酸酯峰計算應(yīng)不低于3000。

參照物溶液的制備取本品0.1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入流動相25ml，

稱定重量，超聲處理（功率250W頻率40kHz）10分鐘，取出，稱定重量，用流動相補足減

失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

測定法分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定即得。

供試品特征圖譜中應(yīng)呈現(xiàn)5個特征峰，以參照物峰相應(yīng)的峰為S峰，計算各特征峰與S

峰，計算各特征峰與S峰的相對保留時間，其相對保留時間應(yīng)在規(guī)定值的±5%之內(nèi)。規(guī)定值

為0.94（峰1），0.768（峰2），0.807（峰3），1.000（峰S）及1.052（峰4），見圖1。

（單位：mAU）

4.6含量測定

應(yīng)符合表3規(guī)定。

表3標(biāo)志性成分指標(biāo)

項目指標(biāo)檢驗方法

多糖（以無水葡萄糖計），%≥0.9附件1

5

三萜（以齊墩果酸計），%≥2.0附件2

5中藥藥性

5.1

性味與歸經(jīng)：甘，微苦，平。歸心、肺、脾、腎經(jīng)。

5.2

功能與主治：健脾益氣，補肺止咳，養(yǎng)心安神，補腎益精。用于虛勞體弱，倦怠食少、病后體虛，腎

虛腰酸，心悸失眠，久咳虛喘，虛勞咯血。

5.3

用法與用量：藥材6-12克，建議破壁使用，服用飲片

6標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、運輸和貯藏

6.1

標(biāo)志、標(biāo)簽產(chǎn)品包裝物上的標(biāo)簽、標(biāo)示應(yīng)符合保健食品標(biāo)識規(guī)定。包裝儲運圖標(biāo)志應(yīng)符合

GB/T191的規(guī)定。

6.2

包裝包裝材料和容器應(yīng)符合國家有關(guān)規(guī)定及相關(guān)衛(wèi)生要求。

6.3

運輸運輸工具應(yīng)清潔衛(wèi)生，不得與有毒、有害、有異味的物品混裝、混運，防止日曬雨淋及

撞擊，小心輕放，不得壓踏。

6.4

貯藏

6.4.1

產(chǎn)品應(yīng)放在通風(fēng)干燥的倉庫內(nèi)，倉庫溫度不高于25°C、濕度不高于75%，嚴禁與有毒、有

害、有異味、影響產(chǎn)品質(zhì)量的物品混放。

6.4.2

應(yīng)距離周圍墻壁30cm以上，距離地面10cm以上。

6

飲片破壁靈芝孢子粉

1范圍

同靈芝孢子

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期

的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版權(quán)本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包

括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T191包裝儲運圖示標(biāo)志

GB/T4553工業(yè)硝酸鈉

GB4789.2食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定

GB4789.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群計數(shù)

GB4789.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗沙門氏菌檢驗

GB4789.10食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗金黃色葡萄球菌檢驗

GB4789.15食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗霉菌與酵母計數(shù)

GB5009.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測定

GB5009.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測定

GB5009.11食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機砷的測定

GB5009.12食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測定

GB5009.15食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鎘的測定

GB5009.17食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總汞及有機汞的測定

GB/T5009.19食品中有機氯農(nóng)藥多組分殘留量的測定

GB/T5009.103植物性食品中甲胺磷和乙酰甲胺磷農(nóng)藥殘留量的測定

GB5009.123食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉻的測定

GB5009.138食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鎳的測定

GB/T5009.145植物性食品中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多種殘留的測定

GB/T5009.176茶葉、水果、食用植物油中三氯殺螨醇殘留量的測定

GB5009.227食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中過氧化值的測定

GB23200.8食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定

7

氣相色譜-質(zhì)譜法

GB23200.13食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)茶葉中448種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定液相

色譜-質(zhì)譜法

GB23200.110食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中氯吡脲殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜

聯(lián)用法

GB23200.113食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

GB23200.116食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中90種有機磷類農(nóng)藥及其代謝物殘留

量的測定氣相色譜法

GB/T20769水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜

法

SN/T4591出口水果蔬菜中脫落酸等60種農(nóng)藥殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局令（2005）第5號《定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法》

國家市場監(jiān)督管理總局國家衛(wèi)生健康委員會國家中醫(yī)藥管理局2020年第54號公告《輔

Q10等五種保健食品原料目錄》附件2《保健食品原料目錄破壁靈芝孢子粉》（以下簡稱公告

附錄2）

《中國藥典》

《四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》2010年版

《福建省中藥飲片炮制規(guī)范》2012年版

《浙江省中藥炮制規(guī)范》2015年版

《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)第三冊》2019年版

《安徽省中藥飲片炮制規(guī)范》2019年版

《重慶市中藥材標(biāo)準(zhǔn)》（DB50/YC044-2022）

3來源

破壁靈芝孢子粉為多孔菌科真菌赤芝（Ganodermalucidum(Leyss.exFr.)Karst.）、

紫芝（GanodermasinenseZhao,XuetZhang）、松杉靈芝（Ganodermatsugae）的干燥成熟

孢子，經(jīng)滅菌(輻照滅菌和濕熱滅菌等滅菌方法），干燥，低溫物理破壁，過篩制得。

4質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

8

4.1性狀

棕褐色；氣微，味淡或微苦；無結(jié)塊，干燥疏松細膩粉末，無粘連，無沙粒感，無正常

視力可見外來異物

4.2鑒別

4.2.1顯微鑒別：粉末棕褐色，置顯微鏡下觀察，孢壁多破碎，可見多數(shù)黃褐色的大小不

等的微粒、孢子破碎程度不同的殼段或孢子破碎后里面的黃色至黃褐色的內(nèi)容物，少見有未破

壁的孢子，不得檢出子實體、菌絲、淀粉粒等異物。

4.2.2取本品2g，加乙醚50ml，超聲處理30分鐘（功率300W，頻率40kHz)，放冷，

濾過，濾液低溫蒸干，殘渣加三氯甲烷lml使溶解，作為供試品溶液。另取靈芝孢子對照藥

材2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》通則0502）試驗，吸取上述兩種

溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（4﹕1）為展開劑，展開，

取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，置紫外光燈（365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照

藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

4.2.3取本品lg，加水50ml，加熱回流1小時，趁熱濾過，濾液置蒸發(fā)皿中，用少量

水分次洗滌容器，合并洗液與濾液，置水浴上蒸干，殘渣用水5ml溶解，置50ml離心管中，

緩緩加入乙醇25ml，不斷攪拌，放置1小時，離心（轉(zhuǎn)速4000轉(zhuǎn)/分鐘），沉淀物用乙醇10ml

洗滌，離心。取沉淀物，烘干，放冷，加4mol/L三氟乙酸溶液2ml，置10ml頂空瓶（或安

瓿瓶）中，封口，混勻，在120℃水解3小時放冷，水解液轉(zhuǎn)移至50ml燒瓶中，用2ml水

洗滌容器，洗滌液并入燒瓶中，60℃減壓蒸干，用70%乙醇2ml溶解，置離心管中，離心，

取上清液作為供試品溶液。另取靈芝孢子對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。再取半乳

糖對照品、葡萄糖對照品、甘露糖對照品適量，精密稱定，加70%乙醇制成每lml各含0.1mg

的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》通則0502）試驗，吸取上述三

種溶液各3μ1，分別點于同一硅膠G薄層板（Merck或效能相當(dāng)?shù)谋影澹┥?，以正丁?

丙酮-水（5﹕1﹕1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以對氨基苯甲酸溶液（取4-氨基苯

甲酸0.5g，溶于冰醋酸9ml中，加水10ml和85%磷酸溶液0.5ml，混勾，即得），在105℃

加熱約10分鐘，置紫外光燈（365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品

色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

4.3檢查

4.3.1理化指標(biāo)

破壁率%≥95，檢驗方法見附件3。

9

水分、總灰分、重金屬等同靈芝孢子。

4.3.2農(nóng)藥殘留

同靈芝孢子

4.3.3微生物

應(yīng)符合表4規(guī)定。

表4微生物指標(biāo)

項目指標(biāo)檢驗方法

菌落總數(shù)，CFU/g≤30000GB4789.2

霉菌和酵母，CFU/g≤50GB4789.15

大腸菌群，MPN/g≤0.92GB4789.3MPN計數(shù)法

沙門氏菌≤0/25gGB4789.4

金黃色葡萄球菌≤0/25gGB4789.10

4.4浸出物

同靈芝孢子

4.5特征圖譜

同靈芝孢子

4.6含量測定

應(yīng)符合表5規(guī)定。

表5標(biāo)志性成分指標(biāo)

項目指標(biāo)檢驗方法

多糖（以無水葡萄糖計），%≥0.9附件1

三萜（以齊墩果酸計），%≥2.0附件2

5中藥藥性

性味與歸經(jīng)、功能與主治同靈芝孢子，用法與用量：開水沖服1-6g。

6標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、運輸和貯藏

6.1

標(biāo)志、標(biāo)簽產(chǎn)品包裝物上的標(biāo)簽、標(biāo)示應(yīng)符合保健食品標(biāo)識規(guī)定。包裝儲運圖標(biāo)志應(yīng)符合

GB/T191的規(guī)定。

10

6.2

包裝包裝材料和容器應(yīng)符合國家有關(guān)規(guī)定及相關(guān)衛(wèi)生要求。

6.3

運輸運輸工具應(yīng)清潔衛(wèi)生，不得與有毒、有害、有異味的物品混裝、混運，防止日曬雨淋及

撞擊，小心輕放，不得壓踏。

6.4貯藏

低溫密閉保存

11

附件1

多糖的測定

1試劑和材料

1.1硫酸（分析純）

1.2葡萄糖（分析純）

1.3無水乙醇（分析純）

1.4硫酸蒽酮溶液：精密稱取蒽酮0.1g，加硫酸溶液100mL使溶解，搖勻，置于棕色瓶中

即得。

2儀器和設(shè)備

2.1分析天平（感量0.0001g）

2.2分光光度計

2.3玻璃回流裝置

2.4電熱恒溫水浴鍋

2.5容量瓶25mL，50mL容量瓶

2.6各規(guī)格移液管

2.7具塞試管25mL

2.8濾紙（中速定性濾紙）。

3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

3.1對照品溶液的制備

取無水葡萄糖對照品適量，精密稱定加水制成每1mL含0.12mg的溶液，即得。

3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精密量取對照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL，分別置于10mL的具塞試管

中，各加水至2.0mL，迅速精密加入硫酸蒽酮溶液6mL，立即搖勻，放置15min，立即置

冰水浴中冷卻15min，取出，以相應(yīng)的試劑為空白，在625nm處測定吸光度，以吸光度為

縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

12

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

4供試品溶液的制備

取本品粉末約2g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加水60mL，靜置1h，加熱回流4h，趁熱

過濾，用少量熱水洗滌濾器和濾渣，將濾紙和濾渣置圓底燒瓶中，加水60mL，加熱回流3h，

趁熱過濾，合并濾液，置水浴鍋上蒸干，殘渣用水5mL溶解，邊攪拌邊緩慢加入乙醇75mL，

搖勻，在4℃放置12h，離心，棄去上清液，沉淀物用熱水溶解并轉(zhuǎn)移至50mL，放冷，加水

至刻度，搖勻取溶液適量，離心，精密量取上清液3mL，置25mL量瓶，加水至刻度，搖勻，

即得。

5測定

精密量取供試品溶液2mL，置10mL具塞試管中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下的方法，自“迅

速精密加入硫酸蒽酮溶液6mL”起，同法操作，測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液

中無水葡萄糖的含量，計算即得。

6結(jié)果計算

c82550

W23100

m

式中：

W-多糖的含量，%；

c-從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查的樣品的多糖濃度，mg/mL；

m-樣品質(zhì)量，mg；

8、25-表示稀釋倍數(shù)。

23

50-水提醇沉后獲得的沉淀物經(jīng)熱水溶解定容的體積數(shù)值

13

附件2

三萜的含量和測定

1試劑和材料

1.1高氯酸（分析純）

1.2齊墩果酸（分析純）

1.3乙酸乙酯（分析純）

1.4乙醇（分析純）

1.5香草醛冰醋酸溶液：精密稱取香草醛0.5g，加冰醋酸使溶解成10ml，即得。

2儀器和設(shè)備

2.1分析天平（感量0.0001g）

2.2分光光度計

2.3具塞試管

2.4電熱恒溫水浴鍋

2.5容量瓶25mL，50mL容量瓶

2.6各規(guī)格移液管

3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

3.1對照品溶液的制備

對照品溶液的制備取齊墩果酸對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.2mg

的溶液，即得。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對照品溶液0.lml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml，分別置

15ml具塞試管中，揮干，放冷，精密加入新配制的香草醛冰醋酸溶液（精密稱取香草醛0.5g，

加冰醋酸使溶解成10ml，即得）0.2ml、高氯酸0.8ml，搖勻，在70℃水浴中加熱15分鐘，

立即置冰浴中冷卻5分鐘，取出，精密加入乙酸乙酯4ml，搖勻，以相應(yīng)試劑為空白，照紫

外-可見分光光度法（通則0401），在546nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)、濃度

為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

供試品溶液的制備取本品粉末約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加乙醇50ml，超

聲處理（功率140W，頻率42kHz）45分鐘，濾過，濾液置100ml量瓶中，用適量乙醇，分

次洗滌濾器和濾渣，洗液并入同一量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，即得。

14

測定法精密量取供試品溶液0.2ml，置15ml具塞試管中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下的方

法，自“揮干”起，同法操作，測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中齊墩果酸的含

量，計算，即得。

15

附件3

破壁率的測定

3.1儀器與設(shè)備

3.1.1血球計數(shù)板：25個中格×16個小格或16個中格×25個小格。

3.1.2電子分析天平：精度0.1mg。

3.1.3超聲波清洗器：功率≥45W。

3.1.4光學(xué)顯微鏡：放大倍數(shù)≥200。

3.1.5烘箱。

3.2試劑和溶液

除非另有規(guī)定，本方法中所用試劑均為分析純。

3.2.1實驗用水應(yīng)符合GB/T6682規(guī)定的三級水規(guī)格。

3.2.2吐溫80。

3.2.3蔗糖。

3.3樣品制備

分別取同一批次有代表性靈芝孢子粉和破壁靈芝孢子粉的樣品各至少100g，分別充分混

勻，置于密閉的容器內(nèi)。

3.4分析步驟

3.4.1取適量同一批次的靈芝孢子粉A和破壁靈芝孢子粉B，于烘箱60℃下烘干5h。

3.4.2準(zhǔn)確稱取經(jīng)烘干的孢子粉A和破壁靈芝孢子粉B，其中mA=0.1000g，mB=0.1500g。

3.4.3分別稱取5.0g經(jīng)過研磨后過100目篩的蔗糖粉末，分別與孢子粉A、B充分混合至色澤

均一。用蒸餾水分別溶解上述樣品，在樣品溶液中加0.1mL吐溫80，用蒸餾水定容到100mL

的容量瓶中，并在室溫超聲震蕩30min，使孢子充分分散。

3.4.4將待測孢子懸液，用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣，使液體緩緩滲入，多余的液體用

吸水紙吸取，進樣完成后靜置約30s，然后將血球計數(shù)板置于200倍及以上放大倍數(shù)的光學(xué)顯

微鏡下進行觀察計數(shù)。

3.4.5使用25個中格×16個小格的計數(shù)板時，應(yīng)計算出血球計數(shù)板4個角上與中央5個中格

中含完整靈芝孢子的數(shù)目（即以80個小格為一個計數(shù)單位）；當(dāng)使用16個中格×25個小格的

計數(shù)板時，應(yīng)計算出血球計數(shù)板4個角上的4個中格中含完整靈芝孢子的數(shù)目（即以100個小

格為一個計數(shù)單位）。如有部分孢子處于中格邊線上，計數(shù)時應(yīng)該僅統(tǒng)計位于中格四個邊線的其

16

中兩個邊線的孢子數(shù)，每個樣品觀察計數(shù)時應(yīng)去掉離群較大的值，每個樣品有效觀察計數(shù)不少

于3次，然后計算它們的平均數(shù)n。

3.5結(jié)果計算

3.5.1使用25個中格×16個小格的計數(shù)板時，每克孢子粉中含完整靈芝孢子數(shù)按式（1.1）計

算：

（1.1）

式中：

N——每克孢子粉含完整的靈芝孢子數(shù)，單位為個每克（個/g）；

n——80個小方格內(nèi)含完整靈芝孢子的總數(shù)，單位為個；

V——孢子稀釋液的體積，單位為毫升（mL）；

m——樣品的質(zhì)量，單位為克（g）；

400——血球計數(shù)板的計數(shù)室內(nèi)共有400個小方格；

10000——血球計數(shù)板計數(shù)室的容積為0.1mm3，1mL相當(dāng)于10000個血球計數(shù)板計數(shù)室的容

積。

3.5.2使用16個中格×25個小格的計數(shù)板時，每克孢子粉中含完整靈芝孢子數(shù)按式（1.2）計

算：

（1.2）

式中：

N——每克孢子粉含完整的靈芝孢子數(shù)，單位為個每克（個/g）；

n——100個小方格內(nèi)含完整靈芝孢子的總數(shù)，單位為個；

V——孢子稀釋液的體積，單位為毫升（mL）；

m——樣品的質(zhì)量，單位為克（g）；

400——血球計數(shù)板的計數(shù)室內(nèi)共有400個小方格；

10000——血球計數(shù)板計數(shù)室的容積為0.1mm3，1mL相當(dāng)于10000個血球計數(shù)板計數(shù)室的

容積。

3.5.3破壁率按式（1.3）計算：

（1.3）

式中：

X——破壁靈芝孢子粉的破壁率，%；

17

NB——每克破壁靈芝孢子粉中含完整的靈芝孢子數(shù)，單位為個每克（個/g）；

NA——每克靈芝孢子粉中含完整的靈芝孢子數(shù)，單位為個每克（個/g）。

18

目次

前言.....................................................................III

靈芝孢子中藥標(biāo)準(zhǔn).............................................................1

1范圍.......................................................................1

2規(guī)范性引用文件.............................................................1

3來源.......................................................................2

4質(zhì)量要求....................................................................2

4.1性狀..................................................................2

4.2鑒別.................................................................2

4.3檢查.................................................................3

4.4浸出物...............................................................5

4.5特征圖譜.............................................................5

4.6含量測定..............................................................5

5中藥藥性....................................................................6

5.2......................................................................6

6標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、運輸和貯藏...............................................6

6.1......................................................................6

1范圍.......................................................................7

2規(guī)范性引用文件.............................................................7

3來源.......................................................................8

4質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)...................................................................8

4.1性狀..................................................................9

4.2鑒別.................................................................9

4.3檢查.................................................................9

4.4浸出物..............................................................10

4.5特征圖譜............................................................10

4.6含量測定............................................................10

5中藥藥性..................................................................10

6標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、運輸和貯藏..............................................10

I

6.2.....................................................................11

6.4貯藏.................................................................11

1試劑和材料.................................................................12

2儀器和設(shè)備................................................................12

3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備.............................................................12

3.1對照品溶液的制備.....................................................12

3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制........................................................12

4供試品溶液的制備...........................................................13

5測定.......................................................................13

6結(jié)果計算...................................................................13

附件2...................................................................14

1試劑和材料.................................................................14

2儀器和設(shè)備................................................................14

3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備.............................................................14

3.1對照品溶液的制備.....................................................14

3.1儀器與設(shè)備...........................................................16

3.2試劑和溶液...........................................................16

3.3樣品制備.............................................................16

3.4分析步驟.............................................................16

3.5結(jié)果計算.............................................................17

II

靈芝孢子中藥標(biāo)準(zhǔn)

1范圍

本文件制定了靈芝孢子的來源、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、試驗方法、中藥藥性、標(biāo)志、標(biāo)簽、包裝、

運輸和貯藏。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于靈芝孢子生產(chǎn)、檢驗與銷售以及國際貿(mào)易和交流。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期

的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版權(quán)本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包

括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T191包裝儲運圖示標(biāo)志

GB/T4553工業(yè)硝酸鈉

GB5009.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測定

GB5009.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測定

GB5009.11食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機砷的測定

GB5009.12食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測定

GB5009.15食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鎘的測定

GB5009.17食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總汞及有機汞的測定

GB/T5009.19食品中有機氯農(nóng)藥多組分殘留量的測定

GB/T5009.103植物性食品中甲胺磷和乙酰甲胺磷農(nóng)藥殘留量的測定

GB5009.123食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉻的測定

GB5009.138食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鎳的測定

GB/T5009.145植物性食品中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多種殘留的測定

GB/T5009.176茶葉、水果、食用植物油中三氯殺螨醇殘留量的測定

GB5009.227食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中過氧化值的測定

GB23200.8食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定

氣相色譜-質(zhì)譜法

GB23200.13食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)茶葉中448種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定液相

色譜-質(zhì)譜法

1

GB23200.110食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中氯吡脲殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜

聯(lián)用法

GB23200.113食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

GB23200.116食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中90種有機磷類農(nóng)藥及其代謝物殘留

量的測定氣相色譜法

GB/T20769水果和蔬菜中450種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定