合成生物底盤(pán)細(xì)胞篩選工程師崗位招聘考試試卷及答案填空題（每題1分，共10分）1.合成生物底盤(pán)篩選中，常用的酶類(lèi)報(bào)告基因是______2.底盤(pán)細(xì)胞的核心特征之一“可預(yù)測(cè)性”指______3.FACS技術(shù)的全稱(chēng)是______4.原核底盤(pán)細(xì)胞中，常用于異源表達(dá)的是______5.底盤(pán)細(xì)胞“正交性”的核心是______6.CRISPR-Cas9編輯中，gRNA的作用是______7.底盤(pán)篩選的第一步是______8.真核底盤(pán)細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)是______9.13C標(biāo)記技術(shù)用于檢測(cè)______10.最小基因組底盤(pán)的設(shè)計(jì)目標(biāo)是______單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.下列哪種是真核底盤(pán)細(xì)胞？A.大腸桿菌B.枯草芽孢桿菌C.釀酒酵母D.谷氨酸棒桿菌2.FACS篩選的核心依據(jù)是細(xì)胞的______A.大小B.熒光信號(hào)C.密度D.電荷3.底盤(pán)篩選中，報(bào)告基因的作用是______A.直接合成目標(biāo)產(chǎn)物B.指示功能活性C.提高生長(zhǎng)速率D.降低代謝負(fù)擔(dān)4.可用于底盤(pán)定向進(jìn)化的技術(shù)是______A.二代測(cè)序B.流式分選C.噬菌體展示D.以上都是5.底盤(pán)細(xì)胞需避免的特性是______A.代謝冗余B.正交性C.可編輯性D.穩(wěn)定性6.CRISPR-Cas9不能實(shí)現(xiàn)的是______A.基因敲除B.基因插入C.基因沉默D.蛋白翻譯后修飾7.底盤(pán)評(píng)估的關(guān)鍵指標(biāo)不包括______A.生長(zhǎng)速率B.產(chǎn)物產(chǎn)量C.細(xì)胞大小D.遺傳穩(wěn)定性8.質(zhì)譜可用于檢測(cè)底盤(pán)的______A.代謝物組成B.基因序列C.蛋白表達(dá)量D.細(xì)胞形態(tài)9.畢赤酵母的優(yōu)勢(shì)是______A.原核生長(zhǎng)快B.蛋白分泌表達(dá)C.基因組最小D.無(wú)翻譯后修飾10.最小基因組底盤(pán)保留的是______A.所有基因B.必需基因C.非必需基因D.抗性基因多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.底盤(pán)細(xì)胞的核心特征包括______A.可預(yù)測(cè)性B.正交性C.魯棒性D.代謝冗余2.常用原核底盤(pán)有______A.大腸桿菌B.枯草芽孢桿菌C.谷氨酸棒桿菌D.釀酒酵母3.高通量篩選技術(shù)包括______A.FACSB.微孔板篩選C.二代測(cè)序D.氣相色譜4.報(bào)告基因類(lèi)型有______A.GFPB.CATC.抗性基因D.目標(biāo)產(chǎn)物基因5.底盤(pán)改造技術(shù)包括______A.CRISPR-Cas9B.同源重組C.定向進(jìn)化D.RNAi6.底盤(pán)代謝評(píng)估指標(biāo)包括______A.碳源利用效率B.產(chǎn)物產(chǎn)量C.副產(chǎn)物積累D.生長(zhǎng)速率7.真核底盤(pán)優(yōu)勢(shì)包括______A.翻譯后修飾B.復(fù)雜代謝表達(dá)C.遺傳穩(wěn)定D.生長(zhǎng)快8.底盤(pán)篩選步驟包括______A.目標(biāo)定義B.候選構(gòu)建C.高通量篩選D.性能驗(yàn)證9.代謝流分析技術(shù)有______A.13C標(biāo)記B.質(zhì)譜C.NMRD.HPLC10.底盤(pán)設(shè)計(jì)原則包括______A.模塊化B.正交性C.魯棒性D.可擴(kuò)展性判斷題（每題2分，共20分）1.釀酒酵母是原核底盤(pán)細(xì)胞→______2.FACS可高通量篩選熒光報(bào)告基因陽(yáng)性細(xì)胞→______3.底盤(pán)正交性指元件與內(nèi)源系統(tǒng)交叉干擾→______4.CRISPR-Cas9只能敲除不能插入基因→______5.最小基因組保留所有必需基因→______6.報(bào)告基因可直接作為目標(biāo)產(chǎn)物→______7.高通量篩選無(wú)需考慮準(zhǔn)確性→______8.畢赤酵母適合分泌蛋白表達(dá)→______9.底盤(pán)代謝負(fù)擔(dān)越小越好→______10.定向進(jìn)化可優(yōu)化底盤(pán)性能→______簡(jiǎn)答題（每題5分，共20分）1.簡(jiǎn)述底盤(pán)細(xì)胞篩選的核心流程2.報(bào)告基因在底盤(pán)篩選中的作用是什么？3.CRISPR-Cas9在底盤(pán)改造中的應(yīng)用有哪些？4.底盤(pán)魯棒性的定義及評(píng)估方法？討論題（每題5分，共10分）1.如何平衡底盤(pán)“最小化”與“魯棒性”？2.高通量篩選底盤(pán)的局限性及解決思路？---答案部分填空題答案1.氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶（CAT）2.元件功能可預(yù)測(cè)3.熒光激活細(xì)胞分選4.大腸桿菌5.元件與內(nèi)源系統(tǒng)無(wú)交叉干擾6.引導(dǎo)Cas9定位目標(biāo)DNA7.明確底盤(pán)功能需求8.蛋白翻譯后修飾9.代謝通量10.保留必需基因單項(xiàng)選擇題答案1.C2.B3.B4.D5.A6.D7.C8.A9.B10.B多項(xiàng)選擇題答案1.ABC2.ABC3.ABC4.AB5.ABCD6.ABCD7.AB8.ABCD9.ABC10.ABCD判斷題答案1.×2.√3.×4.×5.√6.×7.×8.√9.√10.√簡(jiǎn)答題答案1.核心流程：①目標(biāo)定義：明確底盤(pán)功能（如產(chǎn)物合成）、遺傳特性；②候選構(gòu)建：通過(guò)編輯、定向進(jìn)化獲得候選菌株；③高通量篩選：用FACS、微孔板等基于報(bào)告基因篩選；④性能驗(yàn)證：小試發(fā)酵、遺傳穩(wěn)定、代謝通量驗(yàn)證。2.報(bào)告基因作用：①功能指示：通過(guò)熒光/酶活性反映底盤(pán)功能；②高通量兼容：適配FACS等快速篩選；③簡(jiǎn)化流程：無(wú)需直接檢測(cè)目標(biāo)產(chǎn)物，提高篩選效率。3.CRISPR應(yīng)用：①基因敲除：去除冗余基因；②插入/替換：導(dǎo)入正交元件；③調(diào)控表達(dá)：dCas9調(diào)控基因水平；④多基因編輯：同步編輯多基因加速優(yōu)化。4.魯棒性：指環(huán)境/遺傳擾動(dòng)下維持功能的能力。評(píng)估：①環(huán)境壓力測(cè)試（溫度、底物）；②遺傳擾動(dòng)測(cè)試（插入元件）；③長(zhǎng)期傳代驗(yàn)證穩(wěn)定性。討論題答案1.平衡策略：①保留必需基因（核心功能）；②保留關(guān)鍵調(diào)控元件（