生物技術(shù)專業(yè)XX生物科技企業(yè)研發(fā)實(shí)習(xí)報(bào)告一、摘要

2023年7月1日至2023年8月31日，我在XX生物科技企業(yè)研發(fā)部門擔(dān)任實(shí)驗(yàn)助理，參與抗體藥物開發(fā)項(xiàng)目。核心工作成果包括完成12批次細(xì)胞培養(yǎng)，通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)確認(rèn)表達(dá)量最高的批次，表達(dá)量較初始批次提升35%；優(yōu)化了蛋白純化工藝，純化回收率達(dá)到68%，縮短了純化周期2天。期間應(yīng)用了分子克隆、蛋白質(zhì)電泳、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)等專業(yè)技能，熟練掌握實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析及GraphPadPrism軟件繪圖。提煉出標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)流程記錄方法，可減少實(shí)驗(yàn)誤差20%；建立動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)體系，使項(xiàng)目周期縮短15%。

二、實(shí)習(xí)內(nèi)容及過程

2023年7月1日至8月31日，我在XX生物科技企業(yè)研發(fā)部實(shí)習(xí)。部門主要聚焦單克隆抗體藥物開發(fā)，我參與的是一款治療性抗體的工藝優(yōu)化項(xiàng)目。實(shí)習(xí)初期，跟著導(dǎo)師熟悉細(xì)胞株操作，7月5日完成第一批次雜交瘤細(xì)胞復(fù)蘇，培養(yǎng)過程中遇到細(xì)胞污染問題，花了3天時(shí)間用慶大霉素和聚維酮碘交替處理，最終通過平板劃線法確認(rèn)無菌狀態(tài)，細(xì)胞存活率恢復(fù)到92%。7月10日開始分子克隆實(shí)驗(yàn)，將抗體基因亞克隆到表達(dá)載體，通過藍(lán)白斑篩選陽(yáng)性克隆，共獲得8個(gè)候選質(zhì)粒。7月20日轉(zhuǎn)染293F細(xì)胞，8月5日通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)上清，最高表達(dá)批次抗體濃度達(dá)12ug/mL，比初始批次高40%。期間負(fù)責(zé)蛋白純化，8月15日優(yōu)化了蛋白A磁珠純化條件，回收率從55%提升到68%，純化后的抗體純度通過SDSPAGE檢測(cè)達(dá)到95%。8月25日遇到純化柱堵塞問題，排查發(fā)現(xiàn)是上樣流速過快導(dǎo)致，調(diào)整后順利解決。實(shí)習(xí)期間參與了3次項(xiàng)目組周會(huì)，了解抗體從細(xì)胞株篩選到臨床前樣品制備的全流程。最大的挑戰(zhàn)是8月10日實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)缺失，因?yàn)橥浻涗浤硞€(gè)批次抗體濃度，臨時(shí)用HPLC補(bǔ)測(cè)，耽誤了1天時(shí)間，后來制定了電子實(shí)驗(yàn)記錄本，所有數(shù)據(jù)實(shí)時(shí)同步，避免類似問題。實(shí)習(xí)讓我明白抗體開發(fā)不是單點(diǎn)實(shí)驗(yàn)，而是環(huán)環(huán)相扣的體系，比如細(xì)胞培養(yǎng)和純化條件必須反復(fù)驗(yàn)證。缺點(diǎn)是公司培訓(xùn)偏重實(shí)操，理論講解不足，比如流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)分析就沒人系統(tǒng)教，只能自己看書補(bǔ)。如果改進(jìn)，建議增加每周1次專題分享會(huì)，或者提供在線學(xué)習(xí)資源。這段經(jīng)歷讓我意識(shí)到，做研發(fā)既要?jiǎng)邮帜芰?，也要學(xué)會(huì)管理細(xì)節(jié)，現(xiàn)在看項(xiàng)目報(bào)告都能發(fā)現(xiàn)以前忽略的關(guān)聯(lián)性，比如細(xì)胞培養(yǎng)密度直接影響下游純化效率。

三、總結(jié)與體會(huì)

這8周實(shí)習(xí)，讓我把書本里抗體表達(dá)的章節(jié)真正落地了。7月1號(hào)剛來時(shí)，對(duì)著細(xì)胞培養(yǎng)板都發(fā)怵，8月31號(hào)離開時(shí)，獨(dú)立優(yōu)化純化工藝把回收率從55%提到68%，心里挺踏實(shí)。這中間經(jīng)歷的最刺激的是8月15號(hào)那會(huì)，調(diào)整了3次轉(zhuǎn)染試劑比例，終于讓293F細(xì)胞表達(dá)量提升了近一倍，從酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）測(cè)的12ug/mL到接近20ug/mL，雖然離目標(biāo)還有距離，但那種把實(shí)驗(yàn)一點(diǎn)點(diǎn)推向成功的感受，比考高分還讓人有成就感。

實(shí)習(xí)最大的收獲是看清了理論和實(shí)踐的差距。學(xué)校教蛋白質(zhì)電泳時(shí)，老師強(qiáng)調(diào)看條帶清晰度，公司里用SDSPAGE主要是看純度，要結(jié)合分子量計(jì)算和蛋白A結(jié)合能力綜合判斷。這種差異以前沒意識(shí)到，現(xiàn)在再看文獻(xiàn)就會(huì)主動(dòng)關(guān)注工藝參數(shù)對(duì)純化效果的影響。公司8月20號(hào)那次小規(guī)模發(fā)酵失敗，細(xì)胞裂解不徹底，純化時(shí)好多雜質(zhì)，最后花了2天時(shí)間重新設(shè)計(jì)裂解緩沖液配方才解決。這件事讓我明白，做研發(fā)不能光靠想，得有面對(duì)失敗的心理準(zhǔn)備和快速解決問題的能力。

這段經(jīng)歷也讓我更清楚自己想要什么。之前覺得抗體開發(fā)就是做實(shí)驗(yàn)，現(xiàn)在知道項(xiàng)目管理、成本控制同樣重要。比如8月25號(hào)純化柱堵塞，單純技術(shù)層面是流速問題，但后來主管提醒我，如果提前知道后續(xù)純化量，可以選更大孔徑的柱子，或者分批處理，能省下不少成本。這讓我覺得，以后想進(jìn)研發(fā)崗，光懂技術(shù)不夠，還得懂怎么更高效、更經(jīng)濟(jì)地做事。

對(duì)未來的規(guī)劃更具體了。現(xiàn)在清楚自己缺哪些技能，比如細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力檢測(cè)，學(xué)校用的臺(tái)式計(jì)數(shù)板，公司早早就換成自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀了，下次做實(shí)驗(yàn)前得先去實(shí)驗(yàn)室看看學(xué)會(huì)用。另外8月份看項(xiàng)目報(bào)告時(shí)，發(fā)現(xiàn)好幾個(gè)文獻(xiàn)引用不規(guī)范的地方，打算下學(xué)期考個(gè)專利檢索證書，以后看文獻(xiàn)能更準(zhǔn)。行業(yè)里現(xiàn)在都說ADC藥物（抗體偶聯(lián)藥物）是趨勢(shì)，公司里做那款抗體的同事說，明年可能要接觸一些新型偶聯(lián)技術(shù)，雖然我實(shí)習(xí)沒參與，但知道該往哪個(gè)方向補(bǔ)課了。從學(xué)生到職場(chǎng)人的感覺就是，以前做實(shí)驗(yàn)怕出錯(cuò)，現(xiàn)在知道出錯(cuò)是常態(tài)，重要的是怎么快速?gòu)腻e(cuò)誤里學(xué)到東西，然后改進(jìn)。這8周讓我明白，真正的成長(zhǎng)不是沒犯過錯(cuò)，而是每次犯錯(cuò)都離真本事近了一步。

四、致謝

在XX生物科技企業(yè)研發(fā)部門實(shí)習(xí)的8周里，得到了很多幫助。謝謝導(dǎo)師帶我熟悉抗體開發(fā)流程，特別是8月5號(hào)那次ELISA數(shù)據(jù)解讀，幫我理清了表達(dá)量和后續(xù)純化的關(guān)聯(lián)。謝謝實(shí)驗(yàn)室的同事，比如8月15號(hào)幫忙調(diào)試轉(zhuǎn)染條件的小張，還有負(fù)責(zé)發(fā)酵