1、第二章中藥制劑的鑒別，第一節(jié)性狀鑒別第二節(jié)顯微鑒別第三節(jié)理化鑒別，中藥制劑的鑒別，教學(xué)大綱掌握建立中藥制劑薄層色譜定性鑒別方法的方法。 精通中藥制劑的顯微鑒別、熒光鑒別、可見光光譜鑒別方法。 研究中藥制劑的氣相色譜、高效液相色譜的定性鑒別方法。 第一節(jié)性狀鑒別、概念1 .中藥制劑的鑒別：用一定的方法確定中藥制劑中原料藥的組成，判斷該制劑的真?zhèn)巍?2 .中藥制劑鑒別的主要內(nèi)容：包括性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別等方面，可在性狀鑒別中進(jìn)行相應(yīng)的物理常數(shù)的測定。 3、中藥制劑的性狀：除包裝后的性狀外，指產(chǎn)品的顏色、形態(tài)、氣味等。 第一節(jié)性狀鑒別、性狀鑒別內(nèi)容及記述方法：顏色：從單色到組合顏色，如紅色深

2、褐色、黃色茶色等。 形態(tài)：液體可分為粘稠液體、液體、澄清液體、澄清液體等。 形狀：栓劑分為球形、魚雷形、圓錐形、卵形、鴨嘴形等。 氣：可分為香、芳香、清香、腥味、臭味、特異、氣弱、香氣強等。 味道：分為甜、酸、苦、澀、辣、冷、辣、麻等。 其他：光澤感、光滑等。 第一節(jié)性狀鑒別、各種劑型的性狀記述在記述制劑性狀特征時，應(yīng)該指導(dǎo)中醫(yī)藥理論。 水丸沉香化氣丸：本品為從灰褐色到黃褐色的水丸香氣，甜味，苦味。 片劑牛黃解毒片：本品為素片或包衣片，除去素片或包衣后芯有呈黃褐色的沃爾沃香味，味苦、辣。 糖漿劑川貝枇杷糖漿：本品為茶色粘稠液，香氣、甜、苦、涼。第一節(jié)性狀鑒別、物理常數(shù)測定物理常數(shù)中包含折射率、

3、旋轉(zhuǎn)光度、比旋轉(zhuǎn)度、凝固點、熔點、相對密度等。 測定這些物理常數(shù)是定性鑒別的手段之一。第二節(jié)顯微鑒別、概念中藥制劑的顯微鑒別：利用顯微鏡觀察中藥制劑中原藥材的組織片斷、細(xì)胞和內(nèi)容物等特征，鑒別制劑的處方組成。 將生藥粉碎成微粉后，直接制成制劑，或添加了一部分生藥粉末的制劑，由于其制造過程中中原生藥的顯微特征殘留在制劑中，就可以用顯微定性鑒別法進(jìn)行鑒別。 第二節(jié)的顯微鑒別、特征和制作方法中藥制劑一般由二味以上的藥材組成，制劑中各藥材和輔助材料的顯微1 .特征相互影響或干擾。 由于制造技術(shù)不同，部分藥材自身的組織結(jié)構(gòu)特征已經(jīng)不存在。 第二節(jié)顯微鑒別、散劑、膠囊劑：取少量粉末，用適當(dāng)?shù)脑囼炓禾幚砗螅?/p>

4、直接進(jìn)行顯微觀察。 片劑：切開，取少量樣品，觀察的粉末過粗，先仔細(xì)研究糖衣片，將糖衣除去后再細(xì)化。 水丸、顆粒劑：在乳缽內(nèi)制成粉末進(jìn)行觀察。 蜜丸氫氧化鉀法、硝酸鉻酸法、氯酸鉀法、水和法、第二節(jié)顯微鑒別、難點在本法鑒別中表明，中草藥原有的組織結(jié)構(gòu)特征只有留在制劑中才有鑒別意義。 因此，一般從溶劑中提取的制劑都無需用這種方法進(jìn)行鑒別。 根據(jù)劑型的不同，其制作方法也不同。 應(yīng)該選擇對該制劑沒有干涉、顯示味藥存在的顯著特征作為鑒別的根據(jù)。 第三節(jié)理化學(xué)鑒別，概念1 .中藥制劑的理化學(xué)鑒別：用物理、化學(xué)或物理化學(xué)的方法對制劑中含有的化學(xué)成分進(jìn)行定性鑒別，判斷制劑的真?zhèn)巍?中藥制劑的理化定性鑒別方法有一

5、般化學(xué)反應(yīng)法、升華法、分光法、色譜法等。 其中最常用的是薄層色譜。、第三節(jié)理化學(xué)鑒別、1 .化學(xué)反應(yīng)法2 .升華法3 .紙色譜4 .分光法薄層色譜鑒別方法5 .色譜薄層掃描法氣相色譜高效液相色譜6 .其他方法： X射線衍射法，導(dǎo)數(shù)分光、第三節(jié)理化學(xué)鑒別、化學(xué)反應(yīng)法用50%70%乙醇回流提?。禾崛《喾N成分用酸性乙醇回流提取：檢查酚類、有機酸、生物堿等。 a .室溫浸漬：檢查氨基酸、蛋白質(zhì)。 用水提取B.60開水：檢測單糖、多糖、皂甙、單寧及其他糖苷。 a .濾液檢驗酯、內(nèi)酯、糖苷； 用醚提取b .藥渣揮發(fā)醚，甲醇回流提?。簷z測各種糖苷用升華法提?。荷A的成分，如游離蒽醌苷等水蒸氣蒸餾法提?。簱]發(fā)

6、性成分。 避免特性差的化學(xué)反應(yīng)，如、1樣品提取、第三節(jié)理化學(xué)鑒別、化學(xué)反應(yīng)法泡沫生成反應(yīng)、氯化鐵顯色反應(yīng)等。 2 .注意事項通過在分析前分離、純化樣品，去除妨礙鑒別反應(yīng)的物質(zhì)，改善鑒別方法的特性。 采用陰性對照和陽性對照的方式，反復(fù)驗證制作的鑒別方法，防止假陽性。 第三節(jié)理化學(xué)鑒別，升華法是利用這種方法來鑒別中藥制劑中有升華性的化學(xué)成分。 操作方法：取出金屬片，放在圓孔的石棉板上，在金屬片上放上小金屬環(huán)，對準(zhǔn)石棉板的圓孔，在環(huán)中放入薄薄的中藥制劑，在環(huán)上放載玻片。 在石棉板下的圓孔中用醇等慢慢加熱，加熱到粉末開始變焦，即除火冷卻，升華物附著在載玻片上，卸下載玻片使其反轉(zhuǎn)，在顯微鏡下觀察其結(jié)晶形

7、狀、顏色，或者加入適當(dāng)?shù)脑噭┯^察顏色反應(yīng)。第三節(jié)理化學(xué)鑒別、分光法1 .熒光法常用方法2 .可見紫外分光光度法3 .紅外分光光度法4 .等離子體光譜質(zhì)量分析法、第三節(jié)理化學(xué)鑒別、分光法適用范圍：構(gòu)成中藥制劑的中藥材中含有產(chǎn)生熒光的化學(xué)成分。 操作方法：將制劑的提取液點取于濾紙或試紙上，在紫外光下(365nm或254nm )觀察，或加入試劑進(jìn)行觀察。 規(guī)定吸收波長法(最常用)對照品比較法規(guī)定吸收波長和吸收率法規(guī)定吸收波長和吸收率比法多溶劑分光法，1熒光法，2紫外可見分光光度法，第三節(jié)理化學(xué)鑒別，分光法中藥制劑樣品的紅外吸收光譜在4000400cm-1的范圍內(nèi)測定樣品制備方法：取樣品直接制備樣品，

8、或溶劑提取后制備樣品。 該方法具有采樣量少、快速、簡便、準(zhǔn)確等特點，但目前對中藥制劑的鑒別報道很少。3紅外分光光度法(中紅外)、近紅外分光法、波長： 780-2526nm(12820-3959cm-1 )吸收特性： CH、OH、NH倍頻、頻率匹配、吸收弱、重疊、化學(xué)計量學(xué)處理后可定性定量的特征：在線檢測、含水量、粒子尺寸、 中藥提取物、第三節(jié)理化鑒別、色譜一、紙色譜的概念：以紙為載體，以紙中所含的水和其他物質(zhì)為固定相，用展開劑展開進(jìn)行分配色譜。 雖然各構(gòu)成成分的位置用比位移值(Rf )表示，但由于影響比位移值的因素多，因此，一般在相同的實驗條件下與對照物質(zhì)進(jìn)行比較來規(guī)定異同。第三節(jié)理化學(xué)鑒別、

9、色譜二、薄層色譜概念：將適當(dāng)?shù)奈絼┗蜉d體涂布在玻璃板、塑料或鋁基板上，制成均勻的薄層。 樣品展開后，用與合適的對照物相同的方法對同板上得到的色譜圖進(jìn)行比較，用薄層掃描儀掃描，用于中藥制劑的鑒別。在中藥制劑的鑒別中，薄層色譜是最常用的方法。 為了保證試驗的重現(xiàn)性、準(zhǔn)確性、分離度，薄層色譜進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化操作。第三節(jié)理化學(xué)鑒別、第二、薄層色譜1 .樣品供試液的樣品提取，采用一般的提取方法(詳見第一章)，將單溶劑提取法供試液凈化液-液提取法的固-液提取法，1、第三節(jié)理化學(xué)鑒別、第二、薄層色譜b吸附劑或載體：硅膠g、硅膠GF254、硅膠h、硅膠HF254、硅藻土、硅藻土g、氧化鋁g、微晶纖維素、微晶纖維素

10、F254。 其粒徑為1040m。 添加了以臨時石膏為粘合劑的商品硅膠gcc中常用的粘合劑熒光劑的硅膠GF254粘合劑添加了羧甲基纖維素鈉的酸、堿或緩沖溶液、薄層片材、第三節(jié)理化學(xué)鑒別、第二、薄層色譜2 .薄層色譜涂布的厚度有一定的厚度或可以調(diào)節(jié)的2種。 樣品器材a定量樣品毛細(xì)管(微升毛細(xì)管) 的最常見標(biāo)準(zhǔn)： 0.5l、1.0l、2.0l、3.0l、4.0l、5.0l、10l。 要求：顯示容量準(zhǔn)確，管端平坦光滑，管壁清潔，液體流通順暢，無堵塞，無污染。 b微型注射器。第三節(jié)理化學(xué)鑒別，第二，薄層色譜2 .薄層色譜中使用的材料平底展開箱(色譜槽)二槽展開箱，水平展開箱。 噴霧法：噴霧瓶(在一定的壓

11、力下將試驗發(fā)色和檢查器械劑噴霧成均勻的微細(xì)霧狀)浸漬法：浸漬槽(將展開的薄片順利地放入裝有顯影劑的浸漬槽中，數(shù)十秒到1分鐘后取出發(fā)色)，第三節(jié)理化學(xué)鑒別二， 薄層色譜法3 .操作方法薄層板的制備：用乳缽將1份吸附劑(如硅膠g )和3份水左右用乳棒向一個方向充分研磨，制成均勻的糊狀物，放入準(zhǔn)備好的涂布器中，在玻璃板上使涂布器平滑地向直線方向移動，均勻地涂布硅膠糊。 薄層的厚度一般為0.20.3mm。 涂布的薄層薄片在室溫下在水平臺上晾干，在105110下活性化約30分鐘，放入干燥器中。第三節(jié)理化學(xué)鑒別、第二、薄層色譜法3 .操作方法：采用定量微升毛細(xì)管，點樣品距底邊1cm，點間距離為1、1.5或

12、2cm，原點直徑在3mm以下樣品容量大時，寬約23mm的不同長度的巴展開：采用上行展開，薄層片材浸入展開劑深度時，要求溶劑的最初前端距離原點5mm，展開距離為79cm的需要平衡的是雙槽展開箱，達(dá)到飽和狀態(tài)后，在展開箱的內(nèi)壁上貼上用溶劑潤濕的濾紙，可以用蒸汽平衡展開箱的展開劑是新鮮的、第三節(jié)理化學(xué)鑒別、第二、薄層色譜法3 .操作方法放在陽光下觀察色譜中斑點的紫外燈下加入觀察熒光光譜的試劑后發(fā)色，直接觀察或加熱觀察。第三節(jié)理化學(xué)鑒別、第二、薄層色譜4 .薄層色譜記錄和保存：照片數(shù)碼照片復(fù)印掃描繪、第三節(jié)理化學(xué)鑒別、第二、薄層色譜5 .影響薄層色譜分析的主要因素樣品的預(yù)處理和供試液的制備：中藥由于供

13、試液中的相互干擾和背景污染，得不到滿意的分離效果，進(jìn)一步難以識別，因此需要對樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶崛艋幚?。、第三?jié)理化學(xué)鑒別、第二、薄層色譜5 .影響薄層色譜分析的因素a要求普通薄層板原點直徑在3mm以下，高效薄層板原點直徑在2mm以下。 薄層色譜的b點樣品量不能過大，希望控制在10L以下的點圖案技術(shù)c，在一處重復(fù)多次點圖案的情況下，要注意不要使原點點成為一個白圓，d溶劑的沸點過高或過低是不理想的。第三節(jié)理化學(xué)鑒別、第二、薄層色譜5 .從干燥器中取出影響薄層色譜分析的因素a薄層板后，吸附劑的活性取決于實驗室環(huán)境的相對濕度。 吸附劑活性b控制展開時的相對濕度：用一定濃度和相對濕度影響度的硫酸溶液或

14、其他調(diào)節(jié)相對濕度的無機鹽水溶液控制濕度。第三節(jié)理化學(xué)鑒別、第二、薄層色譜5 .影響薄層色譜分析的主要因素a溶劑的蒸汽相在展開箱中參與色譜展開溶劑蒸汽的展開，形成三維色譜過程，薄層色譜的作用色譜的色譜溫度的影響溫度會影響分離物質(zhì)的Rf值、物質(zhì)的相互分離度、斑點的擴(kuò)散等，因此在試驗時請注意溫度的控制。第三節(jié)理化學(xué)鑒別、第二、薄層色譜6 .對照品選擇對照品對照：用已知的有中藥制劑的有效成分或特征成分對照品制作對照液，在與樣品相同的條件下色譜，在同一位置是否有相同的顏色(熒光)斑點陰陽對照：用陽性對照液(只含應(yīng)鑒別的藥劑)和陰性對照液(不含應(yīng)鑒別的藥劑)進(jìn)行對照鑒別。 同時對照對照藥材和對照品。 對照

15、方法、第三節(jié)理化鑒別、色譜三、薄層掃描法薄層掃描法的概念：是用一定波長的光照射薄層板，在薄層色譜上掃描有吸收紫外光或可見光的斑點或者被激發(fā)而發(fā)出熒光的斑點，將掃描的圖像作為中藥制劑的鏡子操作方法：薄層片材的制備樣品液和對照液的制備樣品展開顯色桌上掃描色譜的峰值確認(rèn)。 主要用于定量，很少用于鑒別。第三節(jié)理化學(xué)鑒別、色譜主要利用保留值進(jìn)行定性，作為定性鑒別的依據(jù)多用已知物對照法。 合適的樣品是含有揮發(fā)油或揮發(fā)性成分的制劑。第三節(jié)理化學(xué)鑒別、色譜高效液相色譜將化合物用于特定柱，在一定條件下的保留值和其對照品在同一條件下進(jìn)行保留時間的直接比較是鑒別的依據(jù)。 高效液相色譜不限于樣品的揮發(fā)性，可以選擇流動相、固定相的種類多，檢測手段多種多樣，因此應(yīng)用范圍比氣相色譜寬。 第三節(jié)理化學(xué)鑒別和其他方法的中藥制劑鑒別方法，是x射線衍射法、導(dǎo)數(shù)、光譜法、指紋圖譜法、第三節(jié)理化學(xué)鑒別，難點提示了中藥制劑的定性鑒別，是目前最常用的薄層色譜法方法。 應(yīng)用本方法時，要注意樣品的提取方法，在選擇適當(dāng)?shù)娜軇┻M(jìn)行提取的同