1、.,.,花的結構:,.,植物的花藥培養(yǎng)在育種上有什么意義？,明顯縮短育種年限,為新品種的培育開辟了新途徑。,.,（一）被子植物的花粉發(fā)育 1.被子植物的花粉是在 中由 細胞 經過 分裂形成的。 所以，花粉是 的生殖細胞,一、基礎知識：,花藥,花粉母,減數(shù),單倍體,花絲,花藥：囊狀結構,內有很多花粉,雄蕊,P37,.,(一)被子植物的花粉發(fā)育,.,小孢子母細胞(2n),( )時期(n),( )分裂,( )細胞核 (n),( )分裂,花粉粒(雙核期),( )居中期(n),( )靠邊期(n),生殖,( )細胞核 (n),花粉管,( )細胞(n),( )細胞(n),( )個精子(n),生殖,營養(yǎng),2,

2、四分體,單核,單核,有絲,( )分裂,有絲,減數(shù),填圖：,.,(2)在正常情況下,若一個有24對染色體的植物開花， 其一個小孢子母細胞可以產生 個精子， 精子中的染色體數(shù)目是 ； 在一枚花藥中可以產生很多個花粉。,(1)由此可見,被子植物的花粉的發(fā)育要經歷 時期， 期和 期等階段。,四分體,單核,雙核,8,24條,2個精子和1個營養(yǎng)核的基因型是否相同?,相 同,12對？,.,【思考1】營養(yǎng)細胞在花粉管生長過程中的作用是什么？,【思考2】花粉的染色體組成與體細胞有什么區(qū)別？ 為什么？,【思考3】減數(shù)分裂過程中和被子植物花粉發(fā)育 過程中的四分體是一回事嗎？為什么？,控制花粉的萌發(fā)并提供營養(yǎng)。,花粉

3、的染色體只有體細胞的一半， 無同源染色體（二倍體生物）,不是一回事。前者的四分體時期是指同源染色體 配對后，一對同源染色體含有四條染色單體的階段； 后者的四分體時期是指4個單倍體的細胞（小孢子） 連在一起的時期。,.,(二)產生花粉植株的兩種途徑：,胚狀體,愈 織,愈傷組織,胚狀體,【思考4】花藥培養(yǎng)產生花粉植株的兩種途徑的差別主要取決于 。,培養(yǎng)基中激素的種類及濃度配比(沒有絕對的界限),叢芽,叢芽,P38第二段,.,【思考6】單倍體性細胞產生的花粉胚,也可發(fā)育成為 單倍體植株，這和植物的體細胞克隆有區(qū)別嗎？,【思考5】什么是體細胞胚？,在組織培養(yǎng)過程中，某些體細胞在形態(tài)上轉變?yōu)?與合子發(fā)育

4、成的胚非常相似的結構，發(fā)育過程亦 與合子胚類似，被稱為體細胞胚（胚狀體）。,有區(qū)別。單倍體性細胞發(fā)育成的單倍體植株表現(xiàn)為高度不育，植物的體細胞克隆的植株可育。,P38小字,.,花瓣已有些松動又給材料的消毒 帶來困難，且難以挑選到單核期的花藥,(三)影響花藥培養(yǎng)的因素 1.影響花粉植株成功與否和成功率的主要因素： 和 等。,材料的選擇,培養(yǎng)基的組成,質地幼嫩，極易破碎,完全未開放,初花期,單核期,P39,.,【思考7】為什么選擇合適的花粉發(fā)育期是誘導花藥培養(yǎng)成功率的重要因素？,因為并不是任何時期的花粉都可以經過 培養(yǎng)產生愈傷組織或胚狀體，花粉發(fā)育的過程中， 只有某一個時期對離體刺激敏感。,【思考

5、8】為什么花藥的培養(yǎng)要選擇完全未開放的花蕾？,這種花蕾,可挑選到單核期的花藥,菌少、易消毒,【思考9】為什么花瓣松動會給材料消毒帶來困難？,松動后微生物就可能侵入到花藥,給材料的消毒帶來困難,【思考10】除此之外,你認為影響花粉誘導成功率的因素還有哪些？,植物的種類、親本植株的生長條件、材料的低溫預處理、接種密度、培養(yǎng)基組成、培養(yǎng)的環(huán)境條件,P38-39,P39,P39,.,二、實驗操作 （一）材料的選取 1.選擇花藥時一般通過 確定花粉發(fā)育時期， 此時需要對花粉細胞核進行染色，最常用的染色劑 是 和焙花青鉻釩溶液，它們分別可以 將細胞核染成 色和 色。 2.在使用焙花青鉻釩溶液時，需要首先將

6、花藥用 處理20min。該試劑的配制方法 是將 按體積比為 的比例 混合均勻。,鏡檢,醋酸洋紅,藍黑,3:1,紅,無水酒精和冰醋酸,卡諾氏固定液,P39,.,（二）材料的消毒,花蕾,( 酒精 )大約30s,( )清洗,( )吸干水分,( )24min,( )沖洗,【思考11】月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比較， 二者有何不同？,在酒精消毒前，花藥不需要預先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗。,.,【思考12】為什么不直接給花藥消毒而是給整個花蕾消毒？,用于培養(yǎng)花藥，實際上多數(shù)未熟，由于它的外面有花萼、花瓣保護，通常處于無菌狀態(tài)，所以只要將整個花蕾或幼穗消毒即可。,【思考13】實驗完畢后1氯化

7、汞溶液應如何處理？,收集、回收或運至廢物處理場所處置（收集好后，運到垃圾處理站專門處理）,實驗室內少量HgCl2可以轉化成HgS來進行銷毀， 即：HgCl2+Na2S=HgS（沉淀）+2NaCl 由于HgS溶于過量硫化物中，所以往往需要加入硫酸亞鐵 進行共沉淀。,.,3.培養(yǎng):花藥培養(yǎng)利用的培養(yǎng)基是 培養(yǎng)基,pH為 ， 溫度為 ,幼苗形成之前 (需要、不需要)光照。,2.接種花藥:剝取的花藥要立刻接種到 培養(yǎng)基上。 每個培養(yǎng)瓶接種 個花藥。,（三）接種和培養(yǎng) 1.剝取花藥:消毒后的花蕾,要在 條件下除去花萼、 花瓣。在剝離花藥時,要盡量不損傷花藥，否則 ,還要徹底除去花絲,因為 : 。,容易從

8、受傷部位產生愈傷組織,與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成,無菌,MS,710,MS,5.8,25,不需要,P39-40,.,4.培養(yǎng)2030d后,花藥開裂,長出 或釋放出 。前者還要轉移到 上進行分化 培養(yǎng)成再生植株；后者要盡快 并轉移到新的 培養(yǎng)基上。 5.通過愈傷組織形成的植株，常常會出現(xiàn) 的變化，因而需要鑒定和篩選。,愈傷組織,胚狀體,分化培養(yǎng)基,分開,染色體倍性,【思考14】為什么通過愈傷組織形成的植株會發(fā)生 染色體倍性的變化？,有些是由花粉發(fā)育形成的單倍體植株， 有些是由花粉壁細胞發(fā)育形成的二倍體植株。,.,【思考15】植物組織培養(yǎng)技術與花藥培養(yǎng)技術有何異同？,相同點： 不

9、同點：,二者均為離體的植物組織經脫分化形成愈傷組織, 再分化成叢芽，誘導出根，然后進行移栽。,植物組織培養(yǎng)技術所用的外植體為體細胞， 染色體數(shù)無需加倍。,而花藥培養(yǎng)技術取材為花藥，培養(yǎng)的為單倍體幼苗，植株弱小，高度不育，必須用秋水仙素處理，使染色體加倍,恢復正常植株的染色體數(shù),而且為純種。,.,總結：,.,1.基因型為AaBb的水稻(條染色體)的花藥通過無菌操作，接入試管后，在一定條件下培養(yǎng)成試管苗。 ()愈傷組織是花粉細胞分裂形成的不規(guī)則的細胞團， 愈傷組織必須從培養(yǎng)基中獲得( )( )和 小分子有機物等營養(yǎng)物質。 ()要促進花粉細胞的分裂分化,培養(yǎng)基中應有( ) ( )兩種激素。愈傷組織分

10、化是指愈傷組織 形成芽和根，由芽發(fā)育成葉莖。這一過程必須給予 光照，其原因是( )利用光能制造有機物促進 試管苗生長發(fā)育。 ()試管苗的細胞核中有( )條脫氧核苷酸鏈。 試管苗的基因型有：,水,無機鹽,生長素,細胞分裂素,葉,24,AB Ab aB ab,.,2.(9分)草莓生產上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代，導致產量降低。品質變差。運用微型繁殖技術可以培育出無病毒幼苗。草 莓微型繁殖的基本過程如下： 外植體 愈傷組織 芽、根 植株 請回答： (1)微型繁殖培育無病毒草莓苗時,一般選取_ 作為外植體，其依據是 。,莖尖、根尖,莖尖、根尖不含病毒,.,(2)在過程中,常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、 微量元素和_，