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文檔簡介
實(shí)驗(yàn)四-4 pH對淀粉酶活性的影響,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解pH對酶活性的影響及最適pH的定義。 二、原理 酶的催化活性與環(huán)境pH有密切關(guān)系,通常各種酶只在一定pH范圍內(nèi)才具有活性,酶活性最高時(shí)的pH,稱為酶的最適pH,高于或低于此pH時(shí)酶的活性都逐漸降低。不同酶的最適pH不同。酶的最適pH不是一個(gè)特征性的物理常數(shù),對于一個(gè)酶,其最適pH因緩沖液和底物的性質(zhì)不同而有差異。,三、試劑和器材 1. 試劑 0.3氯化鈉的0.5淀粉溶液、新鮮唾液、0.2 mol/L磷酸氫二鈉溶液、檸檬酸鈉溶液、碘化鉀碘溶液 2. 器材 恒溫水浴鍋 四、 操作步驟 1. 取3個(gè)錐形瓶,按下表的比例吸取磷酸氫二鈉溶液和檸檬酸鈉溶液,制備pH為5.0、6.8、8.0的三種緩沖溶液。,2. 另取3只干凈試管,按下表操作。,五、注意事項(xiàng) 1. 本實(shí)驗(yàn)中的酶反應(yīng)時(shí)間是10min,但實(shí)際是隨不同的唾液淀粉酶的活性而變化的,所以在實(shí)驗(yàn)前先找出準(zhǔn)確的保溫時(shí)間是本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵; 2. 加入酶液后務(wù)必充分搖勻,保證酶與全部淀粉溶液接觸,反應(yīng)才能得到理想的顏色梯度變化結(jié)果。,六、思考題 1. pH值導(dǎo)致酶活性喪失的分子機(jī)理是什么? 2. pH值
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