1、血樣本,血樣本,血標本,紅細胞懸液制備,抗凝或不抗凝的血標本洗滌壓積紅細胞配制 紅細胞懸液 2-3% 的紅細胞懸液 試管法血型鑒定、效價滴 定 5% 的紅細胞懸液 玻片法血型鑒定、間接抗 人球蛋白試驗 10% 的紅細胞懸液 抗體親和力測定,血清標本,抗凝或不抗凝血標本37水浴箱竹簽使血塊與 試管壁分離離心將血清吸至干凈試管待用,ABO血型鑒定,原理： 根據(jù)ABO血型的分型原則及其獨特的性質(zhì)，利 用凝集試驗技術(shù)通過正定型（紅細胞定型）和反定 型（血清定型）兩組試驗可準確鑒定ABO血型。 試劑： 抗A、抗B 試劑血清 A型、B型和O型試劑紅細胞懸液 2-3 %受檢者紅細胞懸液和血清或全血,ABO血

2、型鑒定,方法： 玻片法 不適于血清抗體鑒定 試管法 正定型、反定型 結(jié)果解釋 凝集為陽性 即被檢紅細胞膜上有與該試劑血清抗體相對應(yīng)的抗原；或被檢血清中有與該試劑紅細胞抗原相對應(yīng)的抗體。 不凝集為陰性,加試劑抗體血清,加被檢紅細胞懸液,離心,相對應(yīng)的抗原抗體反應(yīng),觀察結(jié)果,ABO血型判斷 血 正定型 反定型 型 抗-A 抗-B AC BC OC A + + B + + O + + AB + + ,思考題,ABO血型的分類原則是什么？ A BO 血型的分類原則是根據(jù)紅細胞膜上所存在 的抗原，血清中所存在的抗體來進行分類的。通常使 用抗-A 和抗B 兩種血清及 A 型、B 型和 O 型三種試 劑紅細

3、胞來鑒別。如受檢者紅細胞被抗血清凝集，說 明紅細胞膜上存在相應(yīng)的抗原；如不發(fā)生凝集說明不 存在相應(yīng)抗原；如受檢者血清與試劑紅細胞發(fā)生凝集 ，說明血清中存在相應(yīng)的抗體；如不發(fā)生凝集，說明 不存在相應(yīng)抗體。,為什么ABO血型鑒定應(yīng)采用“正反定型”兩種方法？ 因為 ABO 血型鑒定,主要依據(jù)受檢者紅細胞與 抗A 、抗B 試劑血清反應(yīng)結(jié)果確定,此法稱正定型法； 也可通過受檢者的血清與A型、B型和O型試劑紅細 胞反應(yīng)結(jié)果確定,此法稱反定型法，同時采用正反定 型法,并互相核對其結(jié)果是否一致是一個可靠的血型 鑒定法。,為什么在反定型中使用O型紅細胞？ 因為有些受血者或供血者血清中存在因免 疫、婦女妊娠或不當(dāng)

4、輸血而引起的抗A或抗B以 外的抗體，這些抗體不是自然所期望存在的。 血清反定型時，使用O型紅細胞可在 ABO 血型 鑒定試驗過程中檢測出受檢血清中是否有“不規(guī) 則”抗體的存在。,為什么紅細胞懸液過濃或過淡均可出現(xiàn)假陰性反應(yīng)結(jié) 果？ 因為抗原、抗體在適當(dāng)?shù)谋壤?，反?yīng)最強。若 紅細胞懸液過濃，則抗原過剩，抗體不足，每個紅細 胞均只能吸收少量抗體，不足以形成凝集。若紅細胞 懸液過淡，則紅細胞間距離較大，不易集聚在一起， 不形成凝集。在實際血型鑒定時，玻片法用 5% 紅細 胞懸液敏感性較強，并應(yīng)在鑒定過程中不斷搖動玻片 以促使其相互接觸。試管法用 2% 濃度的紅細胞懸液 敏感性較好，容易觀察凝集。,

5、為什么玻片法血型鑒定要嚴格規(guī)定觀察結(jié)果的時間？ 凝集反應(yīng)出現(xiàn)的快慢與強弱是由抗原抗體的性 質(zhì)決定的,如果抗原的抗原性強，抗體效價高，凝集 反應(yīng)的第一，第二階段可以在數(shù)秒內(nèi)完成；如抗原 的抗原性弱，抗體效價也低，則凝集反應(yīng)不明顯， 反應(yīng)需要一段時間才能完成。 因為血清在空中暴露時間過長，發(fā)生濃縮，從 而使紅細胞聚集，造成假陽性結(jié)果；如果不等反應(yīng) 完成便判定反應(yīng)結(jié)果，可使陽性結(jié)果誤報成陰性結(jié) 果，造成假陰性。所以玻片法血型鑒定要嚴格規(guī)定 觀察結(jié)果的時間,凝膠試驗使用的試劑和器材,凝膠技術(shù),凝膠法鑒定ABO血型,優(yōu)點：,敏感： 在凝膠試驗中常能發(fā)現(xiàn)其它試驗不易發(fā)現(xiàn)的問題。 結(jié)果可保存： 凝膠試驗的結(jié)果可在冰箱中保存數(shù)日，并且較容易被拍成照片。 操作技術(shù)要求較低： 凝膠試驗的操作主要是簡單的加樣和判讀，孵育、離心過程都有專門的設(shè)備。其中能被人為改變的因素較少。 無需洗滌的抗球蛋白試驗：,缺點,不能做反定型 凝膠試驗方法成本較高，需要特殊設(shè)備。 高度敏感有時也會造成不便。,MN血型鑒定,試劑 抗M、抗N試劑血清 M型、N型、MN型紅細胞 受檢者紅細胞懸液 方法 玻片法 試管法,結(jié)果判讀 MN血型結(jié)果判