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文檔簡介
1、、雙水萃取的原理和應用、Aqueous ATPE-phase Extraction、2014210918姜文妍、團隊成員:NF-B信號路徑、柳文英王犀牛范亞玲、英英解釋?1896年,Beijerinck發(fā)現(xiàn),當明膠、瓊脂或明膠與可溶性淀粉溶液混合時,得到混濁的不透明溶液,2相,上含有豐富的明膠,下相含有豐富的瓊脂(或淀粉),被稱為聚合物的不溶性,形成了雙上身體系。ATPE的歷史:ATPE的歷史:1956年,瑞典Lund大學的Albertsson教授及其同事們開始了對雙水系統(tǒng)的比較系統(tǒng)研究。測量了許多雙水系統(tǒng)的相圖,為雙水萃取系統(tǒng)的發(fā)展打下了基礎。僅限于實驗室內(nèi)的測量和理論研究。ATPE的歷史:
2、ATPE的歷史:Kula教授研究小組對雙水應用、流程、操作參數(shù)、工程設備、成本分析等進行了大量研究,在應用領域取得了成功。1978年,雙水萃取技術首先用于酶的大規(guī)模分離純化。ATPE的歷史:ATPE的歷史:雙水萃取可以分離多肽、蛋白質(zhì)、酶、核酸、病毒、細胞、細胞、細胞組織、重金屬離子等,近年來也應用于抗生素等小分子。作為反應系統(tǒng),用于酶反應、生物轉(zhuǎn)化、發(fā)酵的產(chǎn)物生產(chǎn)和分離的整合。ATPE的基本原理:ATPE的基本原理,提?。涸趦煞N徐璐不溶的溶劑中利用物質(zhì)的分配差異進行分離的技術。有機溶劑萃取:不溶于水和徐璐的有機溶劑作為萃取劑從水相中萃取的目的產(chǎn)物,廣泛用于抗生素、有機酸、維生素等發(fā)酵產(chǎn)品的生
3、產(chǎn)。蛋白質(zhì)核酸酶等生物大分子的分離幾乎沒有成功。反萃?。豪盟芤簭挠袡C溶劑中萃取水溶性物質(zhì)。ATPE的基本原理:ATPE的基本原理,半粘合團萃取:利用表面活性劑在有機相中形成的反膠團(reversed micelles),形成在有機相中分散的親水微環(huán)境。ATPE的基本原理:ATPE的基本原理,反粘附團提取:將生物分子存儲在有機相(萃取相)的親水微環(huán)境中,以消除生物分子(尤其是蛋白質(zhì)類生物活性物質(zhì)在有機相中難以溶解或在有機相中發(fā)生反變性的現(xiàn)象)。超臨界萃?。篈TPE的基本原理:ATPE的基本原理,上述方法在蛋白質(zhì)的分離純化方面存在其他缺陷。ATPE的基本原理:ATPE的基本原理,迄今為止,雙相
4、技術已應用于幾乎所有生物物質(zhì)(如:氨基酸、多肽、核酸、細胞機、細胞膜、各種細胞、病毒等)的分離純化。尤其成功地應用于蛋白質(zhì)的大規(guī)模分離,ATPE的基本原理:ATPE的基本原理,雙水相萃取的原理類似于水-有機相萃取的原理,都有選擇地在兩個階段之間分布物質(zhì)。ATPE的基本原理:ATPE的基本原理,提取系統(tǒng)的特性不同時,物質(zhì)進入雙水系統(tǒng)后,由于表面特性、電荷作用、各種作用力(如疏水鍵、氫鍵、離子耦合等)的存在和環(huán)境因素的影響,上下相濃度不同,常用的雙水相系統(tǒng):ATPE的基本原理,PEG=聚二醇(polyethylene glycol),Kpi=磷酸鉀,DX=葡聚糖,PEG/無機鹽系統(tǒng)主要是大規(guī)模的這
5、是因為PEG/無機鹽體系的提取特異性高,葡聚糖貴。ATPE的基本原理,各種類型的雙水系統(tǒng),圖:相平衡時水系統(tǒng)的組成,溫度和壓力的關系,ATPE的基本原理,圖:相平衡時水系統(tǒng)的組成,溫度和壓力的關系,ATPE的基本原理,雙線下區(qū)域是均勻區(qū)域,上面區(qū)域是兩相區(qū)域,即ATPS螺紋:在雙節(jié)距線上連接兩點的直線。k點:k點是臨界點,表示兩相差已消失。圖:相平衡時物界的構成、溫度和壓力的關系、ATPE的基本原理、螺紋中反映的信息杠桿規(guī)則兩相體積近似遵循杠桿規(guī)則的特性差異。螺紋的長度是衡量兩個階段相對差異的尺度,螺紋越長,兩個階段的特性差異就越大。相反,影響雙分子萃取的因素、ATPE的基本原理、影響雙分子萃
6、取的因素、ATPE的基本原理、聚合物分子量的影響:對于給定的相系統(tǒng),如果高聚合物被低分子量的相同高聚合物取代,則萃取的聚合物物質(zhì)(例如蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì))、影響雙分子萃取的因素、ATPE的基本,影響雙水萃取的因素,ATPE的基本原理,PH值的影響pH值的變化還影響磷酸鹽的解離程度,導致構成體系的物質(zhì)的電變化,改變分離物質(zhì)的電荷,影響分配的進展。影響雙水萃取的因素、ATPE的基本原理、離子環(huán)境對兩相體系分布的影響:在雙水聚合物系統(tǒng)中添加電解質(zhì)時,陰陽離子在兩者之間徐璐具有不同的分布。(莎士比亞、離子、離子、離子、離子、離子、離子、離子、離子、離子、離子、離子)另一方面,由于電中性的限制,有通過相位界
7、面的電勢(多南電勢),這是影響蛋白質(zhì)和核酸等電荷對分子的主要因素,影響雙水萃取的因素,ATPE的基本原理,如DNA萃取時離子成分的細微變化,使DNA幾乎完全從一個階段轉(zhuǎn)移到另一個階段。ATPE的基本原理,離子液體BmimPF6直接提取DNA,基于ATPE的基本原理,離子液體BmimPF6的雙水體系直接提取牛血清蛋白。雙水相的特征,ATPE的特征,對生物物質(zhì)、天然物、抗生素等的提取,純化的優(yōu)點:(1)從水分含量高的(7090)生理環(huán)境接近的系統(tǒng)中提取,避免生物活性物質(zhì)的不活性化或變性。(2)可以從含有菌體的發(fā)酵液和培養(yǎng)液中直接提取所需的蛋白質(zhì)(或酶),也可以直接提取細胞內(nèi)酶,避免破裂或過濾等階段
8、。雙獲獎特征,ATPE的基本原理,(3)分相時間短,自然分相時間一般為5min15 min。(4)界面張力小(10-7 10-4mNm),有利于兩相之間的質(zhì)量傳遞。(5)沒有有機溶劑殘留問題,高聚物不易揮發(fā),對人體無害。雙水相的特征,ATPE的基本原理,(6)可以將大量雜質(zhì)與固體物質(zhì)一起去除。(7)便于流程擴大和連續(xù)操作,可直接與后續(xù)精煉工序連接,無需特殊處理。(8)工作條件溫和,在常溫常壓下進行。(9)親和雙水萃取技術可以提高分配系數(shù)和提取的選擇性。雙首相的特征,ATPE的基本原理,盡管這項技術在應用上取得了很大進展,但幾乎都是基于實驗。到目前為止,理論上還沒有完全說明雙水體系的形成機制和生
9、物分子在系統(tǒng)內(nèi)的分配機制。雙水位特征,ATPE的基本原理,不足點:易于乳化,星形聚合物成本高,分離效率不高。雙水萃取的應用,ATPE的基本原理,雙水系統(tǒng)的平衡時間短,水分含量高,界面張力低。并且操作方便,經(jīng)濟實惠,易于放大。據(jù)報道,系統(tǒng)可以從10毫升直接放大到1m3大小(105倍),各種實驗參數(shù)可以按比例放大,產(chǎn)品產(chǎn)量不會降低。雙水相萃取的應用,ATPE的基本原理,英永解釋,1,蛋白質(zhì),酶的純化,2,多肽的分離純化,3,核酸的分離純化,4,其他分離純化,雙水相萃取的應用,雙水相萃取的應用,ATPE的,以ATPE的基本原理、蛋白質(zhì)分離為例,雙水分離過程的原則過程:包括三階段雙水分離,第二階段:分
10、相后想象中加入鹽,形成雙水體系,核酸和多糖也進入富含鹽的下相、雜質(zhì)、蛋白質(zhì)也進入下相,所需蛋白質(zhì)再次進入富含PEG的想象。以ATPE的基本原理、蛋白質(zhì)分離為例,雙水分離過程的原則過程:第3階段:分相后在想象中加入鹽,再次形成雙水體系。在這個階段,蛋白質(zhì)要進入富含鹽的河床,與大量PEG分離。蛋白質(zhì)、鹽和PEG的分離可以使用超濾、分層分析、離心等技術。ATPE應用程序,雙水相萃取應用程序,ATPE應用程序,雙水相萃取應用程序,雙水相萃取應用程序,ATPE應用程序,3)核酸分離純化,ATPE應用程序,4)病毒sato等是PEG 4000,雙水萃取的應用,ATPE的應用,5)中草藥成分萃取(1) PE
11、G和K2HPO4作為一定濃度的濃縮溶液配制。(2)常溫下,將三七濃縮液放入10毫升的離心試管,放入一定體積的星形物質(zhì)濃縮溶液,均勻振動,在離心機中以一定速度將5毫米作為離心機分相。雙水萃取的應用,ATPE的應用,5)中藥成分提取(3)分別讀取上下體積,對上下三七總皂苷的含量進行抽樣分析。雙水相萃取的應用,ATPE的應用,5)中藥成分萃取,雙水相萃取的應用,ATPE的應用,5)中藥成分萃取,雙水相萃取的應用,ATPE的應用,5)中藥成分聚乙二醇2000/硫酸實現(xiàn)了/偶氮(Shen 4星) ()雙水體系中Ti()和Zr(智高)的分離,雙水萃取的應用,ATPE的應用,7。氬溶液0。6 ml,PEG溶液5ml和一定量的金屬離子溶液用水容納到10ml,然后加入2g固體(NH4) 2SO 4,振動3 5min進行整流,在兩相層變得明確后,將下層水放入25ml有色管測量。雙水萃取的應用,ATPE的應用,7)稀有金屬/貴金屬分離,雙水萃取的發(fā)展,ATPE的發(fā)展,1)將低價雙水系統(tǒng)開發(fā)2)將雙水與其他分離技術結合,提高分離效率,提高雙水萃取技術,雙水萃取的發(fā)展,ATPE的發(fā)展,兩個蛋白質(zhì)溶解度大。粘度小。價格便宜。雙水萃取的
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