1、1微生物與人類(lèi)密切相關(guān)。雖然有些微生物能使動(dòng)物和植物生病，但大多數(shù)微生物對(duì)人類(lèi)有益。請(qǐng)回答以下問(wèn)題。(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基配方一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。當(dāng)分解尿素的細(xì)菌從土壤中分離出來(lái)時(shí)， 添加到培養(yǎng)基中的唯一氮源是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (2)在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒置平板操作中，為什么平板在濃縮后要倒置？ _ _ _

2、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ .(3)接種微生物的方法有很多，其中最常用的方法是平板劃線法和_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。當(dāng)用平板劃線法接種時(shí)，為什么接種杯要在操作的第一步和每次劃線前燒？_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

3、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(4)在劃線操作結(jié)束時(shí)，您是否還需要燒掉接種環(huán)？為什么？_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ .從土壤中分離尿素分解細(xì)菌需要選擇性培養(yǎng)基，并且唯一的氮源是尿素。在接種過(guò)程中，最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。第一次焚燒接種環(huán)的目的是殺死接種環(huán)上的微生物，防止其他微生物污染培養(yǎng)基。在每次劃線之前燃燒接種環(huán)的目的是殺死最后一次接種期間留下的菌株，從

4、而接種環(huán)上的菌株直接來(lái)自下一次劃線中的最后一次劃線的末端，從而在多次劃線之后可以獲得單個(gè)菌落。最后一步是焚燒接種環(huán)進(jìn)行滅菌，以避免因菌株引起的環(huán)境污染和操作人員感染。答：(1)尿素選擇(2)水滴會(huì)凝結(jié)在培養(yǎng)皿的蓋子上，防止水滴落入培養(yǎng)皿造成污染，并使培養(yǎng)基表面的水蒸發(fā)得更好(3)稀釋涂布板對(duì)接種環(huán)的第一次灼燒是為了防止接種環(huán)上的其他微生物污染培養(yǎng)基。在每次劃線前燒接種環(huán)的目的是殺死最后一次接種時(shí)留下的菌株，使接種環(huán)上的菌株直接來(lái)自下一次劃線中最后一次劃線的末端，從而在多次劃線后獲得單個(gè)菌落。(4)需避免環(huán)境污染和細(xì)菌引起的感染，2(安徽高考，2009)以下是對(duì)“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的描

5、述，其中的誤差是：(1)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是用蒸餾水配制的，經(jīng)高溫高壓滅菌后，從平板B中取出0.1毫升104、105、106倍的土壤稀釋液和0.1毫升無(wú)菌水，分別涂在每個(gè)平板上。將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的平板倒置，在37恒溫培養(yǎng)2448小時(shí)。在確定對(duì)照組的無(wú)菌性后，選擇具有超過(guò)300個(gè)菌落的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。分析：在確定對(duì)照組的無(wú)菌性后，選擇具有30300個(gè)菌落的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。d是錯(cuò)的；甲是培養(yǎng)基的滅菌方法，乙建立了一系列的對(duì)照實(shí)驗(yàn)，丙是細(xì)菌的培養(yǎng)方法，這些都是正確的做法?；卮穑篋，1篩選原則，2實(shí)驗(yàn)流程，特別提醒，為了確定纖維素分解菌，需要進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的發(fā)酵方法有兩種：液體

6、發(fā)酵和固體發(fā)酵。纖維素酶的測(cè)定方法一般是定量測(cè)定濾紙等纖維素被纖維素酶分解后產(chǎn)生的葡萄糖。在該過(guò)程中是否需要“選擇性培養(yǎng)”應(yīng)根據(jù)樣品中目標(biāo)菌株的數(shù)量來(lái)確定。3、分離土壤中纖維素分解菌的方法有：(1)稀釋倒置平板法、包被平板法、單細(xì)胞挑取法、選擇性培養(yǎng)和分離抗體C-D，分析：分離土壤中的纖維素分解菌，先培養(yǎng)，再梯度稀釋，包被平板培養(yǎng)和單細(xì)胞挑取獲得純培養(yǎng)物。稀釋涂布平板法是將融化的培養(yǎng)基倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿中制成無(wú)菌平板。冷卻固化后，在整個(gè)平板表面涂上一定量的一定稀釋度的細(xì)菌懸液，培養(yǎng)后形成單個(gè)菌落。答：B，(1)從近年來(lái)的生物試題來(lái)看，“微生物的培養(yǎng)與利用”測(cè)試中心無(wú)疑是近年來(lái)一中選修課最大的熱點(diǎn)，

7、如2010年山東卷T34、2009年寧夏卷T40、2009年安徽卷T9、2008年山東卷T34(2)(4)、廣東卷T38等。2008年山東卷T34(3)、2007年山東卷T34(3)和寧夏卷T32(3)(5)對(duì)選擇培養(yǎng)基的效果進(jìn)行了檢驗(yàn)。(2)微生物的分離、純化和培養(yǎng)過(guò)程是微生物工程應(yīng)用的基礎(chǔ)，是近年來(lái)新課程標(biāo)準(zhǔn)高考的重要考試中心和熱點(diǎn)，有望參與2012年高考?，F(xiàn)在大力提倡無(wú)紙化辦公，但每年不可避免地會(huì)產(chǎn)生大量的廢紙，其主要成分是木質(zhì)纖維，人類(lèi)正試圖將其轉(zhuǎn)化為一種新的資源乙醇。圖為工業(yè)上利用微生物從纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工藝流程。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：(1)自然界所需的大多數(shù)微生物都分布在_ _ _

8、_ _ _的環(huán)境中。從土壤中獲得的微生物在以_ _ _ _ _ _ _ _ _為碳源和_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _的培養(yǎng)基上培養(yǎng)_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (2)在上述篩選過(guò)程中獲得了三個(gè)菌落，它們被分別培養(yǎng)并完成了連接，并且在三種相同的酶溶液中的酶濃度是相同的，所以你認(rèn)為三種酶溶液的活性(必須是相同的，不同的， (3)根據(jù)測(cè)定結(jié)果，該環(huán)節(jié)常選用木霉菌，因此該環(huán)節(jié)獲得的酶為_(kāi) _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

9、 _ _ _ _ _ _ _ _ _。 (4)_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (5)雖然該技術(shù)前景廣闊，但也存在酶成本高等問(wèn)題。 為了降低成本，_ _ _ _ _ _ _和其他技術(shù)可用于使酶可重復(fù)使用。(1)富含纖維素的土壤含有大量以纖維素為碳源的纖維素分解菌

10、。剛果紅可以在培養(yǎng)基中與纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素分解時(shí)，不能形成復(fù)合物，并且在培養(yǎng)基中將出現(xiàn)以纖維素分解細(xì)菌為中心的透明圈。該方法用于篩選纖維素分解菌。(2)在酶溶液中蛋白質(zhì)濃度相同的情況下，酶活性不一定相同。酶活性是否相同可以通過(guò)纖維素分解后產(chǎn)生的葡萄糖量是否相等來(lái)確定。(3)木霉能產(chǎn)生纖維素酶并分解纖維素。(4)酵母是酒精發(fā)酵中常用的菌種，因此在接種過(guò)程中要避免雜菌的污染。乙醇是酵母厭氧發(fā)酵的產(chǎn)物，發(fā)酵過(guò)程中必須保持厭氧環(huán)境。(5)固定化酶技術(shù)可以重復(fù)使用，降低酶的成本。答案(1)剛果紅透明圈富含纖維素(其他答案都是合理的，比如更多的落葉等。)(2)不一定相同的葡萄糖在纖維素被纖維素

11、酶分解后產(chǎn)生(3)纖維素(4)酵母發(fā)酵裝置的緊密性(或保證厭氧條件等)(5)固定化酶，1(2010年重慶高考)炭疽是由炭疽桿菌引起的人畜共患傳染病。炭疽桿菌的兩端被截?cái)嗖⑴帕性谥窆?jié)中，菌落呈卷曲狀。根據(jù)噬菌體的宿主特異性，通過(guò)實(shí)驗(yàn)可以診斷疑似炭疽患者。(1)細(xì)菌培養(yǎng)：采集疑似患者樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。(2)細(xì)菌鑒定：實(shí)驗(yàn)流程如圖所示：配制好的液體培養(yǎng)基應(yīng)經(jīng)_ _ _ _ _ _ _ _ _滅菌；實(shí)驗(yàn)中使用的液體培養(yǎng)基的碳源是_ _ _ _ _ _ _ _(填充有“無(wú)機(jī)碳對(duì)照組應(yīng)加_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

12、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

13、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

14、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

15、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _排除的疑似患者和易感人群可接種炭疽桿菌疫苗，以刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。除了T細(xì)胞和B細(xì)胞外，還有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。分析：培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌。炭疽桿菌的同化類(lèi)型為異養(yǎng)型，因此應(yīng)選擇有機(jī)碳作為其碳源。微生物很小，不能用肉眼觀察，所以只能借助顯微鏡觀察細(xì)菌的特性。在液體培養(yǎng)基中，細(xì)菌的增殖會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)液的渾濁

16、；在本實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)變量是是否添加噬菌體，因此對(duì)照組的處理應(yīng)與實(shí)驗(yàn)組一致，只是不添加噬菌體(即應(yīng)添加不含噬菌體的生理鹽水)。噬菌體可以破壞細(xì)菌細(xì)胞，從而使培養(yǎng)液變得清澈。在特異性免疫的誘導(dǎo)階段，吞噬細(xì)胞參與抗原呈遞，漿細(xì)胞是直接產(chǎn)生抗體的細(xì)胞。答案是：(2)高壓蒸汽(100千帕蒸汽)有機(jī)碳顯微鏡細(xì)菌用等量的生理鹽水繁殖吞噬細(xì)胞和漿細(xì)胞；(2)2009年寧夏高考(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除了繁殖條件外，還應(yīng)考慮_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _和滲透壓的條件。由于其體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、突變類(lèi)型容易選擇等特點(diǎn)。它經(jīng)常被用作遺傳研究的實(shí)驗(yàn)材料。(2)在微生物

17、培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，培養(yǎng)基和培養(yǎng)容器應(yīng)進(jìn)行消毒滅菌。操作員的手需要清潔和_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _；靜止空氣中的細(xì)菌可以被紫外線殺死，因?yàn)樽贤饩€可以使蛋白質(zhì)和_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _變性。(3)如果用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)活大腸桿菌數(shù)，為了使估計(jì)值更接近實(shí)際值，除了嚴(yán)格操作和多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品的稀釋度。(4)一般來(lái)說(shuō)， 所獲得的純菌株也可以初步_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

18、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，必須在接種前檢查培養(yǎng)基是否被污染。 對(duì)于固體培養(yǎng)基， 檢測(cè)方法應(yīng)是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ (6)如果用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)， 用過(guò)的培養(yǎng)基和培養(yǎng)物必須用_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _