1、mssa感染性休克和重癥肺炎的病原，實驗室微生物實驗室2012-12-23，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌mssa，屬于葡萄球菌。革蘭氏陽性球菌，凝固酶，葡萄串排列。金黃色葡萄球菌是人類化膿性感染中最常見的病原體，可引起局部化膿性感染、肺炎、偽膜性腸炎、心包炎，甚至全身性感染如敗血癥。金黃色葡萄球菌的致病性主要取決于其毒素和侵入酶(31種常見的毒力基因):溶血毒素(hla):外毒素，可破壞血小板，破壞溶酶體，引起機體缺血和壞死。白細胞殺素(pvl):能破壞人體白細胞和巨噬細胞血漿凝固酶：當(dāng)金黃色葡萄球菌侵入人體時，這種酶使血液或血漿凝固。葡萄球菌引起的感染很容易定位，這與這種酶有關(guān)。脫氧核糖核酸酶：

2、金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的脫氧核糖核酸酶能耐受高溫，可作為鑒定金黃色葡萄球菌腸毒素(ses)的基礎(chǔ)。金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生幾種引起急性胃腸炎的蛋白腸毒素，可分為八種血清型：甲、乙、c1、c2、c3、丁、戊和氟。腸毒素能在100下煮沸30分鐘而不被破壞。由此引起的食物中毒癥狀是嘔吐和腹瀉。此外，金黃色葡萄球菌還產(chǎn)生表皮葡萄球菌、明膠酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。表皮剝脫毒素(etb):它導(dǎo)致燙傷樣皮膚綜合征，也稱為剝脫性皮炎。中毒性休克綜合征毒素(tsst-1)，研究表明48.2%的mssa同時攜帶15個毒力基因，明顯高于耐甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株(28.2%)。plv攜帶率高，c1和c59型檢出率高。

3、具有相同結(jié)構(gòu)的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌mssa、甲氧西林-內(nèi)酰胺和頭孢菌素對抗生素有耐藥性。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌還可以改變抗生素的作用靶點，產(chǎn)生修飾酶，降低細胞膜通透性，產(chǎn)生大量paba等不同機制。3.氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、氟喹諾酮類、磺胺類和利福平均產(chǎn)生不同程度的耐藥性，僅對萬古霉素敏感。表達meca或其他機制(pbps與苯唑西林之間親和力的變化)，產(chǎn)生mssa的潘通-瓦倫丁白細胞殺傷劑(pvl)，而對于mrs，其他-內(nèi)酰胺類藥物，即青霉素類、-內(nèi)酰胺類/-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物、頭孢菌素類(具有抗mrs活性的新化合物除外)和碳青霉烯類，可在體外顯示活性，但非抗mrs-內(nèi)酰胺類

4、藥物的實驗結(jié)果報道為耐藥與否。mrs檢測：檢測meca基因或其表達的pbp2a(pbp 2a，pbp 2)來預(yù)測苯唑西林耐藥性。當(dāng)苯唑西林多指標(biāo)類集調(diào)查為4微克/毫升時，即使meca或pbp2a為陰性，也報告了mrs。這些菌株的k-b檢測可能顯示頭孢西丁的敏感性。藥物敏感性：對其他-內(nèi)酰胺類/-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物、頭孢菌素類和碳青霉烯類敏感；對磷有抗性的苯唑西林對不穩(wěn)定的磷酶敏感，但對其他穩(wěn)定的磷酶對青霉素敏感。mrs對所有目前的內(nèi)酰胺類抗生素都有耐藥性。因此，青霉素苯唑西林(頭孢西丁)代表其他。1、標(biāo)本采集1、局部感染病灶：開放感染病灶：局部皮膚消毒清洗傷口膿液2拭子旋轉(zhuǎn)收集足夠的傷口底部

5、分泌物進行檢查。閉合/深部傷口感染病灶穿刺局部皮膚消毒后，用注射器抽取1-2ml膿液，注入細菌培養(yǎng)瓶檢查。竇形成：局部皮膚消毒清潔淺表分泌物2拭子被附著到竇壁的深部以收集分泌物用于檢查。醫(yī)療建議：普通涂片染色(革蘭氏染色)，普通細菌培養(yǎng)，抗酸染色，厭氧培養(yǎng)，真菌培養(yǎng)，樣品采集2，下呼吸道/肺部感染：普通感染：晨痰x3，刷牙漱口后，坐直并咳出呼吸道深處的痰。誘導(dǎo)痰：當(dāng)咳痰困難時，可先吸入氯化鈉溶液(濃度100克/升，溫度45)使痰易于咳出。檢查結(jié)核分枝桿菌時，應(yīng)收集24小時的痰。吸痰：患者氣管插管，吸痰取樣，盡量減少鹽水的比例。兒童痰液收集方法：用壓舌板將舌頭向后壓，將拭子深入咽內(nèi)。兒童因壓舌板

6、刺激而咳嗽，吐出的肺或氣管分泌物會粘在拭子上檢查。體位引流：支氣管擴張患者可在早上起床進行體位引流，可收集大量痰標(biāo)本。氣管穿刺法：在環(huán)甲膜下穿刺痰液并采集標(biāo)本，適用于厭氧培養(yǎng)。重復(fù)/多抗生素?zé)o效感染：注意厭氧菌、放線菌和混合菌感染，穿刺取樣和床邊接種。醫(yī)療建議：普通涂片染色(革蘭氏染色)、普通細菌培養(yǎng)、抗酸染色、厭氧培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、樣品采集3、血流感染：抗生素治療前采血、寒戰(zhàn)或早期發(fā)熱。不建議使用動脈血或通過血管內(nèi)導(dǎo)管采集血液。只有當(dāng)懷疑導(dǎo)管相關(guān)血流感染時，才能分別通過導(dǎo)管和外周靜脈采集相同量的血樣，并同時進行培養(yǎng)。1。采血部位及消毒：1)穿刺部位皮膚用70%異丙醇或乙醇消毒，干燥后用碘液或碘

7、伏(或2%洗必泰異丙醇溶液)從里到外擦拭，然后用70%乙醇去除碘。嚴(yán)格執(zhí)行這三步消毒后，靜脈穿刺采血是可行的。2)對碘過敏的患者或兒童應(yīng)使用70%的異丙醇或乙醇消毒60秒，并在穿刺部位的乙醇蒸發(fā)干燥后采集血液。2。采血量：1)成年人或體重40的患者通常從每個部位采集1520毫升，需要分別向奶瓶和無氧瓶中注入810毫升。從兩個部分收集了總共3040毫升，并發(fā)送了兩套進行檢查。2份的最低采血量不應(yīng)低于2030毫升；2)新生兒和1歲以下體重不足4公斤的兒童，每次取0.51.5毫升血液，注入兒童瓶中，不收集2套；3)對于16歲的兒童，通過每1歲增加1毫升血液來計算采血量(例如，對于3歲的兒童，從2個部

8、分采集3毫升血液，從每個部分采集1.5毫升血液)。4)對于體重1540公斤的兒童，總共采集了1020毫升血液，每個部分510毫升。4.采血次數(shù)：疑似血流感染的患者應(yīng)從兩個部位至少采血兩次進行培養(yǎng)，以提高陽性率；此外，兩次或多次血液培養(yǎng)的結(jié)果有助于消除污染的可能性。5.采血間隔：1)當(dāng)急性敗血癥或骨髓炎、腦膜炎、肺炎和腎盂腎炎需要立即進行抗生素治療時，應(yīng)在開始治療前從不同部位采集兩組血液進行培養(yǎng)；2)對于不明原因的發(fā)熱、亞急性細菌性心內(nèi)膜炎、菌血癥和真菌病，可在24小時內(nèi)從不同部位采集24套血液培養(yǎng)樣品，每次間隔至少3小時；3)對于疑似急性感染性心內(nèi)膜炎的患者，應(yīng)在12小時內(nèi)從3個部位采集3套血

9、液培養(yǎng)物；4)對于兒童，應(yīng)盡快采集血液培養(yǎng)物，并采集樣本。4.樣本應(yīng)通過無菌穿刺或外科手術(shù)收集；2.標(biāo)本采集量應(yīng)為1毫升(結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)物為15毫升)；3.收集后，將其注入無菌小瓶或無菌試管中，以便立即檢查；4.先在容器中加入滅菌的肝素，然后加入穿刺液，防止穿刺液凝固(0.5毫升肝素可以抗凝5毫升標(biāo)本)。5.引流液：盡量不要用手術(shù)引流液進行細菌學(xué)檢查！請勿在引流袋中使用引流液！用70%乙醇對導(dǎo)管收集部位進行消毒，并用注射器從穿刺部位吸取23毫升。6.穿刺得到的體液可以直接注入血培養(yǎng)瓶。為了提高陽性檢出率，需氧瓶和厭氧瓶可同時使用，尤其是羊水和后穹窿穿刺液應(yīng)進行厭氧培養(yǎng)。7.腸穿孔的腹腔液可以

10、通過穿刺取樣。無菌體液(胸腹液、心包液、關(guān)節(jié)液和鞘液、羊水、膽汁、后穹窿穿刺液、羊水等。)、醫(yī)囑規(guī)定：普通涂片染色(革蘭氏染色)、普通細菌培養(yǎng)、抗酸染色、厭氧培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、樣品采集5、尿路感染1、中期尿液采集方法：女性患者先用肥皂；男性患者先用肥皂水沖洗尿道口，然后用清水沖洗，收回包皮排尿，丟棄前段尿液，取中段尿液，不停止尿流。如果包皮過長，應(yīng)該打開并清洗。2.導(dǎo)管插入術(shù)：直接插入導(dǎo)管進行導(dǎo)管插入術(shù)。醫(yī)務(wù)人員插入導(dǎo)管后，讓15毫升尿液流出并丟棄，然后取1015毫升尿樣。一般來說，不應(yīng)該盡可能地用這種方法收集尿樣，這樣容易將尿道細菌帶入膀胱，增加醫(yī)源性感染的風(fēng)險。尿液通過留置導(dǎo)管收集。長期留置

11、導(dǎo)管的患者應(yīng)更換新導(dǎo)管并取樣；留置尿管時，用70%乙醇不經(jīng)消毒穿刺，用無菌注射器抽取5-10毫升尿液(嚴(yán)禁在集尿袋中收集尿液，導(dǎo)管不能用于培養(yǎng))。3.尿液收集方法：如果懷疑有結(jié)核分枝桿菌感染，在干凈的容器中取尿液24小時，取1015毫升尿沉渣檢查。4.恥骨上膀胱穿刺法：患者恥骨上膀胱區(qū)用碘酊消毒后，用75%乙醇擦拭，用無菌針進行膀胱穿刺，立即將針插入橡皮塞內(nèi)檢查(適用于厭氧菌培養(yǎng))。這種方法一般用于嬰兒，那些感染厭氧菌的人，他們的尿液檢查結(jié)果難以確定，很少使用。5.盆腔尿液收集方法：必須由專家收集，左右兩側(cè)必須做好標(biāo)記，以免混淆和誤診。6.前尿：當(dāng)懷疑淋菌性尿道炎和支原體性尿道炎/陰道炎時，收

12、集前尿進行檢查。患者被要求在清潔外陰后留下尿液，女性分開保留陰唇，而男性收回包皮。應(yīng)收集前35毫升尿液(前幾滴)進行檢查。7.兒童和嬰兒：用無菌生理鹽水棉球清潔生殖器，將無菌管或瓶口對準(zhǔn)尿道，用膠帶固定在皮膚上，待尿液排出后送去檢查。醫(yī)生建議如下：普通涂片染色(革蘭氏染色)、普通細菌培養(yǎng)、抗酸染色、厭氧培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、病原學(xué)檢查/抗生素時間表、住院、3月9日、3月10日、3月11日、3月13日降鈣素原、53、美平、1套血培養(yǎng)、痰培養(yǎng)、1套血培養(yǎng)、1套血培養(yǎng)、糞便球/棒、糞便球/棒、痰培養(yǎng)、1套血培養(yǎng)、g實驗、中段尿培養(yǎng)、痰涂片、g棒、g球g棒；無真菌、痰菌培養(yǎng)、中段尿培養(yǎng)、涂片、少量g球、少量孢子、痰菌培養(yǎng)、尿菌培養(yǎng)、痰涂片、痰涂片、大量孢子、糞便球/棒、大量孢子菌絲、胸腔積液培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、胸腔積液染色；尋找真菌，穩(wěn)定可信，促紅細胞生成素，頭孢噻肟-舒巴坦，1:10，60336040，少量孢子菌絲，痰培養(yǎng)，血培養(yǎng)，痰培養(yǎng)，痰涂片，痰涂片，金黃色葡萄球菌，3月20日3月26-27日，3月28日3月29日，尿培養(yǎng)，大便培養(yǎng)，1套血培養(yǎng)，痰涂片，g-雙球，少量g-球，痰培養(yǎng)，少量真菌生長，痰涂片未發(fā)現(xiàn)真菌，痰真菌培養(yǎng)，1套血培養(yǎng)，穩(wěn)定可靠，頭孢噻肟-舒巴坦，哌拉西林-他唑巴坦，頭孢吡肟(maspin)，哌拉西林-舒巴坦，病原體檢查/抗生素時間表，痰培養(yǎng)ca