1、活動導(dǎo)學(xué)案【活動目標】：1、了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識；掌握培養(yǎng)基的制備、高壓蒸汽滅菌和平板劃線法等基本操作技術(shù) 2、利用選擇培養(yǎng)基分離細菌，運用相關(guān)技術(shù)解決生產(chǎn)生活中有關(guān)微生物的計數(shù)3、簡述纖維素酶的種類及作用，從土壤中分離出分解纖維素的微生物；掌握從土壤中分離某種特定微生物的操作技術(shù)【活動重點】1、培養(yǎng)基的成分，類型 ，消毒和滅菌的區(qū)別2、運用活菌計數(shù)法測定土壤中尿素細菌的數(shù)量。3、從土壤中分離某種特定微生物的操作技術(shù)，探討微生物的利用?！净顒与y點】： 1、運用活菌計數(shù)法測定土壤中尿素細菌的數(shù)量。2、纖維素酶的組成及作用 3、研究培養(yǎng)基對微生物的選擇作用【活動方案】： 活動一、培養(yǎng)基與無菌技

2、術(shù)1、 培養(yǎng)基對的營養(yǎng)構(gòu)成：一般都含有水、_ _、氮源、無機鹽，還要滿足微生物生長對 pH、_以及 O2的要求。2、類型：3、消毒和滅菌的區(qū)別條件結(jié)果常用的方法消毒煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法滅菌例題：配制培養(yǎng)基的敘述中，正確的是A制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂 B加入青霉素可得到放線菌C培養(yǎng)自生固氮菌不需氮源 D發(fā)酵工程一般用半固體培養(yǎng)基活動二、微生物培養(yǎng)的基本技術(shù)1、配制培養(yǎng)基 2、滅菌: 3、接種(1)接種過程：洗凈雙手點燃酒精燈接種貼標簽。(2)接種工具：包括_、涂布器。(3)接種方法：平板劃線法、_法。(4)注意事項：整個操作過程要在_旁完成。4、培養(yǎng) 接種后的培養(yǎng)皿放

3、入恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。5、純化大腸桿菌(1)微生物接種的最常用方法是 和 。(2)平板劃線法：通過 在瓊脂固體培養(yǎng)基表面 的操作，將聚集的菌種 。(3)稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的 ，然后將不同稀釋度的菌液分別 ，進行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時，即可獲得 ?；顒尤?、分離與計數(shù)土壤中分解尿素的細菌的實驗1菌種篩選(1)培養(yǎng)基：_ _培養(yǎng)基。 (2)特點：_是唯一氮源。2統(tǒng)計菌落數(shù)目(1)計算方法：直接計數(shù)法；間接計數(shù)法。(2)平板計數(shù)公式： 每克樣品中的菌株數(shù)_3分離分解尿素的細菌的實驗設(shè)計原則(1)設(shè)立重復(fù)組原則 統(tǒng)計某一稀釋度下的平板上的菌落數(shù)時，要至少涂布 3 個平板作重復(fù)組，來增強實驗結(jié)果

4、的說服力與準確性。(2)對照原則： 對照實驗的概念：除了被測試條件以外，其他條件都相同的實驗。主要目的：排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響。提高實驗的可信度。例如為了確認培養(yǎng)基是否被雜菌污染，需以 培養(yǎng)基培養(yǎng)作為空白對照。 斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染，需將 的培養(yǎng)基同時進行培養(yǎng)。判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用，需設(shè)立牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，進行對比得出結(jié)論。4.分解尿素的細菌的鑒別(1)在培養(yǎng)基中加入 指示劑，則培養(yǎng)基會變紅；(2)檢測 的變化來判斷是否存在。例題：分離土壤中分解尿素的細菌，對培養(yǎng)基的要求是加尿素 不加尿素 加瓊脂 不加瓊脂 加葡萄糖不加

5、葡萄糖 加硝酸鹽 不加硝酸鹽A B C D活動四、纖維素和纖維素酶 纖維素分解菌的篩選1、纖維素：是_類物質(zhì)，廣泛存在于自然界，如棉花、木材、作物秸稈等。2、纖維素酶：(1)纖維素酶是一種_酶。(2)三種組分：_、CX 酶和葡萄糖苷酶。(3)作用結(jié)果：最終將纖維素分解成_。在下面的反應(yīng)式中填寫相應(yīng)的酶：纖維素纖維二糖 葡萄糖3、纖維素分解菌的篩選方法： 法。篩選原理：剛果紅可以與纖維素形成 ，當(dāng)纖維素被 分解后，剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn) 我們可以通過 來篩選纖維素分解菌?；顒游濉⒎蛛x土壤中纖維素分解菌實驗操作 1分離纖維素分解菌的實驗設(shè)計(1)實驗流程：土壤取樣 (此步可

6、省略)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別 的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生 的菌落。(2)土壤取樣：采集土樣時，可以選擇 的環(huán)境。(3)選擇培養(yǎng)：目的：增加纖維素分解菌的 ，確保能夠從樣品中分離到所需要的 。選擇培養(yǎng)：稱取土樣20 g，在無菌條件下加入裝有30 mL培養(yǎng)基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在 上，在一定溫度下振蕩培養(yǎng)12 d，直至培養(yǎng)液變 。也可重復(fù)選擇培養(yǎng)。挑選菌落 a剛果紅染色法，挑選 的菌落，一般即為分解纖維素的菌落。 b常用的剛果紅染色法包括兩種，一種是先 ，再加入 進行 反應(yīng)，另一種是在 時就加入剛果紅。例題：在加入剛果紅纖維素的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落是 A分解尿素的細菌 B硝化細菌 C分解纖維素的

7、細菌 D乳酸菌【課后作業(yè)】：1PCR是一種在體外將少量DNA大量復(fù)制的技術(shù)，所需要的酶是從什么菌中提取的Taq細菌 芽孢桿菌 火球菌 病毒 A B C D2下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是 AKH2PO4、Naz HP04、MgS047H20、葡萄糖、尿素、瓊脂、水 BKH2P04、Na2HPO4、MgSO47H20、葡萄糖、瓊脂、水 CKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、尿素、瓊脂、水 DKH2P04、Na2 HP04、MgSO47H20、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水3某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上 菌落數(shù)的平均值為234，那么每克樣品中的菌落 數(shù)是(涂布平板時所

8、用稀釋液的體積為0.1 mL) A2.34X108 B2.34X109 C234 D234 4在做分離分解尿素的細菌實驗時，A同學(xué)從對應(yīng)106倍稀釋的培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個茵落。A同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生原因可能有 由于土樣不同 由于培養(yǎng)基污染 由于操作失誤 沒有設(shè)置對照 A B C D5關(guān)于土壤取樣的敘述錯誤的是 A土壤取樣，應(yīng)選取肥沃、濕潤的土壤 B先鏟去表層土3 cm左右，再取樣 C取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌 D應(yīng)在火焰旁稱取土壤61.纖維素酶可以將下列哪種物質(zhì)分解 A牛肉片 B魚片 C濾紙條 D塑料條7微生物體內(nèi)能夠分解纖維素成纖維二糖的是AC1

9、酶和 CX 酶 BC1 酶、葡萄糖苷酶 CCX 酶、葡萄糖苷酶 D葡萄糖苷酶8剛果紅染色時，加入剛果紅可在制備培養(yǎng)基時 梯度稀釋時 倒平板時 涂布時 培養(yǎng)基上長出菌落時A B C D9下列關(guān)于分離纖維素分解菌實驗的敘述，錯誤的是A經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上B選擇培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)纖維素分解菌少C經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色D對照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上10關(guān)于測定土壤中細菌的數(shù)量，正確敘述是 A一般選用103107倍的稀釋液分別涂布 B測定放線菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋 C測定真菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋

10、 D當(dāng)?shù)谝淮螠y量某種細菌的數(shù)量，可以將101107倍的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)11關(guān)于微生物的培養(yǎng)，敘述錯誤的是 A細菌一般在3037C的溫度下培養(yǎng)12 d B放線菌一般在2528C的溫度下培養(yǎng)57 d C霉菌一般在2528C的溫度下培養(yǎng)34 d D不同種類的微生物，一般需要相同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間12需要在火焰旁操作的有 土壤取樣 稱取土壤 稀釋土壤溶液 涂布平板微生物的培養(yǎng) A B C D13. 有關(guān)培養(yǎng)基的敘述正確的是A培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B培養(yǎng)基只有兩類：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見

11、的單個細菌14培養(yǎng)流感病毒時，應(yīng)選用A固體培養(yǎng)基 B含有多種無機鹽的培養(yǎng)液 C活的雞胚 D無菌的牛肉湯15.以下關(guān)于微生物對氧的需求的敘述中正確的是A產(chǎn)甲烷桿菌屬厭氧呼吸，但氧的存在不影響其生存B鏈球菌進行厭氧呼吸，不能接觸空氣C黃色短桿菌在氧氣充足時才能產(chǎn)生谷氨酸D谷氨酸棒培育桿菌是厭氧呼吸16微生物（除病毒外）需要從外界吸收營養(yǎng)物質(zhì)并通過代謝來維持正常的生長和繁殖。下列有關(guān)微生物營養(yǎng)的說法正確的是A乳酸菌與硝化細菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的 B微生物生長中不可缺少的一些微量的無機物稱為生長因子 C培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高對微生物的增殖越有利D生長因子一般是酶或核酸的組成成分，微生物本身合成

12、這些生長因子的能力往往不足來17可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是 A以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹試劑D以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑18下列是關(guān)于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述中，錯誤的是A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上C將實驗組和對照組平板倒置，37 恒溫培養(yǎng)2448hD確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進行計數(shù)19苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株，篩選的主