1、專題2 基因工程突破1植物組織培養(yǎng)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的比較及植物激素在組織培養(yǎng)中的作用1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)技術(shù)花藥離體培養(yǎng)技術(shù)選材體細(xì)胞生殖細(xì)胞(精子)生殖方式無性生殖有性生殖相同點(diǎn)植物細(xì)胞全能性；外植體愈傷組織叢芽生根移栽；無菌技術(shù)；接種等2.植物激素在組織培養(yǎng)過程中的重要作用生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，其作用及特點(diǎn)如下表：激素使用實(shí)驗(yàn)結(jié)果使用順序先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素細(xì)胞既分裂也分化生長素與細(xì)胞分裂素同時(shí)使用分化頻率提高生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的

2、比例該比值高時(shí)有利于根的分化，抑制芽的形成該比值低時(shí)有利于芽的分化，抑制根的形成該比值適中時(shí)促進(jìn)愈傷組織的形成突破體驗(yàn)1.請(qǐng)回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的問題：(1)用于植物組織培養(yǎng)的植物材料稱為_。(2)組織培養(yǎng)中的細(xì)胞，從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過程稱為_。(3)在再分化階段所用培養(yǎng)基中，含有植物激素X和植物激素Y。逐漸改變培養(yǎng)基中這兩種植物激素的濃度比，未分化細(xì)胞群的變化情況如圖所示。據(jù)圖指出兩種激素的不同濃度比與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系。當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比等于1時(shí)，_。當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比大于1時(shí)，_；當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比小于1時(shí)，_。(4)生產(chǎn)上

3、用試管苗保存植物的優(yōu)良性狀，其原因是_。答案(1)外植體(2)脫分化(或去分化)(3)未分化細(xì)胞群經(jīng)分裂形成愈傷組織未分化細(xì)胞群分化形成芽未分化細(xì)胞群分化形成根(4)組織培養(yǎng)形成試管苗的過程屬于無性繁殖，后代不發(fā)生性狀分離解析(1)植物組織培養(yǎng)的材料叫外植體。(2)植物組織培養(yǎng)的核心過程是脫分化與再分化，脫分化指由分化狀態(tài)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)，再分化指由未分化狀態(tài)變?yōu)榉只癄顟B(tài)。(3)仔細(xì)分析所給示意圖，可知植物激素X與植物激素Y濃度比為1時(shí)，利于愈傷組織的形成；大于1時(shí)利于細(xì)胞群分化出芽；小于1時(shí)利于細(xì)胞群分化出根。(4)植物組織培養(yǎng)是一種無性繁殖技術(shù)，有利于保持親本的優(yōu)良性狀。突破2單克隆抗體制備

4、的關(guān)鍵思路及篩選原因1.關(guān)鍵思路及操作依據(jù)(1)關(guān)鍵思路克隆單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得雜交瘤細(xì)胞。(2)用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的原因每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體；不同種類的B淋巴細(xì)胞分泌的抗體不同。B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)不能無限增殖；骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖。2.單克隆抗體制備過程中的篩選及原因(1)第一次篩選是在B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后，因?yàn)橛腥N融合情況(只考慮細(xì)胞兩兩融合)：B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，而只有B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。(2)第二次篩選

5、需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞群是由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆來的，所以產(chǎn)生的抗體一定是化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的單克隆抗體。特別提醒上述B淋巴細(xì)胞為經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞。突破體驗(yàn)2.1975年科學(xué)家首次利用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備出單克隆抗體。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：(1)病原體注入小鼠體內(nèi)后，要經(jīng)過_細(xì)胞處理后，才能被免疫細(xì)胞識(shí)別。(2)制備單克隆抗體所用的B淋巴細(xì)胞一般從脾中采集，然后以_作誘導(dǎo)劑，使B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。通過篩選和克隆培養(yǎng)，獲得的雜交瘤細(xì)胞具有_的特點(diǎn)。(3)單克隆抗體的特點(diǎn)是_。根據(jù)圖示寫出應(yīng)用雜交瘤技術(shù)獲得單克隆抗體的兩種主要方法_。答案(1)吞噬(2)滅活的病毒或聚乙二醇既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖(3)特異性強(qiáng)，純度高、并可大量制備(或：專一性強(qiáng)、靈敏度高)