1、抗生素類藥物的分析The Analysis of antibiotic drugs,藥物分析技術(shù)Technology of Pharmaceutical Analysis,鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院 林 1821895532; QQ:56334613;505348076 E-mail:；E-mail:,1.熟悉抗生素類藥物分析的特點(diǎn)及其常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目。了解抗生素類藥物的分析現(xiàn)狀，熟悉生物學(xué)法與物理化學(xué)法測(cè)定效價(jià)的原理及優(yōu)缺點(diǎn)。 2.掌握內(nèi)酰胺類抗生素的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、鑒別及含量測(cè)定。 3.掌握氨基糖苷類抗生素的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及鑒別，了解其檢查及含量測(cè)定 4.掌握四環(huán)素類抗生素的結(jié)構(gòu)及

2、性質(zhì)，了解其鑒別、檢查及含量測(cè)定 5.了解抗生素類藥物的質(zhì)量考察方法,教學(xué)目標(biāo),ch14-1 概述,抗生素 的定義,抗生素是指在低微濃度下即可對(duì)某些生物的生命活動(dòng)有特異抑制作用的化學(xué)物質(zhì)的總稱。 抗生素是細(xì)菌、放線菌和真菌等微生物的代謝產(chǎn)物，對(duì)各種病原微生物有強(qiáng)大的抑制或殺滅作用。,抗生素的來源,1. 生物合成（發(fā)酵）,2. 化學(xué)合成或半合成,特點(diǎn)：1. 化學(xué)純度較低 2. 活性組分易發(fā)生變異 3. 穩(wěn)定性差,抗生素質(zhì)量的復(fù)雜性,產(chǎn)品穩(wěn)定性差,分子結(jié)構(gòu)大多不穩(wěn)定，降解后療效下降、失效或增加毒副作用,發(fā)酵過程不易控制 易受污染,生產(chǎn)工藝復(fù)雜,發(fā)酵液中雜質(zhì),無機(jī)鹽、脂肪、各種蛋白質(zhì)、各種降解產(chǎn)物、

3、色素、熱原、毒性物質(zhì),增加:異常毒性、細(xì)菌內(nèi)毒素、熱原、降壓物質(zhì)、無菌,檢查,鑒別試驗(yàn)(Identification): 用化學(xué)法、物理化學(xué)法以 及生物學(xué)法來確認(rèn)是哪種抗生素 毒性試驗(yàn)(Undue toxicity) :控制藥品中的毒性物質(zhì) 無菌試驗(yàn)(Sterility) :檢查藥品中有無雜菌污染 熱源試驗(yàn)(Pyrogens ):控制藥品中的致熱物質(zhì) 水分測(cè)定(Water content ):控制水分含量 溶液澄明度檢查(Clarity of solution):檢查不溶性物質(zhì) 溶液pH試驗(yàn)(pH value of solution): 測(cè)定pH 降壓試驗(yàn)(Depressor substanc

4、e) :檢查有降壓作用的雜質(zhì) 效價(jià)測(cè)定(Assay): 有效成分測(cè)定,1、抗生素類藥物一般檢查項(xiàng)目 General examinations for antibiotics,抗生素活性表示方法 效價(jià)單位 即指每毫升或每毫克中含有某種抗生素的有效成分的多少。用表示 例如 1mg青霉素鈉為1670 1mg慶大霉素為590 ,生物學(xué)法 物理化學(xué)法,目前各國藥典仍以生物學(xué)測(cè)定法為主。,2、效價(jià)測(cè)定,抗生素的效價(jià)測(cè)定方法有:,(1)生物學(xué)測(cè)定法Biological procedure 以抗生素抑制細(xì)菌生長能力或殺菌能力作為衡量效價(jià)標(biāo)準(zhǔn),優(yōu)點(diǎn)： 原理恰好與臨床要求一致，更能夠確定抗生素效價(jià)。 the pr

5、inciple comply with the clinical requirement 靈敏度高，需要樣品量較小 the amount of sample needed for assay is small 既適用較純精制品,也適用于純度較差的產(chǎn)品 已知或新發(fā)現(xiàn)抗生素都能應(yīng)用 同一類型的抗生素,不需要分離,可一次測(cè)定它們的總效價(jià)。,缺點(diǎn) 操作步驟多，測(cè)定時(shí)間較長 誤差較大,(2)物理化學(xué)測(cè)定法 根據(jù)抗生素化學(xué)結(jié)構(gòu)利用其特有的化學(xué)或物理化學(xué)性質(zhì)及反應(yīng)進(jìn)行。,優(yōu)點(diǎn) 操作簡單、省時(shí)、方法準(zhǔn)確 具有較高的專屬性,缺點(diǎn): 對(duì)于結(jié)構(gòu)相似的抗生素，測(cè)定結(jié)果往往只能代表總的含量，并不一定能代表某一抗生素的生

6、物效價(jià)，只有當(dāng)用物理化學(xué)法測(cè)定結(jié)果與用生物學(xué)法測(cè)定效價(jià)相一致時(shí)，才能用于 效價(jià)測(cè)定。易受雜質(zhì)干擾。,分類（按結(jié)構(gòu)與性質(zhì)）： 內(nèi)酰胺類 青霉素類頭孢菌素類 氨基糖苷類 鏈霉素慶大霉素 四環(huán)素類 大環(huán)內(nèi)酯類 氯霉素類 多肽類 抗腫瘤類 林可霉素類 其他抗生素類,Penicliins Nature Penicillin (Fermentation-Derived Penicillins),ch14-2 -內(nèi)酰胺類抗生素,青霉素 半合成青霉素 頭孢菌素 非經(jīng)典的-內(nèi)酰胺類抗生素及-內(nèi)酰胺酶抑制劑,青霉素類,頭孢菌素類,ch12-1 -內(nèi)酰胺類抗生素的分析,一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 1、化學(xué)結(jié)構(gòu),母核:由-內(nèi)

7、酰胺環(huán)和氫化噻唑環(huán) 組成的雙雜環(huán). 6-Aminopenicillanic Acid; 6-APA 側(cè)鏈 : RCO-,母核: -內(nèi)酰胺環(huán)和二氫噻嗪環(huán) 組成的雙雜環(huán)。（7-ACA） 7-Aminocephalospoanic Acid 側(cè)鏈RCO-,青霉素（青霉素G、芐青霉素）,氨芐西林（氨芐青霉素）,阿莫西林（羥氨芐青霉素）,普魯卡因青霉素,青霉素G 青霉素X 青霉素V,青霉素F 雙氫青霉素F,頭孢氨芐,頭孢拉定,頭孢羥氨芐,頭孢噻吩鈉,（二）性質(zhì)及應(yīng)用,1.穩(wěn)定性 -內(nèi)酰胺環(huán)易水解失效。（見后） 應(yīng)用：通常制成粉針，注射前用滅菌注射用水現(xiàn)配現(xiàn)用。 2.鑒別方法 青霉素酶滅活測(cè)定法。 本品的

8、水溶液加稀鹽酸則析出游離青霉素的白色沉淀，此沉淀能在乙醇、醋酸戊酯、氯仿、乙醚或過量的鹽酸中溶解。 藥典規(guī)定本品的紅外吸收光譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜一致。 本品的水溶液顯鈉鹽或鉀鹽的鑒別反應(yīng)。,二、半合成青霉素,青霉素在長期臨床應(yīng)用中，暴露出許多缺點(diǎn)： 對(duì)酸不穩(wěn)定，只能注射給藥； 抗菌譜比較窄，對(duì)革蘭氏陽性菌比對(duì)革蘭氏陰性菌效果好； 在使用過程中，細(xì)菌逐漸產(chǎn)生一些分解酶使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性； 有嚴(yán)重的過敏反應(yīng)等。,半合成青霉素結(jié)構(gòu)特點(diǎn),非奈西林,苯唑西林,阿莫西林,三、頭孢菌素,四、非經(jīng)典的-內(nèi)酰胺類抗生素及-內(nèi)酰胺酶抑制劑,克拉維酸 舒巴坦 氨曲南,酸性,結(jié)構(gòu)與性質(zhì),與堿金屬(Na+、K+)成鹽,（一）

9、羧基,易溶于水,青霉素類和頭孢菌素類結(jié)構(gòu)共同特點(diǎn)具有-內(nèi)酰胺環(huán)。,pKa值在2.52.8之間,青霉素G鈉、青霉素G鉀等,與有機(jī)堿(普魯卡因)成鹽,難溶于水,普魯卡因青霉素,（二）手性C,(5%頭孢唑啉鈉溶液 1824),頭孢菌素類 C6 C7,青霉素類 C3 C5 C6,旋光性,（三）共軛體系,青霉素類 母核無明顯UV 多數(shù)有苯環(huán)取代基,UV, 青霉素類母核沒有共軛系統(tǒng)，沒有紫外吸收 但青霉素類藥物在弱酸性下水解，可以產(chǎn)生具有共軛雙鍵的青霉烯酸，在紫外光區(qū)有吸收。 側(cè)鏈中有苯環(huán)等取代基的藥物，在紫外光區(qū)也有吸收。像芐青霉素。,頭孢菌素類分子中有共軛體系 （OCNCC） 在260nm處有最大吸收

10、。,青霉素鈉UV7-20,（四）內(nèi)酰胺環(huán),水溶液 不穩(wěn)定,干燥純凈 穩(wěn)定,不穩(wěn)定性因素,四元環(huán)張力大,酰胺鍵易水解,干燥、純凈青霉素類抗生素穩(wěn)定，其水溶液很不穩(wěn)定. 不穩(wěn)定的部分是-內(nèi)酰胺環(huán) -內(nèi)酰胺環(huán)在酸、堿、青霉素酶、醇、某些金屬離子的作用下，可使-內(nèi)酰胺環(huán)開環(huán)或發(fā)生分子重排，而失去抗菌作用。,例,青霉素的降解反應(yīng),(頭孢噻吩鈉水溶液2524h失活8%),二、鑒別試驗(yàn),1.羥肟酸鐵反應(yīng),2.青霉素的各種鹽的鑒別 3.硫酸及硫酸-甲醛反應(yīng) 4.硫酸-變色酸反應(yīng) 5.紫外分光光度法及紅外分光光度法,二、,鑒別,（二）呈色反應(yīng),1. 羥肟酸鐵反應(yīng),-內(nèi)酰胺類,NaOH,呈色,（紅、棕、褐）,例：

11、ChP(2005)頭孢哌酮 鑒別 取本品10mg，加水2ml與鹽酸羥胺溶液(取34.8%鹽酸羥胺溶液1份，醋酸鈉-氫氧化鈉溶液1份，乙醇4份)3ml，振搖溶解后，放置5min，加酸性硫酸鐵銨試液1ml，搖勻，顯紅棕色。,頭孢菌素類,3. 茚三酮反應(yīng),-氨基酸,-氨基、伯胺 某些羥基胺類,酮式,烯醇式,茚三酮,茚三酮,縮合,藍(lán)紫色,4. 雙縮脲反應(yīng),-內(nèi)酰胺類,（開環(huán)分解）,似肽鍵,雙縮脲（NH3CONHCONH3）是兩 個(gè)分子脲經(jīng)180左右加熱，放出一個(gè)分子氨后得到的產(chǎn)物。在強(qiáng)堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物，稱為雙縮脲反應(yīng)。凡具有兩個(gè)酰胺基或兩個(gè)直接連接的肽鍵，或能過一個(gè)中間碳原

12、子相連的肽鍵，這類化合物都有雙縮脲反應(yīng)。,藍(lán)紫色,5. 與變色酸-硫酸反應(yīng),活潑“-CH2-”,青霉素 阿莫西林 氨芐西林,（分解）,變色酸,顯色,150,（縮合）,6. 與重氮苯磺酸反應(yīng),（偶合）,酚羥基,頭孢哌酮,7. 與銅鹽反應(yīng),橄欖綠色,NaOH,專屬反應(yīng),（三）沉淀反應(yīng),1. 遇酸,在過量HCl或 有機(jī)溶劑中溶解,2. 有機(jī)胺鹽反應(yīng),（1）重氮化 - 偶合反應(yīng),重氮化-偶合反應(yīng),芳伯氨基,普魯卡因,普魯卡因青霉素,（2）與三硝基苯酚反應(yīng),二芐基乙二胺,mp,三硝基苯酚,樣品、分解產(chǎn)物,頭孢氨芐 max = 262nm,青霉素V鈉 A280nm/A264nm = 1.301.50,Cu

13、2+,氯唑青霉素 341 0.682,雙氯青霉素 342 0.653,苯唑青霉素 339 1.328,(nm),-內(nèi)酰胺環(huán),酰胺,3180cm-1 N-H,內(nèi)酰胺 C=O,1780cm-1,3470cm-1 O-H,1690cm-1 仲酰胺C=O,1250cm-1 C-O,阿莫西林,利用不同結(jié)構(gòu)的原子核在D2O中有 不同的NMR光譜進(jìn)行鑒別,JP,以吸收峰頻率對(duì)峰強(qiáng)度進(jìn)行作圖,主要研究原子核的磁化性質(zhì)及其在 外磁場中的運(yùn)動(dòng)規(guī)律,硫酸慶大霉素NMR譜7-08,硫酸慶大霉素NMR,對(duì)照品對(duì)照法,三、雜質(zhì)檢查,藥物 檢查項(xiàng)目 檢查方法 頭孢他啶 聚合物 HPLC法 頭孢曲松鈉 頭孢哌酮鈉 頭孢噻肟鈉

14、 頭孢呋辛酯 有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體 HPLC法 頭孢氨芐 有關(guān)物質(zhì) 反相TLC法 青霉素鉀（鈉） 吸收度 紫外分光光度法,1.頭孢他啶聚合物的測(cè)定 固定相：葡聚糖凝膠G-10（ 40-120m ） 流動(dòng)相A：3.5%硫酸銨的0.01mol/L磷酸鹽緩沖液 流動(dòng)相B：0.01%十二烷基硫酸鈉 對(duì)照品溶液：頭孢他啶對(duì)照品 100g/ml 1）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：理論塔板數(shù)和拖尾因子用1mg/ml 藍(lán)色葡聚糖2000、流動(dòng)相A測(cè)定；重復(fù)性用對(duì)照品溶液、 流動(dòng)相B測(cè)定。 N不低于900，拖尾因子0.751.5，峰面 積的RSD應(yīng)小于5.0%。2）測(cè)定方法 進(jìn)樣供試液，用流動(dòng)相A；進(jìn)樣對(duì)照液，用流動(dòng) 相B。以外

15、標(biāo)法計(jì)算，含頭孢他啶聚合物以頭孢他啶 計(jì)不得超過0.3%。,2.頭孢呋辛酯中有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體的檢查 固定相：ODS 流動(dòng)相：0.2mol/L磷酸二氫銨-甲醇（62:38） 1）頭孢呋辛酯2-異構(gòu)體的制備：頭孢呋辛酯對(duì) 照品+流動(dòng)相 頭孢呋辛酯2-異構(gòu)體。2）系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：各異構(gòu)體之間的R1.5，以 頭孢呋辛酯A異構(gòu)體計(jì)算n1500。,3）異構(gòu)體： tR1 相對(duì)保留時(shí)間 r12=- 1-被測(cè)物 tR2 2-標(biāo)準(zhǔn)物 異構(gòu)體 相對(duì)保留時(shí)間 判斷 B異構(gòu)體 0.85 供試液譜圖中A異構(gòu)體的峰面積 A異構(gòu)體 1.0 與A、B異構(gòu)體峰面積和之比應(yīng) 為0.480.55。,3.頭孢氨芐中有關(guān)物質(zhì)的檢查-反相

16、TLC法 固定相：活化后的硅膠G板置5%（V/V）正十四 烷的正己烷溶液中，展至頂部，涼干 展開劑：0.1mol/L枸櫞酸-0.2mol/L磷酸氫二 鈉-丙酮（120：80：3） 供試液：本品 50mg/ml 對(duì)照液（1）：本品 0.5 mg/ml 對(duì)照液（2）：-苯甘氨酸 0.5 mg/ml 對(duì)照液（3）：7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸 0.5 mg/ml,結(jié)果判斷：供試液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照液（2）（3）位置相同上所的斑點(diǎn)比較，其顏色不得更深；如顯其他雜質(zhì)斑 點(diǎn)，與對(duì)照液（1）所顯的主斑點(diǎn)比較，其顏色不得更深。,4.青霉素鈉（鉀）的吸收度檢查： 供試液 1.80mg/ml， 結(jié)果判斷：A280

17、不得大于0.10,（水解）,水解產(chǎn)物,定量過量,剩余,-內(nèi)酰胺類,ChP,反應(yīng)分兩步進(jìn)行： 1.水解反應(yīng) (按化學(xué)計(jì)算量進(jìn)行) 2.氧化-還原反應(yīng) (無固定的量關(guān)系，受溫度、PH值和時(shí)間等因素影響，應(yīng)嚴(yán)格控制反應(yīng)條件并采用標(biāo)準(zhǔn)品平行對(duì)照測(cè)定),原理： 青霉素或頭孢菌素分子不消耗碘，其在堿性條件下水解生成的降解產(chǎn)物青霉噻唑酸可與碘作用，根據(jù)消耗的碘量可以計(jì)算青霉素的含量。,第一步,第二步,例,注射用普魯卡因青霉素 含量測(cè)定,取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，精密稱取約0.12g，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置碘瓶中，加1mol/L氫氧化鈉溶液1ml放置20分鐘，再加1

18、mol/L鹽酸溶液1ml與醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)5ml，精密加入碘滴定液(0.01mol/L)15ml，密塞，搖勻，在2025暗處放置20分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)加淀粉指示液，繼續(xù)滴定并強(qiáng)力振搖，至藍(lán)色消失；另精密量取供試品溶液5ml，置碘瓶中，加醋酸-醋酸鈉緩沖液（pH4.5）5ml，精密加入碘滴定液（0.01mol/L）15ml，密塞，搖勻，在暗處放置20分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01mol/L）滴定，作為空白。同時(shí)用青霉素鈉對(duì)照品同法測(cè)定作對(duì)照，算出供試品的含量。,V樣空,V樣,V對(duì)空,V對(duì),空白,樣品,Na2S2O3,空白試驗(yàn),A、消

19、除樣品已降解產(chǎn)物的干擾 B、消除樣品中其他消耗碘的雜 質(zhì)的干擾 C、消除碘揮發(fā)造成的誤差,以未經(jīng)水解的樣品作空白測(cè)定,采用標(biāo)準(zhǔn)品平行對(duì)照測(cè)定,A、可消除溫度、pH、操作、環(huán) 境等條件的影響 B、使本法測(cè)定結(jié)果與微生物檢定 法一致,（1）弱酸性 pH4.5,堿 I2 IO3- + I-,酸 普魯卡因與碘在酸性條件 下會(huì)產(chǎn)生復(fù)鹽沉淀,（2）溫度 2426,溫度38 未水解的供試品亦消耗碘,（3）水解時(shí)間,以水解20分鐘后的耗碘量最大,（4）反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)20分鐘后，耗碘量隨時(shí)間的 變化較小，可減小含量測(cè)定的誤 差。,（1）靈敏度高,樣品 : 碘 = 1 : 8,（2）反應(yīng)條件、實(shí)驗(yàn)操作要求高,加試

20、劑次序、反應(yīng)時(shí)間、滴定速度相同,4I28I-,原料,制劑,精密稱取樣品0.1009g，置250ml碘瓶中，加水10ml，振搖使溶解，精密加溴滴定液(0.1mol/L)25.0ml，再加鹽酸5ml，立即密塞并振搖1分鐘，在暗處靜置15分鐘后，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液10ml，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液（0.09863mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，消耗硫代硫酸鈉滴定液(0.09863mol/L)13.80ml，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，空白試驗(yàn)消耗硫代硫酸鈉滴定液（0.09863mol/L）21.64ml。每1ml溴滴定 液(0.1mol/L)相當(dāng)于

21、13.01mg的C12H17N2NaO3。,理論上:1mol青霉素8mol I原子 實(shí)際上: 1mol青霉素89mol I原子 溫度，放置時(shí)間，pH，濃度，碘過量程度， 雜質(zhì)多少等影響因素。,方法： 以“青霉素鈉”為例，ChP 二部,（1）主試驗(yàn)：,（2）空白試驗(yàn)：, 討論： （1）溶液的pH值在4.5左右 （2）溫度：2426 （3）放置時(shí)間：1520 （4）空白試驗(yàn)：做法與一般空白不同（加樣品,不加堿水解,其他操作同樣品） 目的：消除樣品中預(yù)先存在的降解產(chǎn)物（青霉噻唑酸）及其他耗碘雜質(zhì)的影響 （5）靈敏度高：因?yàn)?:8，所以供試液濃度在 10100g/ml即可測(cè)定,（水解）,青霉素族,Ch

22、P,青霉素分子不與汞鹽反應(yīng)，但其降產(chǎn)物青霉噻唑酸及青酶胺可與汞鹽反應(yīng)，根據(jù)消耗的汞鹽量計(jì)算青霉素的含量。,青霉素分子中的氫化噻唑環(huán)含有一個(gè)硫原子，開環(huán)后形成巰基（SH），可用汞量法測(cè)定,樣 品,以未經(jīng)水解的樣品作空白測(cè)定,例,青霉素鈉 含量測(cè)定,取本品約50mg，精密稱定，加水5ml溶解后，加1mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，放置15分鐘，加1mol/L硝酸溶液5ml，醋酸鹽緩沖液(pH4.6)20ml及水20ml，搖勻，照電位滴定法(附錄 A),用鉑電極為指示電極，汞-硫酸亞汞電極為參比電極，在3540，用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)緩慢滴定，（控制滴定過程約為15分鐘），不計(jì)第一

23、個(gè)等當(dāng)點(diǎn)，計(jì)算第二個(gè)等當(dāng)點(diǎn)時(shí)消耗滴定液的量。每1ml硝酸汞滴定液(0.02mol/L)相當(dāng)于7.128mg的總青霉素(按C16H17N2NaO4S計(jì)算)。,另取本品約0.5g，精密稱定，加水與上述醋酸鹽緩沖液各25ml，振搖使完全溶解，在室溫下，立即用硝酸汞滴定液(0.02mol/L)滴定，終點(diǎn)判斷方法同上. 每1ml硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相當(dāng)于7.128mg的降解物（按C16H17N2NaO4S 計(jì)算）。 總青霉素的百分含量與降解物的百 分含量之差值即為青霉素的含量。,（1）水解必須完全,（2）汞鹽滴定液用EDTA標(biāo)定,（3）以第二次滴定突躍為終點(diǎn) 電位法指示終點(diǎn),（4）反應(yīng)摩爾

24、比 1 : 1,（5）空白試驗(yàn) 消除已降解產(chǎn)物干擾,（6）優(yōu)點(diǎn) 不需標(biāo)準(zhǔn)品,精密稱取含水量為0.5%的青霉素鈉0.0502g，按藥典方法測(cè)定總青霉素含量時(shí)，用去硝酸汞滴定液(0.02009mol/L)6.97ml。另精密稱取上述樣品0.5013g，按藥典方法測(cè)定降解物含量時(shí)，用去硝酸汞滴定(0.02009mol/L)1.33ml。以干燥品計(jì)算，求樣品中青霉素的含量。,例,青霉素鈉 含量測(cè)定,（鈉鹽）,-內(nèi)酰胺類,ChP,青霉素在稀堿性條件下,水解生成青霉噻唑酸衍生物,此步水解定量完成,可用 于含量測(cè)定。,中和,中和,() 水解前：將樣品溶液的pH調(diào)至8,（加0.01mol/L NaOH液至顯粉

25、紅色）,() 水解：加入定過量的標(biāo)準(zhǔn)堿溶液， 水浴加熱使水解,() 剩余滴定：水解后，過量的堿用酸 標(biāo)準(zhǔn)液回滴定(至pH8，粉紅色無色),以“青霉素鈉”為例 ChP 90,（2）空白試驗(yàn)： 不加樣品，其余操作同上,（1）主試驗(yàn), 討論 () 溶劑 新沸過且用0.01M NaOH液中和的水 目的：消除水中酸性物質(zhì)影響（如CO2） () 滴定前中和 消除能消耗堿的雜質(zhì)影響（如一些酯類雜質(zhì)） () 空白試驗(yàn)?zāi)康? 在加熱水解過程中，有可能會(huì)吸收CO2，對(duì)測(cè)定有影響，所以要做空白試驗(yàn)校正。 () 本法供試品用量較大，多用于效價(jià)高的供試品的測(cè)定,例,苯唑西林鈉 含量測(cè)定,取本品約0.5g，精密稱定，加新

26、沸過的并用0.01mol/L氫氧化鈉溶液中和至酚酞指示液剛顯紅色的水20ml，使溶解,再用0.01mol/L氫氧化鈉溶液中和后，精密加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)25ml，搖勻，置水浴中加熱20分鐘，注意避免吸收空氣中的二氧化碳，冷卻后，加酚酞指示液12滴，用鹽酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于40.14mgC19H19N3O5S。,（1）水解前先中和溶劑和樣品,（2）加熱時(shí)避免吸收CO2,不能使酚酞變紅,（3）空白試驗(yàn)校正(消除Na2CO3干擾),(四)可見紫外分光光度法 原理： 青霉素在弱酸性下（pH=4）

27、，不完 全水解，產(chǎn)生青酶烯酸，在320360nm 處有強(qiáng)吸收。 青霉烯酸在酸性溶液中極不穩(wěn)定，有 兩種改進(jìn)方法。,（1）銅鹽法（JP13）： 銅離子與青酶烯酸形成穩(wěn)定的螯合物，在320nm處有最大吸收。 對(duì)照品法定量。 用于氨芐青霉素的含量測(cè)定。,（水解）,穩(wěn)定劑,（2）方法,（3）特點(diǎn),實(shí)驗(yàn)條件隨各藥物穩(wěn)定性不同而定,標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照法,（4）計(jì)算,（1）原理,（咪唑）,青霉素族,（BP1993） （ChP95）,青霉素在咪唑的催化下，與氯化高汞定量地反應(yīng)生成青酶烯酸硫醇汞鹽，在324345nm下有最大吸收。 對(duì)照品同樣操作 用于氨芐西林鈉的含量測(cè)定,作用： 咪唑:催化劑,使水解產(chǎn)率高,生成產(chǎn)物穩(wěn)

28、定 醋酐的乙腈溶液:乙酰化氨芐青霉素側(cè)鏈 NH2,使max=325nm 硼酸緩沖液:調(diào)pH值 HgCl2:微量Hg2+催化劑,促進(jìn)反應(yīng),重現(xiàn)性好。,（2）方法,標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照法,（3）計(jì)算,pH 9,例,氨芐西林鈉 含量測(cè)定,取本品約60mg 置100ml量瓶中，加水溶解 并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置另一 100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，再精密 量取5ml，置25ml量瓶中，加硼酸緩沖液2.5ml與 醋酐的乙腈溶液（150）0.25ml，放置5min后，加咪唑溶液至刻度，搖勻，置60水浴中，加熱30min，取出冷卻，照分光光度法（附錄 A ），在325nm的波長處測(cè)定吸收度；另取

29、氨芐西林三水合物標(biāo)準(zhǔn)品，按同法測(cè)定，計(jì)算，即得。,（5）討論,a. 咪唑催化的水解產(chǎn)率高，硫 醇汞鹽穩(wěn)定（3h）,b. 側(cè)鏈有-NH2時(shí)，需加醋酐先 將其乙?；蟛拍馨l(fā)生上述 反應(yīng),（6）特點(diǎn),A、簡便快速 B、用標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，重現(xiàn)性良 好，RSD1%,USP JP,紅色,-內(nèi)酰胺類,NaOH,ChP 頭孢菌素類,特點(diǎn) 快速、高效、靈敏 專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好 一法多用（鑒別、檢查、含測(cè)）,哌拉西寧 原料藥 含量測(cè)定 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液10氫氧化四乙基銨溶液水（400503547）用磷酸調(diào)節(jié)pH值至5.5為流動(dòng)相。檢測(cè)波長為254nm。,以

30、“頭孢唑林鈉”為例 色譜條件： 柱：ODS 流動(dòng)相：磷酸二氫鉀、枸櫞酸溶液 乙腈（88：12） 檢測(cè)波長：254nm 內(nèi)標(biāo)物：乙酰苯胺,鏈霉素 雙氫鏈霉素 新霉素 卡那霉素 慶大霉素 巴龍霉素,第二節(jié) 氨基糖苷(甙)類抗生素的分析,Ch12-2 The analysis of aminoglucosides Antibiotic drugs,一、化學(xué)結(jié)構(gòu)及性質(zhì) chemical structure and properties （一）鏈霉素Streptomycin ( SM ) 1、結(jié)構(gòu)structure,鏈霉胍,N-甲基-L-葡萄糖胺,鏈霉糖,2、性質(zhì)： （1）三個(gè)堿性中心SM has 3

31、alkaline groups ： 2個(gè)強(qiáng)堿性胍基（PKa=11.5） 2 guanidyl group ( pKa=11.5) 1個(gè)甲氨基（PKa=7.7） 1 methylamino (pKa=7.7) 可與礦酸或有機(jī)酸成鹽 （2）鏈霉素在酸性或堿性條件下可變?yōu)殒溍闺液玩溍闺p糖胺,鏈霉素是鏈霉胍、鏈霉糖和N-甲基-L-葡萄糖胺以糖苷鍵彼此相連構(gòu)成。,慶大霉素是脫氧鏈霉胺、紫素胺和N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺縮合而成。,鏈霉胍 + 鏈霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺,鏈霉胍,鏈霉糖,N-甲基-L- 葡萄糖胺,（二）慶大霉素 1、結(jié)構(gòu),紫素胺,三個(gè)類似結(jié)構(gòu)的C1、C2、C1a組成的混合物

32、 C1：R1=R2=CH3 ;C2：R1=CH3,R2=H ;C1a：R1=R2=H,R3=H,N-甲基-3-去氧-4-甲基戊糖胺,脫氧鏈霉胺,2、性質(zhì)： （1）五個(gè)堿性中心PKa8 可與礦酸或有機(jī)酸成鹽 （2）無UV吸收，（因?yàn)闊o共軛系統(tǒng)）,Gentamycin ( GM ),絳紅糖胺 + 脫氧鏈霉胺 + 加洛糖胺,絳紅糖胺,紫素胺,2-脫氧鏈霉胺,加洛糖胺,N-甲基-3- 去氧-4-甲 基戊糖胺,慶大霉素C復(fù)合物 慶大霉素C1 GM C1 R=H R1、R2=CH3 慶大霉素C2 GM C2 R=R2=H R1=CH3 慶大霉素C1a GM C1a R、R1、R2=H 慶大霉素C2a GM

33、 C2a R=CH3 R1= R2=H 慶大霉素C2b GM C2b R=R1=H R2=CH3,1）鏈霉素和慶大霉素同屬堿性、水溶性抗生素。都含氨基糖堿性甙，分子中堿性-NH2可與無機(jī)酸(硫酸)結(jié)合成溶于水，難溶于有機(jī)溶劑的鹽。 2）鏈霉素一般裂解為一分子甙元，一分子雙糖。 3）堿性水解只能使鏈霉素鏈霉糖部分重排生成麥芽酚。 4）鏈霉素在230納米有吸收UV-absorption 230nm，而慶大霉素在紫外區(qū)無吸收。 5）穩(wěn)定性,2.性質(zhì),鏈霉素 pH57.5 慶大霉素 pH212,羥基胺結(jié)構(gòu),氨基糖苷結(jié)構(gòu)，具羥基胺類和 氨基酸的 性質(zhì)，可與茚三酮縮合成藍(lán)紫色縮合物。,Ninhydrin

34、test,+ 2,blue-violet condensation compound,吡咯衍生物,紅色,（Elson-Morgan反應(yīng)）,水解產(chǎn)物N-甲基葡萄糖胺特有反應(yīng),紅色,鏈霉糖特有反應(yīng),鏈霉素在堿性溶液中，鏈酶糖經(jīng)分子重排，消除N甲基葡萄糖胺及鏈酶胍，生成麥牙酚，麥牙酚可與鐵離子在微酸性溶液中形成紫紅色配位化合物。,（三）麥芽酚(Maltol)反應(yīng),Specific reaction of SM,紫紅,麥芽酚,Specific reaction of SM: Maltol test:,鏈霉胍特有反應(yīng),8-羥基喹啉, -萘酚,本品水溶液，加氫氧化鈉試液，水解為鏈酶胍，與8羥基喹啉作用，再

35、加次溴酸鈉試液，生成橙紅色化合物。,H+,慶大霉素?zé)oUV吸收,慶大霉素,（五）Molisch試驗(yàn) 糖的性質(zhì) 氨基糖苷類,（羥甲基糠醛）,利用不同結(jié)構(gòu)的原子核在D2O中有 不同的NMR光譜進(jìn)行鑒別,JP,主要研究原子核的磁化性質(zhì)及其在 外磁場中的運(yùn)動(dòng)規(guī)律,硫酸慶大霉素NMR譜7-08,硫酸慶大霉素NMR,鏈霉素B（甘露糖鏈霉素）,方法 TLC中的對(duì)照品法 （BP）,1.來源 反應(yīng)中間體,（二）硫酸奈替米星 檢查 有關(guān)物質(zhì) ChP 采用 TLC法 對(duì)照品法 對(duì)照品：1.奈替米星標(biāo)準(zhǔn)品 1.5mg/ml 2.奈替米星標(biāo)準(zhǔn)品 3 mg/ml 3. 西梭米星標(biāo)準(zhǔn)品 1.44 mg/ml 結(jié)果判斷：供試品

36、溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏 色與標(biāo)準(zhǔn)品溶液（3）所顯主斑點(diǎn)相比較，不得更深（1%），其他雜質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)品溶液（1）所顯主斑點(diǎn)相比較，均不得更深（1%），如有一點(diǎn)超過，應(yīng)不深于標(biāo)準(zhǔn)品溶液（2）的主斑點(diǎn)（2%）,發(fā)酵菌種不同 工藝差別,規(guī)定控制各組分的相對(duì)百分含量,ChP USP BP JP,max = 330nm,衍生化原理,1.,1-烷基硫代-2-烷基 異吲哚衍生物,RPHPLC,規(guī)定 C1 2550% C1a 1540% C2a +C2 2050%,峰面積歸一化法,鏈霉素、慶大霉素,本法系利用抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴(kuò)散作用量反應(yīng)平行線原理的設(shè)計(jì)，比較標(biāo)準(zhǔn)品與供試品兩者對(duì)接種的試驗(yàn)菌產(chǎn)生抑菌圈的大小，

37、以測(cè)定供試品效價(jià)的一種方法。,微生物檢定法 各國藥典主要采用,biological test,biological test,四、血清中慶大霉素的HPLC法,血漿樣品的預(yù)處理 離子對(duì)色譜法的目的： 除去氨基酸、肽、胺的干擾 選用OPA為熒光衍生化試劑 采用柱后衍生化法,HPLC method 常用于體內(nèi)藥分析,functional groups ： A ring： N(CH3)2 B and C ring：Enol group C=C-OH CONH2 Enol group C=C-OH D ring：ph-OH,Ch12-3四環(huán)素（tetracyclines）類抗生素的分析,四駢苯或萘駢萘的

38、衍生物， 氫化駢四苯環(huán),四個(gè)環(huán),Representstive drugs： name R R R R 四環(huán)素TC H OH CH3 H 金霉素CTC Cl OH CH3 H 土霉素OTC H OH CH3 OH 脫氧土霉素DOTC H H CH3 OH,四環(huán)素（TC）tetracycline,金霉素 (CTC) chlortetracycline,氯四環(huán)素,土霉素 (OTC) oxytetracycline,氧四環(huán)素,多西環(huán)素 (DOTC) doxycycline,脫氧土霉素,美他環(huán)素（METC） metacycline,母核含有：二甲胺基、酰胺基、酚羥基和兩個(gè)含有酮基和烯醇基的共扼雙鍵系統(tǒng)。

39、 2.性質(zhì) 1）acid-base property兩性化合物。 2）有吸濕性。 3） solubility :在水中溶解度小。 4） Stability :對(duì)氧化劑不穩(wěn)定。酸性溶液會(huì)發(fā)生差向異構(gòu)及降解；堿性水溶液會(huì)發(fā)生降解。 5）可與金屬離子形成配位化合物,游離體在水中溶解度很小，溶解度與pH有關(guān)。pH4.5-7.2難溶于水, pH低于4或高于8時(shí),可以得到高濃度的水溶液.,弱酸性,臨床上常用其鹽酸鹽 具有吸濕性,多含結(jié)晶水,pH3 7.5 熒光,四環(huán)素：6個(gè)結(jié)晶水占19.6% 土霉素：2個(gè)結(jié)晶水占7.5% 加熱時(shí)可失去結(jié)晶水,當(dāng)含水量低于19.6%的四環(huán)素和低于7.5%的土霉素,置于空氣中

40、要吸收水分。,1.,差向異構(gòu)化,淡黃黑,藍(lán)色熒光,弱酸性（pH2.06.0）溶液中， A環(huán)上手性C4構(gòu)型的改變，發(fā)生 差向異構(gòu)化，形成差向四環(huán)素。,差向化速度的影響因素：pH9時(shí)，差向化速度很小。高價(jià)的無機(jī)酸或有機(jī)酸根 存在或陰離子濃度增加，差向化速度增大。,4-差向四環(huán)素、4-差向金霉素， 他們的抗菌性極弱或完全消失。,差向四環(huán)素,（土霉素、多西環(huán)素不易差向異構(gòu)化）,土霉素和強(qiáng)力霉素由于C5上的羥基和二甲胺 基形成氫鍵，不易發(fā)生差向異構(gòu)化。,（1）酸性下降解,max = 445nm,max = 435nm,橙黃色,在酸性（pH2）時(shí)，C環(huán)上C6上羥基易脫落與C5a上的氫生成水，在C6-C5a

41、間形成雙鍵。經(jīng)重排使C環(huán)芳構(gòu)化，生成脫水四環(huán)素類 四環(huán)素、土霉素和金霉素可發(fā)生脫水；強(qiáng)力霉素不發(fā)生（C6無OH）。,C6上羥基,脫水四環(huán)素,TC,ETC,ATC,EATC,) Epimerization reaction ( in weakly acid solution ),) Acid degredation reaction ( in strong acid solution ),（2）堿性下降解,（熒光）,在堿性下，C環(huán)打開，生成無活性的具有內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的異四環(huán)素；若強(qiáng)堿性下加熱，可定量地轉(zhuǎn)化為異四環(huán)素，后者具有強(qiáng)烈熒光，可熒光法測(cè)定。 強(qiáng)力霉素不發(fā)生反應(yīng)，因C6無OH。,C6上羥基,Al

42、kali degredation reaction:,Complexation reaction with metal ions:,鋯（Zr4+）釷（Th4+）鈾（U6+） 鋅（Zn2+）銅（Cu2+）鋁（Al3+） 鎂（Mg2+）鈰（Ce4+）鈷（Co2+） Complexation C: C11，C12,4對(duì)氧化劑不穩(wěn)定： 對(duì)各種氧化劑都不穩(wěn)定，且堿性水溶液特別易氧化，顏色很快變深形成色素，干燥品較穩(wěn)定，但貯存時(shí)遇光可使顏色變深（因空氣氧化）。,2. IDENTIFICATION,1) Reaction with conc. Sulfuric acid : 2) Reaction with

43、 ferric chloride 3) Fluorescence method,四環(huán)素類酚羥基 + FeCl3,對(duì)各種氧化劑都不穩(wěn)定，且堿性水溶液特別易氧化，顏色很快變深形成色素，干燥品較穩(wěn)定，但貯存時(shí)遇光可使顏色變深（因空氣氧化）。,1mol/L鹽酸-甲醇（1100） 0.01mg/ml,UV,四環(huán)素類在紫外燈下 產(chǎn)生熒光，其降解產(chǎn)物也 具有熒光，可供鑒別。,正相分配薄層 色譜,EDTA 克服痕量金屬造成的 拖尾現(xiàn)象,三、雜質(zhì)檢查 Limit Test: TLC 降解產(chǎn)物及異構(gòu)雜質(zhì),會(huì)造成藥品質(zhì)量下降?？梢饜盒摹I吐、糖尿、蛋白尿及酸中毒，稱為Fanconi癥侯群。 引起毒性反應(yīng)的主要物質(zhì)

44、為差向異構(gòu)體、脫水物、差向脫水物質(zhì)，統(tǒng)稱為有關(guān)物質(zhì)。 ChP2005采用HPLC法檢查。 脫水物和差向脫水物含量越高，其吸收度越大，因此，ChP還規(guī)定雜質(zhì)的吸收度的限量。 Impurities: ETC ATC EATC,Limit Test: TLC,Impurities: ETC ATC EATC biopotancy down Assay down, toxicity 3) source of impurities: H+: ETC、ATC OH: ITC humidity，Temperature: isomer water （ room temp. ）: ATCEATC residue

45、 solvent: ATC, 4-差向四環(huán)素（ETC） 脫水四環(huán)素（ATC） 差向脫水四環(huán)素（EATC） 鹽酸金霉素（CTC）,TLC法（1995版）,HPLC法（2005版）,標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照法,鹽酸四環(huán)素,四環(huán)素有關(guān)物質(zhì)TLC圖,4,0.5,0.5,2,雜質(zhì)吸收度,雜質(zhì)吸收度,取供試品配成每毫升10mg/ml的溶液至4cm的吸收池中，在530nm處測(cè)定，其吸收度不得超過0.12。,應(yīng)嚴(yán)格控制溫度和時(shí)間,系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 1. 防護(hù)柱 2. 預(yù)試溶液 4-差向脫水四環(huán)素 四環(huán)素 3. RSD2.0%,ChP、USP,HPLC法（外標(biāo)法）,有關(guān)物質(zhì)的混合溶液 （ETC、EATC 、TC、CTC、ATC

46、）之間的分離度符 合要求,Assay,1) Ferric chloride colorimetry 2) UV,鹽酸四環(huán)素的測(cè)定系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：鹽酸四環(huán)素、有關(guān) 物質(zhì)及ATC峰間的 分離度均應(yīng)符合要 求。定量方法：外標(biāo)法以峰面積計(jì)。,JP 比色法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）,原理,抗生素類藥物中高分子雜質(zhì)的檢查,1.高分子雜質(zhì) 分子量大于藥物本身的雜質(zhì)總稱。,外源性雜質(zhì),內(nèi)源性雜質(zhì),蛋白、多肽、多糖或抗生素與蛋白、多肽、多糖的結(jié)合物。主要來自于發(fā)酵工藝，致敏，如青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽。 藥物的自身聚合物，來自于生產(chǎn)、貯存過程?？梢l(fā)過敏。,3.高分子雜質(zhì)的質(zhì)控方法（1）凝膠色譜法測(cè)定高分子雜質(zhì)：使高分子

47、雜質(zhì) 與藥物分離。（2）高分子雜質(zhì)的控制方法-自身對(duì)照外標(biāo)法 原理：測(cè)定在Kav=0處 藥物締合物的峰響應(yīng) 指標(biāo) 樣品中高分子雜質(zhì)的響應(yīng)指標(biāo) 按外標(biāo)法計(jì)算，得樣品中高分子雜質(zhì) 相當(dāng)于藥物本身的相對(duì)含量。,（3）高分子雜質(zhì)的分析方法簡單測(cè)定系統(tǒng)：葡聚糖凝膠G-10（40120m）柱.HPLC系統(tǒng):葡聚糖凝膠G-10柱.,大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,十四元大環(huán)的抗生素：紅霉素 琥乙紅霉素 羅紅霉素 十六元大環(huán)的抗生素：麥迪霉素 交沙霉素 螺旋霉素 乙酰螺旋霉素 白霉素等,常用藥物介紹：紅霉素,（一）結(jié)構(gòu),（二）性質(zhì)及應(yīng)用 易水解失效 應(yīng)用：紅霉素水溶性較小，在酸中不穩(wěn)定，易被胃酸破壞，只能口服。為了增加在水

48、中的溶解性，用紅霉素與乳糖醛酸成鹽，制成注射用乳糖酸紅霉素制劑供藥用 與硫酸作用顯紅棕色 應(yīng)用：鑒別 本品溶于丙酮后，加鹽酸即顯橙黃色，漸變?yōu)樽霞t色，轉(zhuǎn)入氯仿中則顯藍(lán)色 應(yīng)用：鑒別,99：89下列哪個(gè)藥物會(huì)發(fā)生羥肟酸 鐵反應(yīng) A. 青霉素 B. 慶大霉素 C. 紅霉素 D. 鏈霉素 E. 維生素C,99m：71中國藥典(1995年版)測(cè)定頭 孢菌素類藥物的含量時(shí)，多 數(shù)采用的方法是 A. 微生物法 B. 碘量法 C. 汞量法 D. 正相高效液相色譜法 E. 反相高效液相色譜法,95：139屬于-內(nèi)酰胺類的抗生素藥 物有 A. 青霉素 B. 紅霉素 C. 頭孢菌素 D. 慶大霉素 E. 四環(huán)素,

49、45能和茚三酮發(fā)生呈色反應(yīng)的物質(zhì)有 A鏈霉素 B慶大霉素 C土霉素 D氨基酸 E苯巴比妥,96：135.青霉素類藥物可用下面哪些 方法測(cè)定 A. 三氯化鐵比色法 B. 汞量法 C. 碘量法 D. 硫醇汞鹽法 E. 酸性染料比色法,110能發(fā)生重氮化一偶合反應(yīng)的抗 生素類藥物是 A. 青霉素 B. 慶大霉素 C. 芐星青霉素 D. 鹽酸四環(huán)素 E. 普魯卡因青霉素,99：116120以下反應(yīng)可適用的藥物 A. 青霉素 B. 鏈霉素 C. 兩者均能 D. 兩者均不能 116Kober反應(yīng) 117. 羥肟酸鐵反應(yīng) 118. 坂口反應(yīng) 119. N甲基葡萄糖胺反應(yīng) 120. 在酸性溶液中水解,D,A,

50、B,B,C,98：126130 可以鑒別的藥物是 A. 鏈霉素 B. 慶大霉素 C. 兩者均可 D. 兩者均不可 126. 用Kober反應(yīng) 127. 用坂口反應(yīng) 128. 用麥芽酚反應(yīng) 129. 用三氯化鐵反應(yīng) 130. 用茚三酮反應(yīng),D,A,A,D,C,問題4650 A. 茚三酮反應(yīng) B. 麥芽酚反應(yīng) C. 坂口反應(yīng) D. FeC13反應(yīng) E. 羥肟酸鐵反應(yīng) 46頭孢唑林鈉 47金霉素 48鏈霉素 49慶大霉素 50青霉素,E,D,E,A,ABC,（ ）青霉素分子能與碘定量反應(yīng)，因此可以根據(jù)消耗的碘量計(jì)算青霉素的含量。,99m：90四環(huán)素在酸性條件下的降 解產(chǎn)物是 A. 差向四環(huán)素 B.

51、脫水四環(huán)素 C. 異四環(huán)素 D. 去甲四環(huán)素 E. 去甲氧四環(huán)素,第四節(jié) 氯霉素類抗生素,常用藥物介紹：氯霉素 （一）結(jié)構(gòu),（二）性質(zhì)及應(yīng)用 1旋光性 本品結(jié)構(gòu)中含兩個(gè)手性碳原子，有四個(gè)光學(xué)異構(gòu)體，其中僅1R，2R（）型或D-（）蘇阿糖型有抗菌活性，其無水乙醇溶液，測(cè)其旋光度，應(yīng)為右旋；另取本品的醋酸乙酯溶液，測(cè)其旋光度，應(yīng)為左旋。比旋度為18.5至21.5（5%的無水乙醇溶液，25），為臨床所使用。,2性質(zhì)穩(wěn)定，能耐熱，煮沸5h對(duì)抗菌活性無影響。但在強(qiáng)堿性（pH為9以上）或強(qiáng)酸性（pH為2以下）溶液中，可引起水解。 3可經(jīng)氯化鈣和鋅粉還原成羥胺衍生物，與苯甲酰氯進(jìn)行苯甲?；晌锟膳c高鐵離

52、子形成紫紅色的配位化合物。 應(yīng)用：鑒別。 4與乙醇制氫氧化鉀試液共熱熱，溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)。,（三）用途 為抗生素類藥物。對(duì)革蘭氏陰性菌和陽性菌均有抑制作用，但對(duì)前者的效力強(qiáng)于后者。臨床上主要用于治療傷寒、副傷寒、斑疹傷寒等。其他如對(duì)百日咳、沙眼、細(xì)菌性痢疾和尿道感染等也有療效。 （四）貯存 本品應(yīng)密封保存。,第六節(jié) 其他類抗生素,抗生素種類繁多，結(jié)構(gòu)類型也比較復(fù)雜，現(xiàn)再簡單介紹幾種臨床使用的抗生素品種。 （一）多黏菌素 多黏菌素是多黏桿菌所產(chǎn)生的有多種氨基酸和脂肪酸結(jié)合而成的堿性多肽類抗生素的總稱。多黏菌素有A、B1 、B2、C、D、E1 、E2、M等，都是環(huán)狀多肽和一種脂肪酸結(jié)合而成的

53、堿性物質(zhì)。臨床使用的是多黏菌素B（B1和B2的混合物）或多黏菌素E（E1和 E2的混合物）的硫酸鹽。二者結(jié)構(gòu)的區(qū)別在于環(huán)狀多肽中有一個(gè)氨基酸不同，多黏菌素B中為D-苯丙氨酸，而多黏菌素E中為D-亮氨酸。,多黏菌素B的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：,本品為抗生素類藥。對(duì)革蘭氏陰性菌有較強(qiáng)的抑制作用，尤其對(duì)綠膿桿菌有較好的效用。臨床上用于治療尿道、灼傷感染或假單孢菌所致的全身性感染。,（二）林可霉素和克林霉素 林可霉素又名潔霉素，是由鏈霉菌4-1024所產(chǎn)生的一種抗生素?？肆置顾貏t是將林可霉素的7位羥基用氯原子取代得到的半合成抗生素，又名氯潔霉素。,以上兩個(gè)藥物均為抗生素類藥。由于對(duì)組織滲透力強(qiáng)，因此對(duì)革蘭氏陽性

54、菌如鏈球菌、金葡菌和肺炎球菌等所引起的各種感染（敗血癥、呼吸道感染、五官感染等）療效良好，尤對(duì)慢性骨髓炎的療效較為突出。克林霉素的抗菌作用約為林可霉素的4倍，口服吸收快，血藥濃度高，胃腸道反應(yīng)小。,Antibiotics,Antibiotics are microbial metabilites or synthetic analogs inspired by them that,in small doses, inhibit the growth and survival of microorganism. In clinic the antibiotics are used to be a

55、ntibacterial mainly,but, in recent year, they can also be used for anti-cancer,anti-viral ,enzyme-inhibitors, and receptor-antagonist.,Classification (According their structures)：,1.Beta-Lactam antibiotics ( 內(nèi)酰胺類) 2.Tetracylines antibiotics (四環(huán)素類) 3.Aminoglycoside antibiotics (氨基糖甙類) 4.Macrolides an

56、tibiotics (大環(huán)內(nèi)酯類) 5. Others,Classification (According to their mechanism of actions,Inhibit the biosynthesis of bacterial cell walls ( Lactam) React with cell membrances (Polymycin) Disturber with the biosynthesis of protein (Aminoglycosides) Inhibit the replication and transcription of nucleonic ac

57、id (Nalicixic acid),1.* Lactam Antibiotics,*The group of antibiotics known as the -lactams include penicillins, cephalosporins, monobactams and the carbapenems.,These all share a common -lactam ring. The ring is very strained and the bond between the carbonyl and the nitrogen in the -lactam ring is very labile and hence makes the molecule reactive. The R-group substitute of the penicillin nucleus can be changed to give the molecule different antibacterial properties. T