1、,免疫學(xué)檢驗(yàn),第二十七章免疫增殖病及檢驗(yàn),免疫增殖病的概念和分類(lèi) 單克隆丙種球蛋白病的概念 常見(jiàn)的單克隆丙種球蛋白病 本周蛋白、M蛋白的概念 單克隆丙種球蛋白病的檢測(cè),本章要點(diǎn),目錄,免疫增殖?。╥mmunoproliferative disease）是免疫系統(tǒng)異常增生而引起的疾病。免疫增殖病的重要臨床表現(xiàn)包括免疫球蛋白數(shù)量和功能的異常，因此通過(guò)異常免疫球蛋白的檢測(cè)，可以為該類(lèi)疾病的診斷提供重要依據(jù)，檢測(cè)異常免疫球蛋白已經(jīng)成為臨床免疫檢驗(yàn)的重要檢測(cè)內(nèi)容。,前 言,第一節(jié) 概述,免疫增殖病的概念 免疫器官、免疫組織或免疫細(xì)胞異常增生（包括良性或惡性）所致的一組疾病。,免疫增殖病的分類(lèi),免疫增殖病

2、的分類(lèi),免疫球蛋白病的概念 由于B細(xì)胞或漿細(xì)胞異常增殖所引起的免疫球蛋白的異常增加，從而導(dǎo)致機(jī)體病理?yè)p傷的免疫增殖病。,分類(lèi),單克隆免疫球蛋白?。▎我豢寺　盒裕?多克隆免疫球蛋白?。ㄈ妗⒘夹曰蚶^發(fā)）,第二節(jié) 單克隆丙種球蛋白病的臨床免疫學(xué)特征,突出特點(diǎn)：患者血清存在異常增多的單克隆免疫球蛋白 M蛋白（monoclonal protein）：?jiǎn)慰寺∶庖咔虻鞍桌砘再|(zhì)十分均一，但是多無(wú)免疫活性，可以是IgG、IgM、IgA、IgE或IgD，也可以是或輕鏈中的任何一型。 本周蛋白（Bence-Jone protein）：M蛋白的輕鏈分子量較小，容易從尿中排出，最早由Bence-Jones測(cè)知。,

3、一、多發(fā)性骨髓瘤,多發(fā)性骨髓瘤（multiple myeloma）是漿細(xì)胞異常增生的惡性腫瘤，也稱(chēng)漿細(xì)胞瘤，因其引起骨破壞而得名?；颊叱０橛胸氀?、腎功損害和免疫功能障礙。近年發(fā)病有增高趨勢(shì)，男性多發(fā)，男女比約為2:1，平均發(fā)病年齡是46.5歲。,臨床表現(xiàn)： 骨痛 貧血 感染 高黏血癥表現(xiàn) 腎功能損害,患者骨破壞所致頭顱腫物及眼球突出,特點(diǎn)： 血清中有大量單克隆M蛋白或尿中有大量本周蛋白 免疫球蛋白含量明顯降低 骨髓發(fā)現(xiàn)大量漿細(xì)胞或組織活檢證實(shí)有漿細(xì)胞瘤 原發(fā)性的溶骨性損害或廣泛骨質(zhì)疏松,不同類(lèi)型的多發(fā)性骨髓瘤特點(diǎn),二、原發(fā)性巨球蛋白血癥,原發(fā)性巨球蛋白血癥（macroglobulinemia）

4、是以分泌IgM的漿細(xì)胞惡性增殖為病理基礎(chǔ)的疾病，好發(fā)于老年男性。 主要表現(xiàn)骨髓外浸潤(rùn)，以淋巴結(jié)、肝和脾腫大等為主要體征并伴有血黏滯過(guò)高綜合征。,實(shí)驗(yàn)室檢查： 血清中患者血清IgM水平往往超過(guò)300mg/dl 血清分離不出或呈膠凍狀，電泳時(shí)血清有時(shí)難以泳動(dòng)，集中于原點(diǎn)是該病的電泳特征 骨髓象可見(jiàn)淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和介乎兩者之間的漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞明顯增多 有些IgM分子具有冷球蛋白的特征 有約40的病人可出現(xiàn)本周蛋白尿,三、良性單克隆丙種球蛋白病,良性單克隆丙種球蛋白?。╞enign monoclonal gammopathy）是指血清中出現(xiàn)高水平免疫球蛋白，但并無(wú)漿細(xì)胞惡性增殖的疾病。一般無(wú)臨床癥

5、狀，往往因其它疾病就診時(shí)發(fā)現(xiàn)血中有M蛋白，但其并不呈進(jìn)行性增加，在少部分正常老年人群中也可出現(xiàn)上述情況。,三、惡性與良性單克隆丙種球蛋白病的鑒別診斷,惡性與良性單克隆丙種球蛋白病的鑒別,四、冷球蛋白血癥,冷球蛋白（cryoglobulin）：指溫度低于30 時(shí)易自發(fā)形成沉淀，加溫后又可溶解的免疫球蛋白 冷球蛋白血癥：當(dāng)血中含有冷球蛋白時(shí)稱(chēng)為冷球蛋白血癥,特點(diǎn)： 多見(jiàn)于某些原發(fā)性疾病，例如感染、自身免疫病和某些免疫增殖病 患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血黏度、紅細(xì)胞凝集、血栓形成等病理表現(xiàn)。 常見(jiàn)癥狀有雷諾現(xiàn)象（即寒冷性肢端紫紺）、皮膚紫癜、壞死、潰瘍、寒冷性蕁麻疹、關(guān)節(jié)痛、腎損害、神經(jīng)系統(tǒng)病

6、變（如感覺(jué)麻木、運(yùn)動(dòng)障礙等）以及肝、脾等器官損害。,五、淀粉樣變性,淀粉樣變性（amyloidosis）是組織器官中有淀粉樣物質(zhì)沉積的一種病理現(xiàn)象。該病比較少見(jiàn)，?？衫奂案鞣N不同的組織和器官，但以小動(dòng)脈、腎小球、肝、脾和腎上腺最為常見(jiàn)。,第三節(jié) 單克隆丙種球蛋白病的檢測(cè)方法,血清蛋白區(qū)帶電泳 免疫球蛋白定量檢測(cè) 免疫球蛋白的分類(lèi)鑒定 本周蛋白檢測(cè) 冷球蛋白檢測(cè),一、血清蛋白區(qū)帶電泳,血清區(qū)帶電泳是測(cè)定M蛋白的一種定性實(shí)驗(yàn)，常采用醋酸纖維素膜和瓊脂糖電泳兩種方法。 M蛋白在電泳時(shí)出現(xiàn)于區(qū)代中，不同類(lèi)型的M蛋白的電泳后所處位置。,二、免疫球蛋白定量檢測(cè),免疫球蛋白定量測(cè)定較常用的方法有單向擴(kuò)散法與

7、免疫比濁法，前者較為簡(jiǎn)便，后者更為準(zhǔn)確迅速。 惡性單克隆丙種球蛋白病常呈現(xiàn)某一類(lèi)丙種球蛋白的顯著增高。 在良性丙種球蛋白病的血清標(biāo)本中，M蛋白的升高幅度一般不象惡性丙種球蛋白病那么高,三、免疫球蛋白的分類(lèi)鑒定,免疫電泳 免疫選擇電泳 免疫固定電泳,免疫電泳： 免疫電泳是將瓊脂糖電泳和免疫雙向擴(kuò)散相結(jié)合的一項(xiàng)技術(shù)。 血清標(biāo)本先行區(qū)帶電泳分成區(qū)帶，繼而用特定的抗血清進(jìn)行免疫擴(kuò)散，陽(yáng)性樣本的M蛋白將在適當(dāng)?shù)牟课恍纬僧惓３恋砘。鶕?jù)抗血清的種類(lèi)、電泳位置及沉淀弧的形狀可以對(duì)M蛋白作出判定。,正常及某些患者免疫電泳圖譜,上孔中為血清，下孔中為尿液，槽中為抗血清，箭頭所指為骨髓瘤蛋白 a：抗正常人血清；b

8、：抗IgG血清；c：抗IgA血清；d：抗IgM血清 e：抗血清；f：抗血清A：IgA/型骨髓瘤； B：IgG/型骨髓瘤； C：IgG重鏈病,免疫選擇電泳： 制備含抗或血清的薄層瓊脂板，打孔并加入待測(cè)標(biāo)本進(jìn)行火箭電泳，待形成相應(yīng)的火箭樣沉淀峰后，于孔的兩側(cè)各挖一槽，加入抗某類(lèi)免疫球蛋白血清或另一型抗輕鏈血清，溫育擴(kuò)散后，根據(jù)沉淀弧形成的情況，進(jìn)行分析鑒定。,免疫選擇電泳圖譜示意圖,瓊脂中含抗及抗抗血清，示例孔中為血清標(biāo)本， 槽中為抗IgA重鏈抗血清 A：正常人；B：重鏈病；C：IgA骨髓瘤,免疫固定電泳： 免疫固定電泳是血清區(qū)帶電泳與免疫沉淀反應(yīng)相結(jié)合的定性實(shí)驗(yàn)。 與免疫電泳比較免疫固定電泳具有

9、更高的靈敏性，M蛋白在免疫固定電泳中顯示狹窄而界限明確的區(qū)帶，而多克隆增殖或正常血清球蛋白區(qū)帶則比較彌散。,IgG/型多發(fā)性骨髓瘤的免疫固定電泳圖譜,四、本周蛋白檢測(cè),3.直接定量分析,尿液透析濃縮50倍后進(jìn)行,2.免疫固定電泳,1.本周蛋白定性檢查(篩查),五、冷球蛋白檢測(cè),冷球蛋白是血清中的一種特殊蛋白質(zhì)，在4時(shí)自發(fā)沉淀，加溫至37時(shí)又可溶解，故常利用這種可逆性冷沉淀的特性對(duì)其進(jìn)行測(cè)定。,取患者外周血，分離出血清置4冰箱中，一般在24h72h出現(xiàn)沉淀，若1周仍不出現(xiàn)沉淀者方可判斷為陰性。 如形成沉淀，再置37溫育使其復(fù)溶，也可將冷沉淀物離心洗滌后做定性與定量分析,異常免疫球蛋白檢測(cè)的應(yīng)用原則 凡檢出無(wú)法解釋的免疫球蛋白異常增高，都應(yīng)建議做進(jìn)一步的檢查。 初篩實(shí)驗(yàn)：區(qū)帶電泳分析、免疫球蛋白定量檢測(cè)或尿本-周蛋白定性。 確證實(shí)驗(yàn)：免疫電泳、免疫固定電泳、免疫球蛋白亞型定量和血清及尿中輕鏈等檢測(cè)。,免疫增殖性疾病是指由于淋巴細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化所導(dǎo)致的一組疾病。免疫球蛋