1、章末整合,第二章 細(xì)胞工程,欄目索引,本章網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建,規(guī)律方法整合,本章網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建,返回,答案,_；_；_；_； _；,細(xì)胞的全能性,體細(xì)胞雜交,流動(dòng),單克隆抗體制備,動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng),規(guī)律方法整合,方法一列表比較動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng) 典例1下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較中，錯(cuò)誤的是() A.所用的培養(yǎng)基的成分基本相同 B.植物組織培養(yǎng)的結(jié)果是培育成植株，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是培育成很多 細(xì)胞 C.植物組織培養(yǎng)的目的是為了快速繁殖和獲得無病毒的植株，動(dòng)物細(xì)胞培 養(yǎng)的目的是為了獲得細(xì)胞產(chǎn)物或細(xì)胞 D.植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖,解析答案,解析植物組

2、織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基的成分差別較大，動(dòng)物培養(yǎng)基需要加入血清，植物培養(yǎng)基需要加入植物激素和瓊脂。 答案A,方法鏈接,特別提醒胰蛋白酶可消化細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，使組織分散成單個(gè)細(xì)胞。若長時(shí)間作用也會(huì)消化細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，對細(xì)胞有損傷作用，因此要控制好胰蛋白酶的作用時(shí)間。,遷移訓(xùn)練 1.用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是() A.都需用CO2培養(yǎng)箱 B.都需用液體培養(yǎng)基 C.都要在無菌條件下進(jìn)行 D.都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性 解析植物組織培養(yǎng)用固體培養(yǎng)基，不需用CO2培養(yǎng)箱；植物組織培養(yǎng)可得到完整的植物個(gè)體，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得的是動(dòng)物細(xì)胞或代謝產(chǎn)物，不能體現(xiàn)細(xì)胞

3、的全能性；植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)均需要在無菌條件下進(jìn)行。,C,解析答案,方法二巧辨動(dòng)物細(xì)胞工程中幾組易混的概念 典例2下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中，正確的是() A.培養(yǎng)中的人的效應(yīng)T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體 B.培養(yǎng)中的人的B淋巴細(xì)胞能夠無限增殖 C.人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細(xì)胞株 D.用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞 解析效應(yīng)T細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，不能進(jìn)行無限增殖，也不能產(chǎn)生抗體；B淋巴細(xì)胞不能進(jìn)行無限增殖；成熟的紅細(xì)胞不具有分裂能力；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，將肝組織剪碎，利用胰蛋白酶處理可獲得單個(gè)肝細(xì)胞。,D,解析答案,方法鏈接 1.貼壁生長現(xiàn)象及接觸抑制現(xiàn)象 (1)貼壁生長：動(dòng)物

4、細(xì)胞在液體培養(yǎng)基中懸浮生長一段時(shí)間之后，大部分細(xì)胞會(huì)貼附在培養(yǎng)瓶的內(nèi)壁上生長。 (2)接觸抑制：細(xì)胞有絲分裂數(shù)目增加到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象。,2.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng) (1)原代培養(yǎng)：從供體獲取細(xì)胞與組織后的初次培養(yǎng)。 (2)傳代培養(yǎng)：將原代培養(yǎng)的細(xì)胞分離稀釋后轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。 (3)癌細(xì)胞失去了接觸抑制的機(jī)制，可以在培養(yǎng)瓶中形成多層細(xì)胞。 3.細(xì)胞株和細(xì)胞系 (1)細(xì)胞株：傳代培養(yǎng)的細(xì)胞能傳到1050代，這樣的傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞株。 (2)細(xì)胞系：傳代培養(yǎng)的細(xì)胞在傳到50代后，有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，并且具有癌變的特點(diǎn)，能無限地傳代下去，叫做細(xì)胞

5、系。,遷移訓(xùn)練 2.下列說法正確的是() A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物組織培養(yǎng)無任何聯(lián)系 B.在細(xì)胞培養(yǎng)中，有原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)之分 C.原代培養(yǎng)比傳代培養(yǎng)進(jìn)行得晚 D.在對動(dòng)物成纖維細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需用纖維素酶將細(xì)胞分散開 解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和組織培養(yǎng)之間相互依存，表現(xiàn)出一定的組織特性；原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)都屬于細(xì)胞培養(yǎng)，且傳代培養(yǎng)較晚；纖維素酶是分解纖維素的，而動(dòng)物細(xì)胞之間的連接物質(zhì)的成分主要為蛋白質(zhì)，應(yīng)用胰蛋白酶使細(xì)胞分散開。,B,解析答案,方法三比較動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交 典例3下列對植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較，描述正確的是() A.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，誘導(dǎo)融

6、合的方法也完 全相同 B.兩者都可以跨越種屬間的生殖隔離，突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣 雜交成為可能 C.利用植物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為生產(chǎn)單克隆抗體開辟 了新途徑 D.目前科學(xué)家終于實(shí)現(xiàn)了兩個(gè)植物物種間的體細(xì)胞雜交，得到了同時(shí)具有兩 個(gè)物種遺傳物質(zhì)的超級(jí)植物，并使它們的性狀全部得以體現(xiàn),解析答案,解析動(dòng)物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)方法有生物方法，如用滅活的病毒，而植物原生質(zhì)體融合沒有用生物方法；單克隆抗體的制備利用的是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)；兩個(gè)植物物種間的體細(xì)胞雜交，得到了同時(shí)具有兩個(gè)物種遺傳物質(zhì)的超級(jí)植物，并不一定使它們的性狀都能得以體現(xiàn)，這是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。 答案B,方法鏈接

7、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的實(shí)質(zhì)是相同的，都是用兩個(gè)或者多個(gè)體細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞的過程，但二者還有較大的區(qū)別。 1.植物體細(xì)胞雜交 (1)原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性。 (2)細(xì)胞融合的方法：去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。 (3)誘導(dǎo)融合的手段：離心、電激、振動(dòng)、顯微操作、聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)。 (4)用途：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，獲得雜種植株。,2.動(dòng)物細(xì)胞融合 (1)原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖。 (2)細(xì)胞融合的方法：使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合。 (3)誘導(dǎo)融合的手段：除應(yīng)用植物體細(xì)胞雜交手段外，再加上滅活的病毒誘導(dǎo)(如圖)。,(4)用途：制備單克隆抗體的技術(shù)之一(不能獲得動(dòng)物

8、個(gè)體，可獲得細(xì)胞及其產(chǎn)物)。,遷移訓(xùn)練 3.下面是關(guān)于番茄和馬鈴薯雜交的過程，回答下列問題： (1)若番茄細(xì)胞內(nèi)含A條染色體，馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)含B條染色體，將番茄和馬鈴薯采用雜交育種方法培育(假設(shè)能成功)，得到的后代應(yīng)含_條染色體，還必須用_處理幼苗，才能得到可育的“番茄馬鈴薯”植株，此時(shí)體細(xì)胞中含有_條染色體。 (2)若番茄是二倍體，馬鈴薯是四倍體，則雜種植株為_倍體。,六,秋水仙素,AB,答案,方法四巧記單克隆抗體制備過程中的關(guān)鍵點(diǎn) 典例4 科學(xué)家用滅活的病毒把骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞，滅活病毒的作用是() A.病毒比較小，可鉆入到細(xì)胞內(nèi) B.滅活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可

9、以讓細(xì)胞聚集 C.滅活的病毒已失去感染活性，對各種動(dòng)物細(xì)胞不造成破壞，但所保留的融合活性可使不同的動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行融合 D.滅活的病毒帶有目的基因，通過融合可以讓雜交細(xì)胞帶有目的基因,解析動(dòng)物細(xì)胞融合常用滅活的病毒作促融合因子是因?yàn)闇缁畹牟《静辉倬哂懈腥拘?，不?huì)對細(xì)胞造成破壞，但仍可促使不同的細(xì)胞融合。,C,解析答案,方法鏈接 1.關(guān)鍵思路及操作依據(jù) (1)關(guān)鍵思路 克隆單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。 將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得雜交瘤細(xì)胞。 (2)用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的原因 每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體；不同種類的B淋巴細(xì)胞分泌的抗體不同。 B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)不能無限

10、增殖；骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖。,2.兩次篩選 (1)第一次篩選是用選擇培養(yǎng)基選出B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞。 (2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng)，在每個(gè)孔中只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。 3.兩種培養(yǎng)：注射到小鼠的腹腔內(nèi)進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)或者利用培養(yǎng)基體外培養(yǎng)。,遷移訓(xùn)練 4.1975年科學(xué)家首次利用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備出單克隆抗體。請據(jù)圖回答下列問題：,(1)病原體注入小鼠體內(nèi)后，一般要經(jīng)過_細(xì)胞處理后，才能被免疫細(xì)胞識(shí)別。 (2)制備單克隆抗體所用的B淋巴細(xì)胞一般從脾中采集，然后以_作促融合因子，使B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。通過篩選和克隆培養(yǎng)，獲得的雜交瘤細(xì)胞具有_的特點(diǎn)。,(3)單克隆抗體的特點(diǎn)是_。 根據(jù)圖示寫出應(yīng)用雜交瘤技術(shù)獲得單克隆抗體的兩種