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1、離體蛙心灌流,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)離體蛙心灌流的方法; 觀察鈉、鉀、鈣三種離子對(duì)心臟活動(dòng)的影響。 觀察腎上腺素、乙酰膽堿等因素對(duì)心臟活動(dòng)的影響。,實(shí)驗(yàn)原理,作為蛙心起搏點(diǎn)的靜脈竇能按一定節(jié)律自動(dòng)產(chǎn)生興奮。因此,只要將離體失去神經(jīng)支配的蛙心保持在適宜的環(huán)境中,在一定時(shí)間被仍能產(chǎn)生節(jié)律性興奮和收縮。 另一方面,心臟正常的節(jié)律性活動(dòng)有賴于內(nèi)環(huán)境理化因素的相對(duì)穩(wěn)定,所以,改變灌流液的成分,則可以引起心臟活動(dòng)的改變。,實(shí)驗(yàn)原理,工作細(xì)胞:普通的具有收縮能力的心肌細(xì)胞 自律細(xì)胞:組成特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)的心肌細(xì)胞 心肌收縮力:Ca2+ 心率:自律細(xì)胞4期自動(dòng)除極速度 RP或MDP與閾電位之差,動(dòng)物與器材,牛蛙 斯氏蛙心
2、套管、套管夾、常用手術(shù)器械、任氏液、張力換能器、蛙心夾、0.65%NaCl溶液、 5%NaCl溶液、 2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:5000腎上腺素溶液、1:10000乙酰膽堿溶液、300u/ml肝素溶液,方法與步驟,離體蛙心的制備:雙毀髓左主動(dòng)脈結(jié)扎左右兩主動(dòng)脈下方活結(jié)備用剪口,插管(管內(nèi)盛任氏液與肝素)結(jié)扎備用線(套管左右主動(dòng)脈)剪斷動(dòng)脈結(jié)扎并剪斷靜脈。 固定套管并用任氏液換洗血液;進(jìn)入RM6240系統(tǒng)。,方法與步驟,觀察并記錄正常心搏曲線; 向套管內(nèi)分別加入以下溶液(0.65%NaCl溶液置換任氏液 、 0.5%NaCl溶液1-2d、1%KCl溶液 1-2d 、2%CaCl2溶液1d 、1:5000腎上腺素溶液1-2d 、1:10000乙酰膽堿溶液1-2d ) ,觀察并記錄曲線變化。,0.65%,0.5%NaCl 競(jìng)爭(zhēng)性抑制Ca內(nèi)流 胞漿內(nèi)Ca 心肌細(xì)胞收縮力,腎上腺素:主要與心肌的1受體結(jié)合,產(chǎn)生正性變時(shí)、變力和變傳導(dǎo)效應(yīng)。 乙酰膽堿:與心肌細(xì)胞的M2受體結(jié)合,產(chǎn)生負(fù)性變時(shí)、變力和變傳導(dǎo)效應(yīng)。 具體作用機(jī)制見大學(xué)生理學(xué)P236239、P248,注意事項(xiàng),制備蛙心標(biāo)本時(shí),勿傷靜脈竇; 各溶液作用一旦出現(xiàn),應(yīng)立即用新鮮任氏液換洗,以免心肌受損,而且待心跳恢復(fù)
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