1、內(nèi)容,潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測(cè) 1，潔凈區(qū)級(jí)別標(biāo)準(zhǔn) 2，潔凈區(qū)的驗(yàn)證和監(jiān)測(cè) 3，潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測(cè)方案 4，環(huán)境監(jiān)測(cè)儀器、設(shè)備、培養(yǎng)基 趨勢(shì)分析和質(zhì)量回顧 1，警戒限和糾偏限的設(shè)定 2，趨勢(shì)分析 3，質(zhì)量回顧 口服藥品環(huán)境監(jiān)測(cè) 環(huán)境監(jiān)測(cè)結(jié)果超標(biāo)案例分析 常見問題探討,1,潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測(cè),2,潔凈區(qū)年度級(jí)別確認(rèn),測(cè)試項(xiàng)目,風(fēng)速或風(fēng)量測(cè)試 換氣次數(shù) 高效檢漏 靜壓差測(cè)試 氣流方式 溫度 相對(duì)濕度 照度 噪聲,3,懸浮粒子測(cè)試 沉降菌測(cè)試 浮游菌測(cè)試 表面微生物測(cè)試,1，潔凈級(jí)別及標(biāo)準(zhǔn),新版GMP（2010修訂）和 EU -GMP、WHO-GMP 2010建議稿標(biāo)準(zhǔn)一致。,4,2，潔凈區(qū)驗(yàn)證和監(jiān)測(cè),懸浮粒子的要求

2、：附錄1 第九、十條 1、A級(jí)區(qū)確認(rèn)時(shí)的采樣量不少于1m3 2、潔凈區(qū)的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè) 懸浮粒子的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè) 關(guān)鍵操作的全過程，對(duì)A級(jí)區(qū)進(jìn)行粒子監(jiān)測(cè) A級(jí)區(qū)的監(jiān)測(cè)頻率、取樣量，及時(shí)發(fā)現(xiàn)人為干預(yù)、偶發(fā)事件及任何系統(tǒng)的破壞 B級(jí)區(qū)：類似于A級(jí)區(qū)，采樣頻率、采樣量可以調(diào)整 C級(jí)區(qū)：質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理原則確定 D級(jí)區(qū)：一般不作要求，（法規(guī)：必要時(shí)） 對(duì)于C/D級(jí)區(qū)的自凈時(shí)間應(yīng)達(dá)到規(guī)定要求,5,2，潔凈區(qū)驗(yàn)證和監(jiān)測(cè),取樣量和取樣點(diǎn) ISO14644-1 B.4.2 節(jié)有明確的采樣量的計(jì)算公式： 采樣量（升）=(20/級(jí)別中最大粒子限度）1000，顯然對(duì)于A 級(jí)，采樣量為(20/20)1000 = 1 米3 從上式中可

3、見，級(jí)別要求越低，取樣量就越小 取樣點(diǎn)數(shù)由B.1.1公式： 取樣點(diǎn)數(shù) , A為潔凈區(qū)面積，例如10米5米的區(qū)域，取樣點(diǎn)應(yīng)為8（取整數(shù)） 取樣點(diǎn)均勻分布，位于工作面高度,注意：這里僅指在潔區(qū)劃分時(shí)加以采用,6,取樣點(diǎn)的確定-GB,潔凈區(qū)（室）空氣懸浮粒子、浮游菌及沉降菌的最少取樣點(diǎn)數(shù),來源： GB/T 16292-16294，2010,7,8,1，潔凈級(jí)別及標(biāo)準(zhǔn),微生物控制動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn),微生物的要求：附錄1 第十一條 監(jiān)測(cè)方法有： 1，空氣浮游菌監(jiān)測(cè) 沉降菌法-被動(dòng)法 定量空氣浮游菌采樣法-主動(dòng)法 2，環(huán)境表面監(jiān)測(cè) 表面取樣法（如棉簽擦拭法和接觸碟法） 3，人員監(jiān)測(cè) 表面取樣法（接觸碟法）,9,2，

4、潔凈區(qū)的驗(yàn)證和監(jiān)測(cè),1，空氣浮游菌監(jiān)測(cè) 沉降菌法-被動(dòng)法 沉降碟在空氣中的暴露時(shí)間4小時(shí) 監(jiān)控整個(gè)灌裝過程 只能給出定性和半定量的數(shù)據(jù) 應(yīng)結(jié)合空氣浮游菌的數(shù)據(jù)，對(duì)沉降碟的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià) 定量空氣浮游菌采樣法-主動(dòng)法 撞擊式，離心式和膜過濾（明膠）取樣儀 應(yīng)取一定體積的空氣（取樣體積應(yīng)有代表性） 儀器應(yīng)經(jīng)過校驗(yàn),10,2，潔凈區(qū)的驗(yàn)證和監(jiān)測(cè),2，環(huán)境表面監(jiān)測(cè)：表面取樣法 應(yīng)對(duì)接觸產(chǎn)品表面、設(shè)備、地面、墻面等定期監(jiān)測(cè) 接觸蝶法：適用于平整表面 取樣面積25cm2 培養(yǎng)基略有凸起，高于碟子邊緣，便于取樣 培養(yǎng)基中應(yīng)含有中和劑/保護(hù)劑 棉簽擦拭法：適用于不規(guī)則表面 取樣面積25cm2 定性或定量 表面樣

5、應(yīng)在無菌操作結(jié)束時(shí)取 以最大限度地降低無菌制造過程中關(guān)鍵表面污染的風(fēng)險(xiǎn),11,2，潔凈區(qū)的驗(yàn)證和監(jiān)測(cè),2，潔凈區(qū)的驗(yàn)證和監(jiān)測(cè),3，人員監(jiān)測(cè) 表面取樣法（接觸碟法），取樣時(shí)間一般為： 工作結(jié)束，離開潔凈區(qū)前取樣 處理異常情況后（取樣后重新更衣或更換手套） 生產(chǎn)過程中隨時(shí)監(jiān)測(cè) 特別注意： 不得在剛消毒過后取樣,12,2，潔凈區(qū)驗(yàn)證和監(jiān)測(cè),每個(gè)手套(5只手指),胸口處,衣帽結(jié)合處,帽兜額頭處,靴子與工作褲接口處,前臂,13,無菌區(qū)人員更衣確認(rèn)和監(jiān)測(cè),其它事項(xiàng) 每個(gè)受訓(xùn)者必須經(jīng)過3次更衣試驗(yàn)確認(rèn)合格后才能進(jìn)入無菌操作區(qū)。 資格確認(rèn)合格的操作員工每年需重復(fù)一次更衣試驗(yàn)。 當(dāng)有已確認(rèn)合格的人員有違反更衣程

6、序趨向時(shí)，須重復(fù)l3次更衣試驗(yàn)。 連續(xù)3次監(jiān)測(cè)不合格人員，取消相關(guān)資質(zhì)，需重新培訓(xùn)和進(jìn)行更衣驗(yàn)證。 在連續(xù)10次監(jiān)測(cè)中，如有4次不合格的人員，取消相關(guān)資質(zhì)，需重新培訓(xùn)和進(jìn)行更衣驗(yàn)證。,無菌區(qū)人員監(jiān)測(cè)合格標(biāo)準(zhǔn),14,2，潔凈區(qū)驗(yàn)證和監(jiān)測(cè),3，環(huán)境監(jiān)測(cè)方案,潔凈區(qū)應(yīng)制定系統(tǒng)的環(huán)境監(jiān)測(cè)方案，包括動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和靜態(tài)監(jiān)測(cè)。 關(guān)鍵項(xiàng)目：懸浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物。 取樣計(jì)劃的影響因素：產(chǎn)品類型、生產(chǎn)過程、設(shè)施/工藝設(shè)計(jì)、生產(chǎn)密度、人為干擾、環(huán)境監(jiān)測(cè)歷史數(shù)據(jù)等。 取樣點(diǎn)的選擇主要取決于潔凈室的設(shè)計(jì)和生產(chǎn)要求。 環(huán)境監(jiān)測(cè)計(jì)劃案例。 環(huán)境監(jiān)測(cè)動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)。,15,環(huán)境監(jiān)測(cè)方案,環(huán)境監(jiān)控整體要求,潔 凈 區(qū) 監(jiān)

7、 測(cè),年度潔凈級(jí)別確認(rèn),日常環(huán)境監(jiān)測(cè),16,參考：USP341116 從表中可以看出，美國(guó)藥典中沒有明確B級(jí)，但有100級(jí)、1 萬級(jí)、10萬級(jí)甚至更低級(jí)別，劃分比較靈活，按需要而定。,美國(guó)藥典微生物監(jiān)測(cè)頻率,17,環(huán)境監(jiān)測(cè)方案,環(huán)境監(jiān)測(cè)案例,18,環(huán)境監(jiān)測(cè)案例,19,環(huán)境監(jiān)測(cè)案例,20,潔凈區(qū)監(jiān)測(cè)的位置,取樣位置選擇時(shí)考慮因素： 哪些部位的微生物污染最可能對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量造成不良影響？ 在生產(chǎn)過程中，什么地點(diǎn)最容易長(zhǎng)菌？ 哪些地方是清潔、消毒或滅菌時(shí)最難覆蓋/接觸或最難奏效的部位？ 什么活動(dòng)會(huì)導(dǎo)致污染的擴(kuò)散？ 在某一部位的取樣操作，足以導(dǎo)致測(cè)試數(shù)據(jù)的差錯(cuò)或污染產(chǎn)品？取樣只應(yīng)在生產(chǎn)結(jié)尾換班時(shí)進(jìn)行嗎？,

8、21,潔凈區(qū)監(jiān)測(cè)的位置,應(yīng)符合“GB16292-2010” “GB16294-2010”的要求 基于風(fēng)險(xiǎn)的設(shè)計(jì) 監(jiān)測(cè)點(diǎn)設(shè)置在潛在風(fēng)險(xiǎn)最大的位置 藥品 容器 連接處 人流和物流經(jīng)過的地方 監(jiān)測(cè)點(diǎn)靠近“工作高度”,22,注：GB1629216294，分別是潔凈區(qū)懸浮微粒子、浮游菌、沉降菌的監(jiān)測(cè)。,潔凈區(qū)監(jiān)測(cè)的位置,23,示例,潔凈區(qū)監(jiān)測(cè)的位置,示例：無菌灌裝線 取樣點(diǎn)應(yīng)在產(chǎn)品或組件暴露的區(qū)域周圍取樣，如： 在灌裝針頭處 將產(chǎn)品裝載入凍干腔室處 膠塞供料桶 無菌部件進(jìn)行連接操作的部位 操作人員頻繁活動(dòng)處（不影響生產(chǎn)過程） 注意：靠近產(chǎn)品，但不接觸產(chǎn)品的位置,24,粒子在線監(jiān)測(cè)布置圖例,25,1,2,

9、3,傳感器低于機(jī)器，采樣管伸入灌裝操作區(qū)內(nèi),粒子在線監(jiān)測(cè)布置圖例,灌裝后凍干前監(jiān)測(cè)點(diǎn)位置：藥瓶是半封閉狀態(tài)（敞口）保證灌裝后，凍干前的環(huán)境區(qū)域是受控的。正確的取樣點(diǎn)位置：靠近傳送帶。,26,浮游菌、沉降菌取樣點(diǎn),沉降菌、浮游菌：監(jiān)控點(diǎn)位置，高度一般為離地80cm左右，或操作臺(tái)面。 浮游菌、沉降菌監(jiān)控點(diǎn)的設(shè)置根據(jù)生產(chǎn)工藝及污染風(fēng)險(xiǎn)綜合考慮。,27,潔凈區(qū)表面微生物取樣點(diǎn),C級(jí)區(qū)取樣點(diǎn)：一般為地面、墻面及操作人員十指手套。對(duì)C級(jí)下的局部A級(jí)區(qū)取樣宜在生產(chǎn)結(jié)束后進(jìn)行，避免造成污染。,地面取樣,墻面取樣,灌裝機(jī)（A級(jí)）,產(chǎn)品轉(zhuǎn)移（A級(jí)）,28,潔凈區(qū)表面微生物取樣點(diǎn),B級(jí)區(qū)接觸碟取樣位置應(yīng)能及時(shí)發(fā)現(xiàn)潛

10、在污染風(fēng)險(xiǎn)，在受污染可能性較高的位置布點(diǎn)。,無菌分裝設(shè)備門,進(jìn)出B級(jí)區(qū)門把手,儀器、設(shè)備操作鍵、觸摸屏等,傳遞窗門把手,29,-30-,文件記錄中應(yīng)包括：,監(jiān)測(cè)時(shí)間和日期 測(cè)試方法的參考依據(jù) 測(cè)試點(diǎn)的活動(dòng)情況 設(shè)備標(biāo)識(shí) 位置 衛(wèi)生級(jí)別 標(biāo)有取樣點(diǎn)的區(qū)域圖,取樣點(diǎn) 測(cè)試結(jié)果 評(píng)估人員 結(jié)果讀取日期 警戒/糾偏限度 培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間,文件和記錄,30,-31-,文件記錄中應(yīng)包括:,培養(yǎng)基有關(guān)信息 污染菌鑒別結(jié)果 復(fù)核人 數(shù)據(jù)報(bào)告 歷史數(shù)據(jù)回顧 變更控制系統(tǒng) 設(shè)備校驗(yàn)日期,各限度的確定原理與具體分析 調(diào)查/糾偏措施的文件記錄,文件和記錄,31,4，環(huán)境監(jiān)測(cè)常用儀器/設(shè)備/培養(yǎng)基,32,沉降菌/浮游

11、菌 直徑：90mm,浮游菌監(jiān)測(cè)AirIDEAL 3P 100升/分,懸浮粒子監(jiān)測(cè) PMSLasair 28.3升/分,表面微生物監(jiān)測(cè) 直徑：55mm,2500 模塊化控制器,Modbus TCP/IP,真空泵,Airnet 510,4-20MA信號(hào),HUB,6180XIO 歐陸顯示器,工作站,粒子在線監(jiān)測(cè)儀,33,可以增加浮游菌采樣,空氣懸浮粒子連續(xù)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的要求： 歐盟GMP附錄1、中國(guó)GMP（2010）附錄1 在確認(rèn)級(jí)別時(shí)，應(yīng)使用采樣管較短的便攜式塵埃粒子計(jì)數(shù)器，避免5.0m懸浮粒子在遠(yuǎn)程采樣系統(tǒng)的長(zhǎng)采樣管中沉降 。在單向流系統(tǒng)中，應(yīng)當(dāng)采用等動(dòng)力學(xué)取樣頭。 歐盟GMP附錄1 使用遠(yuǎn)程采樣系

12、統(tǒng)時(shí)，必須根據(jù)粒子在管路中的損失來考慮管長(zhǎng)和管子的彎曲半徑 PIC/S PI 032-2 - 強(qiáng)調(diào)5.0m懸浮粒子在遠(yuǎn)程采樣系統(tǒng)的長(zhǎng)采樣管中沉降效應(yīng),粒子在線監(jiān)測(cè)注意點(diǎn),34,適用于圓弧表面取樣,外蓋帶鎖扣,35,表面帶有鎖扣，可以避免因取樣結(jié)束后平皿意外跌落等麻煩,具有一定 的韌性，可以進(jìn)行適當(dāng)彎曲，適合不規(guī)則表面或圓弧取樣,預(yù)制培養(yǎng)基,特殊預(yù)制平板,使用前,擦拭后,36,預(yù)制培養(yǎng)基,無菌擦拭棒,SCD培養(yǎng)基,頸部,保護(hù)套,拭子,使用方法： 1、拔除下端保護(hù)套，取出拭子用 無菌液體潤(rùn)濕 2、擦拭取樣表面（一般為25cm2） 3、取樣結(jié)束后將拭子放回保護(hù)套 4、將擦拭棒頸部掰斷，上端SCD 培

13、養(yǎng)基流入保護(hù)套中并浸沒拭子 5、將整個(gè)擦拭棒放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),SCD培養(yǎng)基,無菌試驗(yàn)預(yù)制培養(yǎng)基 一般TGC配制后會(huì)有氧化層，中國(guó)藥典規(guī)定在無菌試驗(yàn)前其氧化層高度不得高于培養(yǎng)基高度的1/5，培養(yǎng)結(jié)束后其氧化層高度不得高于培養(yǎng)基高度的1/3。 圖中TGC培養(yǎng)基瓶中充入保護(hù)性氣體（抗氧化），有利于試驗(yàn)結(jié)果的判斷。,37,預(yù)制培養(yǎng)基,預(yù)制培養(yǎng)平板包裝,無菌區(qū)使用預(yù)制平板：一般采用三層包裝形式：,55mm接觸平板,90mm預(yù)制平板,38,預(yù)制平板進(jìn)入潔凈區(qū),預(yù)制平板進(jìn)入無菌區(qū)，須避免對(duì)監(jiān)控區(qū)域的污染。,去除最外層包裝,放入傳遞窗,39,預(yù)制平板脫包裝,經(jīng)傳遞窗進(jìn)入潔凈區(qū)的預(yù)制培養(yǎng)平板繼續(xù)脫去外面兩層包裝就

14、可以使用。,脫出第二層包裝,脫出第三層包裝,脫包裝后單個(gè)平板,40,自制平板傳輸,包裝形式 不銹鋼密保容器 外套密封塑料袋 傳輸 消毒脫除外袋 容器消毒后輸入,41,預(yù)制平板使用示意圖,接觸碟表面取樣示意圖：,1，取樣點(diǎn)采樣,2，取樣位置消毒,3，用無塵布清潔,4，標(biāo)明取樣點(diǎn)編號(hào),5，平板入無菌保管袋,6，保管袋密封待培養(yǎng),42,預(yù)制平板使用示意圖,浮游菌監(jiān)測(cè)示意圖：,使用前噴酒精進(jìn)行消毒，開啟至少5分鐘,消毒完成，放入90mm平板,裝上無菌采樣托盤,設(shè)置采樣量，啟動(dòng)采樣,采樣完成取出平板（有明顯凹坑）蓋上培養(yǎng)皿蓋，裝入無菌保管袋待培養(yǎng),未經(jīng)采樣空白平板,43,趨勢(shì)分析和質(zhì)量回顧 1，警戒限和

15、糾偏限的設(shè)定 2，趨勢(shì)分析 3，質(zhì)量回顧,44,1，警戒限和糾偏限的設(shè)定,應(yīng)設(shè)定在法定標(biāo)準(zhǔn)值以下。 警戒限 根據(jù)驗(yàn)證數(shù)據(jù) 根據(jù)歷史監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)并進(jìn)行趨勢(shì)分析后制定 糾偏限 參考GMP和藥典等法規(guī)要求 根據(jù)歷史監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)并進(jìn)行趨勢(shì)分析后制定,45,警戒限和糾偏限的設(shè)定,設(shè)定的基準(zhǔn)值不只是用來判定合格與否，而是用于過程控制的設(shè)定值。 若監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示超過基準(zhǔn)值，根據(jù)各個(gè)基準(zhǔn)值的定義采取相應(yīng)的處理措施。 關(guān)鍵項(xiàng)目應(yīng)年度趨勢(shì)分析，根據(jù)趨勢(shì)分析的結(jié)果制定警戒限和糾偏限。 GMP 第一百零一條應(yīng)當(dāng)按照操作規(guī)程對(duì)純化水、注射用水管道進(jìn)行清洗消毒，并有相關(guān)記錄。發(fā)現(xiàn)制藥用水微生物污染達(dá)到警戒限度、糾偏限度時(shí)應(yīng)當(dāng)按照操

16、作規(guī)程處理。,46,47,法定標(biāo)準(zhǔn),運(yùn)行設(shè)定標(biāo)準(zhǔn),運(yùn)行通常值管理,設(shè)計(jì)目標(biāo),警戒限和糾偏限的設(shè)定,設(shè)定示例,48,設(shè)定示例,49,50,測(cè)試報(bào)告應(yīng)包含以下內(nèi)容： 測(cè)試者的名稱和地址，測(cè)試日期； 測(cè)試依據(jù)； 被測(cè)潔凈室（區(qū)）的平面位置（必要時(shí)標(biāo)注相鄰區(qū)域的平面位置） 有關(guān)測(cè)試儀器及其測(cè)試方法的描述：包括測(cè)試環(huán)境條件，采樣點(diǎn)數(shù)目以及布置圖，測(cè)試次數(shù)，或可能存在的測(cè)試方法的變更，測(cè)試儀器的檢定證書等；若為動(dòng)態(tài)測(cè)試，則還應(yīng)記錄現(xiàn)場(chǎng)操作人員數(shù)量及位置，現(xiàn)場(chǎng)設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)量及位置等； 測(cè)試結(jié)果，包括所有統(tǒng)計(jì)計(jì)算資料；,趨勢(shì)分析和質(zhì)量回顧 1，警戒限和糾偏限的設(shè)定 2，趨勢(shì)分析 3，質(zhì)量回顧,51,1，警戒限和糾偏限的設(shè)定,應(yīng)設(shè)定在法定標(biāo)準(zhǔn)值以下。 警戒限 根據(jù)驗(yàn)證數(shù)據(jù) 根據(jù)歷史監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)并進(jìn)行趨勢(shì)分析后制定 糾偏限 參考GMP和藥典等法規(guī)要求 根據(jù)歷史監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)并進(jìn)行趨勢(shì)分析后制定,52,警戒限和糾偏限的設(shè)定,設(shè)定的基準(zhǔn)值不只是用來判定合格與否，而是用于過程控制的設(shè)定值。 若監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示超過基準(zhǔn)值，根據(jù)各個(gè)基準(zhǔn)值的定義采取相應(yīng)的處理措施。 關(guān)鍵項(xiàng)目應(yīng)年度趨勢(shì)分析，根據(jù)趨勢(shì)分析的結(jié)果制定警戒限和糾偏限。 GMP 第一百零一條應(yīng)當(dāng)按照操作規(guī)程對(duì)純化水、注射用水管道進(jìn)行清洗消毒，并有相關(guān)記錄。發(fā)現(xiàn)制藥用水微生物污染達(dá)到警戒限度、糾偏限度時(shí)應(yīng)當(dāng)按照