1、透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，就叫做透析袋。 自Thomas Graham 1861年發(fā)明透析方法至今已有一百多年。透析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室最簡便最常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過程中，除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。 透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)，而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外，直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”，袋（膜）外的溶液

2、稱為“滲出液”或“透析液”。 透析的動力是擴(kuò)散壓，擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度，還正比于膜的面積和溫度，通常是4透析，升高溫度可加快透析速度。 透析膜可用動物膜和玻璃紙等，但用的最多的還是用纖維素制成的透析膜，目前常用的是美國Union Carbide （聯(lián)合碳化物公司）和美國光譜醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的各種尺寸的透析管，截留分子量MwCO（即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的最小分子量，縮寫為MwCO）通常為1 萬左右。 商品透析袋制成管狀，其扁平寬度為23 mm50 mm不等。為防干裂，出廠時都用10的甘油處理過，并含有極微量

3、的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì)，它們對蛋白質(zhì)和其它生物活性物質(zhì)有害，用前必須除去?？上扔?0乙醇煮沸1小時，再依次用50乙醇、0.01 mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/L EDTA溶液洗滌，最后用蒸餾水沖洗即可使用。實(shí)驗(yàn)證明，50乙醇處理對除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效。使用后的透析袋洗凈后可存于4蒸餾水中，若長時間不用，可加少量NaN2，以防長菌。洗凈涼干的透析袋彎折時易裂口，用時必須仔細(xì)檢查，不漏時方可重復(fù)使用。 新透析袋如不作如上的特殊處理，則可用沸水煮五至十分鐘，再用蒸餾水洗凈，即可使用。使用時，一端用橡皮筋或線繩扎緊，也可以使用特制的透析袋夾夾緊，由另一端灌滿水，用

4、手指稍加壓，檢查不漏，方可裝入待透析液，通常要留三分之一至一半的空間，以防透析過程中，透析的小分子量較大時，袋外的水和緩沖液過量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破。含鹽量很高的蛋白質(zhì)溶液透析過夜時，體積增加50是正常的。為了加快透析速度，除多次更換透析液外，還可使用磁子攪拌。透析的容器要大一些，可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析，可在袋內(nèi)放一截兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。 檢查透析效果的方法是：用1 BaCl2檢查(NH4)2SO4，用1 AgNO3 檢查NaCl、KCl等。 為了提高透析效率，還可以使用各種透析裝置。使用者也可以自行設(shè)計(jì)與制作各種簡易的透析裝置。

5、美國生物醫(yī)學(xué)公司（Biomed Instruments Inc.）生產(chǎn)的各種型號的Zeineh 透析器，由于使用對流透析的原理，使透析速度和效率大大提高。 根據(jù)個人使用經(jīng)驗(yàn)，建議使用透析袋效果比較好，還有具體需要什么規(guī)格的要看你的目的蛋白量有多大，才能決定使用多大的截留分子量的透析袋，一般截留量越大價(jià)格也就會越高，還有就是透析袋寬度的選擇，要看你的實(shí)驗(yàn)一次需要透析多少量來決定。目前我的實(shí)驗(yàn)室使用的是上海生工的透析袋，寬度70mm 普通型的！透析袋 的規(guī)格和使用方法 默認(rèn)分類 2009-12-16 12:11:02 閱讀931 評論0 字號：大中小 直徑mm 壓平寬度（半周長）mm 截留分子量D

6、a 22 34 350022 347000610 1400016251400022 341400028 44 140003555 1400049 77 14000透析袋：技術(shù)參數(shù)： PH 穩(wěn)定范圍:5-9 污染物水平： 硫化物0.3， 重金屬50ppm 化學(xué)兼容性：與很多鹽兼容，比如CaCl2,(NH4)2SO4，還可與分子生物學(xué)及酶學(xué)中常用的水溶劑、有機(jī)溶劑兼容，如異丙醇、乙醇和丙酮。 溫度抵抗性：可煮沸，可高壓滅菌 蛋白吸附：每克透析袋吸附蛋白量小于1ng使用前處理：1、將透析袋剪成適當(dāng)長度（1020cm）的小段2、在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和1mmol/L EDTA（PH 8.0）

7、中將透析袋煮沸10分鐘3、用蒸餾水徹底清洗透析袋4、放在1mmol/L EDTA（PH 8.0）中將透析袋煮沸10分鐘5、冷卻后，存放于4度，必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時起取用透析袋是必須帶手套的。6、用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出，將之清洗干凈。儲存條件：透析袋可存放于1029度；每次使用后將余下的膜放回袋子并密封好，以防干裂透析即用半透膜（透析袋）將大分子蛋白質(zhì)分離出來。在生物大分子制備過程中除去鹽、少量有機(jī)溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品，透析法最簡便。技術(shù)指標(biāo)：MWCO（截留分子量），單位：Diatoms 。透析時，小于MWCO的分子在透析膜二邊溶液濃度差產(chǎn)生的擴(kuò)散壓作用下滲過透

8、析膜，其速度與濃度梯度、膜面積及溫度成正比。欲快速透析可采用直徑較小的透析袋以增加膜面積。常用溫度：4，升溫、更換袋外透析液或用磁力攪拌器，均能提高透析速度。使 用 須 知1某些化學(xué)物質(zhì)會破壞透析袋微孔且不可逆轉(zhuǎn)。計(jì)有：烴、鹵化烴、醇、酮、酯、胺、丙酮、甲基乙基酮、二氧雜環(huán)乙烷、環(huán)已烷等。酸（甲酸、乙酸、稀強(qiáng)酸如5%HCI），10%苯酚，30%雙氧水。甲醇、乙醇：濃度小于5%時，透析功能在，而MWCO變化。2蛋白質(zhì)吸附量，小于1ug/克，（以透析袋干重計(jì)）。正常使用PH值5-9（可重復(fù)使用）。極限使用PH值2-12（一次性使用）。3前處理：煮沸5分鐘后用蒸餾水60洗沖2分鐘，置4蒸餾水中待用。長期保存液：0。05%-0。1%疊氮鈉，1mMEDTA或50%甘油，溫度（4），使用前以蒸餾水洗凈。4即用型透析袋毋須前處理，使用前用蒸餾水洗凈即可。5透析袋裝液時應(yīng)留1/3-1/2空間，以防透析過程中，袋外的水和緩沖液過量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破（含鹽量高的蛋白質(zhì)溶液透析過夜時，體積增加50%系正常情況）。6使用時須戴手套。7透析效果檢查用 1%氯化鋇 檢查硫酸銨、硫酸鈉1%硝酸銀 檢查氯化鈉、氯化鉀透析袋的物理抗力：透析袋由再生纖維素構(gòu)成，可以煮沸或消毒。一旦已呈濕狀即