1、生物梅里埃真菌培養(yǎng)、鑒定及藥敏全面解決方案,生物梅里埃華東區(qū)技術(shù)支持 李峰,深部真菌感染,深部真菌感染是一種重癥感染，死亡率為40-90% 真菌病的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，尤其對(duì)重癥監(jiān)護(hù)病房和免疫缺陷患者、以及癌癥患者， 8%的院內(nèi)感染由真菌引起 白色假絲酵母、熱帶假絲酵母、光滑假絲酵母、隱球菌等是最常見(jiàn)的感染病原菌 真菌感染的早期診斷、盡早開(kāi)始治療，是挽救患者生命的最重要的手段,真菌培養(yǎng)及鑒定藥敏的全面解決方案 最快可實(shí)現(xiàn)48 小時(shí)內(nèi)從接種到藥敏結(jié)果報(bào)告,直接鏡檢,分離培養(yǎng)+鑒定 ChromID Candida , 37c，24-48小時(shí),粉色菌落,白色菌落,鑒定,Vitek 2 YST 約15小

2、時(shí),API 20C AUX 30C, 24-48小時(shí),API Candida 37C 24-48小時(shí),藥敏,ATB FUNGUS 3 35C 24-48小時(shí),Vitek YBC 30C 24-48小時(shí),Vitek 2 AST-YS01 約14-22小時(shí),ChromID Candida,酵母菌產(chǎn)色鑒定培養(yǎng)基,此培養(yǎng)基含有： 提供酵母菌生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的抗菌物質(zhì) 用于檢測(cè)標(biāo)本中特定真菌的特異性酶的產(chǎn)色底物,ChromID Candida 快速酵母菌鑒定,ChromID Candida 快速酵母菌鑒定,與傳統(tǒng)培養(yǎng)基相比： 更易監(jiān)測(cè)到標(biāo)本中感染相關(guān)菌種 對(duì)白色假絲酵母直接鑒定，無(wú)需再次確認(rèn)

3、 對(duì)熱帶假絲酵母、葡萄牙假絲酵母及乳酒假絲酵母做初步鑒定 比傳統(tǒng)培養(yǎng)基更快得到鑒定結(jié)果,白色假絲酵母,白色假絲酵母被氨基己糖苷酶產(chǎn)色底物特異水解，顯現(xiàn)蘭色,熱帶/葡萄牙/乳酒假絲酵母,配方中另一種底物水解，初步區(qū)分某些特定酵母菌種，顯現(xiàn)粉色,其他酵母菌,其他酵母菌呈白色,ChromID Candida對(duì)手工及自動(dòng)鑒定系統(tǒng)均無(wú)影響,與傳統(tǒng)沙保弱培養(yǎng)基(SGC)相比，ChromID Candida 對(duì)API 20C、ID 32C、VITEK YBC、VITEK 2 ID-YST的鑒定結(jié)果無(wú)影響。,Poster， RICAI，2003,注:1.準(zhǔn)確鑒定; 2.低水平鑒定; 3.未做出鑒定; 4.不正

4、確鑒定,ChromID Candida對(duì)ATB FUNGUS3 藥敏測(cè)定結(jié)果無(wú)影響,無(wú)論肉眼判讀與機(jī)器判讀，在+/-一個(gè)滴度范圍內(nèi)，結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)MIC值100%一致，故Candida 對(duì)藥敏結(jié)果判讀無(wú)影響。,Poster， RICAI，2003,肉眼判讀結(jié)果,機(jī)器自動(dòng)判讀結(jié)果,菌 株 數(shù),滴度差異范圍,滴度差異范圍,真菌藥敏 簡(jiǎn)便如 ATB FUNGUS 3 Ref 14204,真菌鑒定及藥敏的意義,近年，真菌感染的顯著增加與某些治療習(xí)慣及疾病密切相關(guān)，包括: 更多地使用免疫抑制性藥物 更頻繁地應(yīng)用廣譜抗菌藥物 更普遍地使用靜脈留置設(shè)備 慢性免疫抑制性病毒感染的出現(xiàn)，比如AIDS 這些因素使從未

5、出現(xiàn)過(guò)的某些機(jī)會(huì)性感染發(fā)生，導(dǎo)致了更高的感染率，并與高致病率與病死率相關(guān)。 同時(shí)，抗真菌藥物的耐藥率也顯著上升，使治療選擇更為復(fù)雜。 由于深部真菌感染的有效治療選擇有限，使得利用真菌耐藥監(jiān)測(cè)來(lái)觀察耐藥發(fā)展趨勢(shì)及警示是否要拓展抗真菌藥物譜顯得尤為重要,多組織系統(tǒng)均存在真菌源性感染,Source: E. Musial, et al, Clinical Microbiology Reviews, Oct 1988, Vol 1 No. 4, p. 349-346,真菌檢測(cè)的適用對(duì)象,最需要實(shí)施真菌檢測(cè)的, 主要是免疫力下降的患者： 腫瘤患者 (腫瘤醫(yī)院或腫瘤科、血液科) 艾滋病患者 (關(guān)愛(ài)醫(yī)院) 老

6、年患者 (高干病區(qū)) 器官移植患者 長(zhǎng)時(shí)間大劑量注射抗菌藥物的患者（ICU、感染科、呼吸科、術(shù)后感染治療） 其他需要開(kāi)展真菌檢測(cè)的單位/科室 皮膚科/皮防所/性防所 等 口腔科 泌尿科 婦科,快速抗真菌藥敏結(jié)果提供了更確切的信息，對(duì)治療方案起決定性作用，并有助于臨床真菌感染的管理 有利于節(jié)省患者醫(yī)療費(fèi)用 提升醫(yī)院護(hù)理水平，加速病床周轉(zhuǎn)率,抗真菌敏感性試驗(yàn)的必要性,ATB FUNGUS 3,標(biāo)準(zhǔn): 遵循EUCAST 和 CLSI標(biāo)準(zhǔn) 判讀方便: 可肉眼判讀，也可ATB自動(dòng)判讀 全面: 涵蓋抗真菌感染治療常用藥物,ATB FUNGUS 3與ATB FUNGUS 2的區(qū)別,伏立康唑: 新增抗真菌藥物

7、，含 8 個(gè) MIC濃度 5-氟胞嘧啶: 減少了 MIC值 保留折點(diǎn)濃度，可報(bào) S/I/R 結(jié)果 氟康唑: 保留 8 個(gè) MIC濃度，減少 0.25mg/l 和 0.5mg/l 兩性霉素 B and 伊曲康唑: 未做改動(dòng)，含 6 個(gè) MIC濃度,ATB FUNGUS 3 試條的接種,32 X 135 l,API 0.85%氯化鈉培養(yǎng)基 API 懸浮液培養(yǎng)基 2 McF,24-48 小時(shí) : 假絲酵母菌屬 48小時(shí) : 新型隱球菌 35 +/- 2C,20l,ATB F2 培養(yǎng)基,如何判讀 ATB FUNGUS 3,與對(duì)照孔相比，觀察每個(gè)孔的生長(zhǎng)情況 = 給每孔打分 黑色背景下,確認(rèn)得分,在測(cè)試

8、孔周邊的生長(zhǎng)跡象應(yīng)判為 0 或 1 但 對(duì)兩性霉素B 應(yīng)判為 1,結(jié)果,自動(dòng)判讀: 結(jié)果以 MIC 和 S/I/R 顯示 ATB NEW軟件可自動(dòng)進(jìn)行判讀 英文軟件需升級(jí)至INT0 05 或 G0L0 05 expert 肉眼判讀: 請(qǐng)參考包裝說(shuō)明書(shū)中提供的折點(diǎn),判讀 兩性霉素B 的結(jié)果,兩性霉素 B: MIC值為得分為“0”的最小濃度,0.5 1 2,4 8 16,AMB,肉眼判讀,氟康唑, 伊曲康唑, 伏立康唑 : MIC值為得分為“2, 1 或 0”的最小濃度,1 2 4 8,32 64 128,FCA,判讀 唑類(lèi) 結(jié)果,肉眼判讀,結(jié)果只有 S/I/R,5FC,16,4,判讀 5-氟胞嘧

9、啶 結(jié)果,肉眼判讀,對(duì) 假絲酵母菌屬 的結(jié)果解釋,CLSI 折點(diǎn):,目前沒(méi)有官方推薦，文獻(xiàn)提供如下信息,對(duì) 新型隱球菌 的結(jié)果解釋,判讀難點(diǎn),拖尾生長(zhǎng) 在唑類(lèi)藥物孔中的微弱生長(zhǎng) (得分 = 1 或 2) 導(dǎo)致對(duì) MIC值高估 可能被誤判為耐藥,Control,例如: 在如下所有氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑 孔中都有拖尾生長(zhǎng),1 2 4 8 0.125 0.25 0.5 0.06 0.125 0.25 0.5,16 32 64 128 1 2 4 1 2 4 8,FCA ITR VRC,邊緣生長(zhǎng) AMB: 應(yīng)得分 1 FCA, ITR 或 VRC: 應(yīng)得分 0 或 1 例如: 孔 0.5 和 1

10、= 得分=1,0.5 1 2,4 8 16,AMB,判讀難點(diǎn),結(jié)果及時(shí): 24小時(shí)獲得 假絲酵母菌屬 結(jié)果 48小時(shí)獲得 新型隱球菌 結(jié)果 即用 + 易用 標(biāo)準(zhǔn)化微量稀釋法，復(fù)現(xiàn)性好 遵循 CLSI 和 EUCAST 推薦方法 能很好檢測(cè)獲得性耐藥 兩種判讀方法可靈活選擇：肉眼 或 機(jī)讀,ATB FUNGUS 3,真菌培養(yǎng)及鑒定藥敏的全面解決方案 最快可實(shí)現(xiàn)48 小時(shí)內(nèi)從接種到藥敏結(jié)果報(bào)告,直接鏡檢,分離培養(yǎng)+鑒定 Candida ID2, 37c，24-48小時(shí),粉色菌落,白色菌落,鑒定,Vitek 2 YST 約15小時(shí),API 20C AUX 30C, 24-48小時(shí),API Candi

11、da 37C 24-48小時(shí),藥敏,ATB FUNGUS 3 35C 24-48小時(shí),Vitek YBC 30C 24-48小時(shí),Vitek 2 AST-YS01 約14-22小時(shí),相關(guān)產(chǎn)品信息,標(biāo)本采集： 血培養(yǎng)： BacT/ALERT FA 中和抗生素需氧培養(yǎng)瓶 Ref.259791 COPAN拭子: 尿道用 Ref. 501CS01; 陰道用 Ref. 509CS01, 511CS01 培養(yǎng): 產(chǎn)色鑒定培養(yǎng)基: chromID Candida Ref. 43631, 43639 普通真菌培養(yǎng)：沙保弱慶大霉素氯霉素平板 Ref. 43171 鑒定: VITEK 2 YST Ref. 21343 VITKE YBC Ref. V1303 ATB ID 32C Ref. 32