1、第一節(jié)、典型藥物的分類與性質(zhì),第二節(jié)、鑒別試驗(yàn),第三節(jié)、特殊雜質(zhì)檢查,第四節(jié)、含量測定,內(nèi) 容,主要性質(zhì) 與苯甲酸和水楊酸類比較，布洛芬（苯乙酸衍生物）的酸性較弱，溶于中性乙醇后，可用氫氧化鈉直接滴定。 氯貝丁酯（苯氧基丙酸酯衍生物）遇光不穩(wěn)定，易水解，可用兩步滴定法測定含量。 布洛芬和氯貝丁酯均具有特征的紫外和紅外吸收光譜，可用于鑒別。,芳酸類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)比較 結(jié)構(gòu) 共同點(diǎn)：苯環(huán)、羧基 不同點(diǎn)：取代基不同（如酚羥基、芳伯氨基等） 物理性質(zhì) 大多數(shù)為固體，具有一定的熔點(diǎn)； 游離芳酸類藥物幾乎不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；芳酸堿金屬鹽及其它鹽易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑；,芳酸類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)比較

2、（續(xù)） 化學(xué)性質(zhì) 芳酸具游離羧基，呈酸性，其pKa在36之間，屬中等強(qiáng)度的酸或弱酸； -X、-NO2、-OH等吸電子取代基使酸性增強(qiáng)； -CH3、-NH2等斥電子取代基使酸性減弱； 鄰位取代間位、對位取代，尤其是鄰位取代酚羥基，形成分子內(nèi)氫健，酸性大為增強(qiáng)。,芳酸類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)比較（續(xù)） 化學(xué)性質(zhì)（續(xù)） 芳酸酯可水解 利用其水解得到酸和醇的性質(zhì)可進(jìn)行鑒別； 利用芳酸酯水解定量消耗氫氧化鈉的性質(zhì)，芳酸酯類藥物可用水解后剩余滴定法測定含量； 芳酸酯類藥物還應(yīng)檢查因水解而引入的特殊雜質(zhì)。,芳酸類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)比較（續(xù)） 化學(xué)性質(zhì)（續(xù)） 芳酸堿金屬鹽易溶于水，水解，溶液呈弱堿性，可用雙相滴定法或

3、非水堿量法測定其含量。 取代芳酸類藥物可利用其取代基的性質(zhì)進(jìn)行鑒別和含量測定。 具有酚羥基的藥物可用FeCl3反應(yīng)鑒別。 具芳伯氨基的藥物可用重氮化-偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測定含量。,三、氧化反應(yīng),四、水解反應(yīng),五、分解產(chǎn)物的反應(yīng) 苯甲酸鹽,含硫的藥物,第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查,一、阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查 合成工藝,檢查 溶液澄清度 未反應(yīng)的酚類、及其他副反應(yīng)生成的醋酸苯酯、水楊酸苯酯和乙酰水楊酸苯酯均不溶于碳酸鈉試液，而阿司匹林溶于碳酸鈉試液。,（水楊酸苯酯）,水楊酸的檢查 水楊酸雜質(zhì)來源： 原料殘存（生產(chǎn)過程中乙?；煌耆?水解產(chǎn)生（貯存過程中水解產(chǎn)生） 檢查原理： 水楊酸在弱酸性溶

4、液中與Fe3+反應(yīng)呈紫堇色 阿司匹林結(jié)構(gòu)中無游離酚羥基，無以上反應(yīng) 限量: 原料：0.1% 阿司匹林片：0.3% 阿司匹林腸溶片：1.5%,易碳化物的檢查 檢查易被硫酸碳化呈色的低分子有機(jī)物質(zhì)。 檢查方法：,取供試品0.5mg,置于含硫酸（95.5% g/g）5ml的比色管,振搖使溶解 靜置15min 觀察顏色,對照液 （比色用氯化鈷液0.25ml，比色用重鉻酸鉀液0.25ml，比色用硫酸銅0.40ml，加水成5ml）,與對照液比較 顏色不得更深,二、對氨基水楊酸鈉中間氨基酚的檢查 間氨基酚雜質(zhì)來源 原料殘存（間氨基酚為原料） 對氨基水楊酸在潮濕空氣中，露置日光或遇熱受潮時，易脫羧基，生成間氨

5、基酚。,雙相滴定法 原理： 利用對氨基水楊酸鈉不溶于乙醚，間氨基酚溶于乙醚的性質(zhì)，使二者分離； 在乙醚提取液中加適量水和指示劑（甲基橙），用鹽酸滴定； 控制鹽酸滴定液體積以控制間氨基酚限量； 生成的鹽酸鹽在乙醚中不溶，轉(zhuǎn)溶于水相中。,離子對HPLC法（內(nèi)標(biāo)法） 色譜條件 填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠 流動相： 磷酸二氫鈉液(0.05mol/L)-磷酸氫二鈉(0.05mol/L)-甲醇(含氫氧化四丁基銨1.9g)(425:425:150) 內(nèi)標(biāo)：磺胺溶液（5g/ml）,用流動相配制。 流速：1.5ml/min 檢測波長：254nm 進(jìn)樣量：20l,離子對試劑和其他添加劑選用規(guī)則 樣品中含有-CO

6、OH、-SO3H基團(tuán)時，選用的離子對試劑應(yīng)是帶正電荷的有機(jī)胺鹽，流動相通常使用甲醇-水； 除離子對試劑外，一般還需加入磷酸鹽緩沖液，以控制流動相的酸度。從而使這些酸性官能團(tuán)獲得解離； 樣品中含有-NH2、-NH-基團(tuán)時，選用的離子對試劑應(yīng)是烷基磺酸鹽或硫酸鹽； 樣品中同時含有-NH2、-COOH，-SO3H等不同性質(zhì)的基團(tuán)時，則規(guī)則、或選用的離子對試劑和添加劑均為合理。,三、二氟尼柳中有關(guān)物質(zhì)的檢查 二氟尼柳存在多條合成路線，產(chǎn)品中可能存在多種苯或聯(lián)苯類合成中間體及副產(chǎn)物，結(jié)構(gòu)和性質(zhì)相差較大； 使用單一的正相或反相色譜法難以檢出有關(guān)物質(zhì)； 中國藥典（2005）分別采用TLC（正相）和反相HPL

7、C，以自身對照法檢查有關(guān)物質(zhì)A和B。,有關(guān)物質(zhì)A的檢查（自身高低濃度對比法 ）：,吸取5l點(diǎn)樣,精密量取適量 加甲醇稀釋成濃度為50g/ml,配制本品的甲醇溶液 濃度約為10mg/ml,對照液,吸取5l點(diǎn)樣,同一硅膠CF254薄層板,以正己烷-二氧六環(huán)-冰醋酸（85:10:5）為展開劑，展開后，晾干，置于紫外燈(254nm)下檢查,判斷: 控制雜質(zhì)斑點(diǎn)個數(shù)，控制雜質(zhì)種類； 供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)不得深于對照溶液的主斑點(diǎn)（或熒光強(qiáng)度）。,優(yōu)點(diǎn)： 以供試品的稀溶液作為對照液，不需要雜質(zhì)對照品，簡單、價廉，還可配成幾種限量的對照溶液； 缺點(diǎn)： 不同物質(zhì)，不同Rf值比較，準(zhǔn)確度較差、直觀性較差。,雜質(zhì)

8、對照品法 判斷： 供試品中所含雜質(zhì)斑點(diǎn)不得超過相應(yīng)的雜質(zhì)對照斑點(diǎn)。 優(yōu)點(diǎn)： 同一物質(zhì)，同一Rf值比較，準(zhǔn)確度高、直觀性強(qiáng)。 缺點(diǎn)： 需要雜質(zhì)對照品。,供試品,對照品,有關(guān)物質(zhì)B的檢查 取有關(guān)物質(zhì)A項(xiàng)下的供試品與對照液，照HPLC法測定。 填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠 流動相：水-甲醇-乙腈-冰醋酸(55:23:30:2) 檢測波長：254nm 進(jìn)樣量：供試品和對照品各20l 判斷： 供試品溶液的色譜圖中的各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照品溶液的主峰面積。,四、甲芬那酸中特殊雜質(zhì)的檢查 合成工藝,（鄰氯苯甲酸）,+,（2,3-二甲苯胺）,（甲芬那酸）,檢查 中國藥典（2005）規(guī)定檢查“銅”和“有關(guān)

9、物質(zhì)”。 “銅”檢查法 采用原子吸收分光光度法測定，銅含量的限度：0.001%。 供試品：,加硫酸濕潤 熾灼至灰化完全,取本品1.0g 置于石英坩堝,加0.1mol/L硝酸溶液溶解，定量轉(zhuǎn)移至25ml容量瓶中，搖勻，即得,加0.1mol/L硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻即得,精密稱取硫酸銅0.393g 置于1000ml量瓶中,加0.1mol/L硝酸溶液溶解 并稀釋至刻度，搖勻,標(biāo)準(zhǔn)銅溶液：,精密稱取標(biāo)準(zhǔn)銅溶液1.0ml，置于25ml量瓶中,精密量取10ml置于100ml量瓶中，加0.1mol/L硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻即得,對照品溶液：,測定法： 324nm處測定吸光度，A供試品A對照品,檢測波長：

10、254nm 進(jìn)樣量：10l 判斷： 供試品中如有雜質(zhì)峰，單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照液主峰面積的1/5; 各雜質(zhì)峰面積的總和不得大于對照溶液主峰面積。,五、氯貝丁酯中特殊雜質(zhì)的檢查 合成工藝,縮合，水解,CH3COCH3,CHCl3,NaOH,（對氯苯酚）,（對氯苯氧異丁酸鈉）,酸化,HCl,酯化,CH3CH5OH,H2SO4,（對氯苯氧異丁酸）,對氯酚的檢查 對氯酚為起始原料，且氯貝丁酯可分解產(chǎn)生對氯酚，其毒性大。中國藥典（2005）采用氣相色譜法檢查對氯酚。 色譜柱：2m玻璃色譜柱； 固定液：甲基硅橡膠（SE-30）； 載氣：氮?dú)?柱溫：160 檢測器：氫火焰離子化檢測器 對照品溶液：0.0

11、025%對氯酚的三氯甲烷溶液,供試品溶液：,取本品10.0g，加氫氧化鈉試液20ml振搖提取,分取下層液，用水5ml振搖洗滌，留作揮發(fā)性物質(zhì)檢查,水洗液并入堿性提取液用三氯甲烷洗滌2次后 加稀鹽酸使成酸性,用三氯甲烷提取2次，每次5ml，合并提取液，并加三氯甲烷至10ml即得,供試品中對氯酚峰面積不得大于對照品中對氯酚峰面積,揮發(fā)性雜質(zhì)的檢查 中國藥典（2005）采用氣相色譜法檢查在合成過程中引入的脂類與其他揮發(fā)性物質(zhì)及殘留有機(jī)溶劑。 色譜條件：同對氯酚的檢查 供試品溶液： 預(yù)試溶液：,取對氯酚項(xiàng)下經(jīng)堿液洗滌后的本品適量，經(jīng)無水硫酸鈉干燥即得。,稱取供試品適量，用三氯甲烷溶解制成每ml約含10

12、mg的溶液，用于調(diào)節(jié)檢測器靈敏度。,供試品中各雜質(zhì)峰面積的和，不得大于總峰面積的千分之五,第三節(jié) 含量測定,一、酸堿滴定法 直接滴定 本類藥物中的游離羧基的酸性（pKa36），可用堿滴定液直接滴定。,（阿司匹林）,缺點(diǎn)：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定）、酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸）； 適用范圍：不能用于含水楊酸過高或制劑分析，只能用于合格原料藥的含量測定； 苯甲酸、丙磺舒、水楊酸、二氟尼柳、雙水楊酸脂和布洛芬等的含量可采用直接滴定法測定； 二氟尼柳：以甲醇-水為溶劑，酚紅為指示劑； 甲芬那酸：以無水中性乙醇為溶劑，以酚紅為指示劑。,兩步滴定法 阿司匹林片 片劑中加有少量酒石酸或枸櫞酸做穩(wěn)定劑，制

13、劑工藝過程可能產(chǎn)生水楊酸與醋酸，不能采用堿直接滴定法和水解后剩余滴定法，需采用兩步法。 第一步:中和,注： 消除了酸性雜質(zhì)的干擾，降低了酯鍵水解的干擾; 阿司匹林腸溶片和氯貝丁酯采用同法測定; 氯貝丁酯：消除供試品中共存的酸性雜質(zhì); 氫氧化鈉與阿司匹林反應(yīng)摩爾比為1:1；故氫氧化鈉的滴定度為： T=0.11/1180.16=18.02（mg/ml) 片劑含量測定結(jié)果的計算,三、雙相滴定法 芳酸堿金屬鹽（如苯甲酸鈉）易溶于水，呈堿性，可用酸滴定液滴定； 滴定過程中析出的游離苯甲酸微溶于水，具有一定的酸性，使溶液渾濁且形成緩沖體系，滴定終點(diǎn)pH突躍不明顯； 苯甲酸溶于有機(jī)溶劑，在水相中加入不相混溶

14、的有機(jī)溶劑，可將滴定過程中產(chǎn)生的苯甲酸不斷萃取出來，降低苯甲酸在水相的量，使終點(diǎn)易于判斷。,苯甲酸鈉 取本品1.5g，精密稱定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基指示液2滴，用鹽酸滴定液(0.5mo1/L)滴定，邊滴邊振搖，至水層顯橙紅色，分取水層，置具塞錐形瓶中，乙醚層用水5ml洗滌，洗液并入錐形瓶中,加乙醚20m1，繼續(xù)用鹽酸滴定液滴定，至水層顯持續(xù)的橙紅色。每1ml的鹽酸滴定液(0.5mol/L)相當(dāng)于72.06mg的C7H5NaO2。,注： 優(yōu)點(diǎn)：消除了反應(yīng)產(chǎn)物的干擾; 乙醚的作用：萃取反應(yīng)生成的苯甲酸，使水相中的中和反應(yīng)進(jìn)行到底; 滴定中要強(qiáng)力振搖。隨著滴定不斷進(jìn)行，苯甲

15、酸不斷被萃取入有機(jī)溶劑層，使滴定反應(yīng)完全，終點(diǎn)清晰。,四、紫外分光光度法 直接分光光度法 貝諾酯的取代苯結(jié)構(gòu)在乙醇溶液中，在240nm處有最大吸收，可用于含量測定。 離子交換-紫外分光光度法 氯貝丁酯在226nm處有最大吸收，但對-氯酚等亦有吸收，干擾測定。 氯貝丁酯不發(fā)生電離，而對-氯酚等可發(fā)生酸性解離，采用陰離子交換色譜分離后，再用紫外-可見分光光度法測定。,注： 水楊酸與三氯化鐵-尿素生成紫色配位化合物，保留于硅藻土色譜柱上; 用三氯甲烷洗脫時，高濃度的尿素使配位化合物移動較慢; 以冰醋酸的乙醚溶液洗脫時，紫色配合物解離，水楊酸游離出來，繼而被三氯甲烷洗脫。,五、高效液相色譜法 藥物制劑

16、中的雜質(zhì)、輔料及穩(wěn)定劑，常干擾主成分的含量測定。 中國藥典（2005）采用HPLC測定阿司匹林腸溶膠囊、栓劑，布洛芬緩釋膠囊、口服溶液、糖漿劑等的含量。 填充劑：十八烷基硅烷鍵硅膠 流動相：1%冰醋酸-甲醇（50:50） 測定波長：280nm,鑒別水楊酸及其鹽類，最常用的試液是（） A. 碘化鉀 B. 碘化汞鉀 C. 三氯化鐵 D. 硫酸亞鐵 E. 亞鐵氰化鉀,自測題,阿司匹林片片劑可采用的測定方法為（） A. 非水滴定法 B. 水解后剩余滴定法 C. 兩步滴定法 D. 柱色譜法 E. 雙相滴定法,兩步滴定法測定阿司匹林片的含量時，每1ml氫氧化鈉溶液（0.1mol/L）相當(dāng)于阿司匹林（分子量

17、=180.16）的量是（） 18.02mg 180.2mg 90.08mg 45.04mg 450.0mg,反應(yīng)摩爾比為1:1,T：滴定度，每1ml滴定液相當(dāng)于被測組分的mg數(shù) C：滴定液濃度，mol/L M：被測物的摩爾質(zhì)量，g/mol N：1mol樣品消耗滴定液的摩爾數(shù),采用雙相滴定測定法苯甲酸鈉的含量，其所用的溶劑體系為（） 水-乙醇 水-冰醋酸 C. 水-氯仿 D. 水-乙醚 E. 水-丙酮,雙相滴定法可適用的藥物為（） A. 阿司匹林 B. 對乙酰氨基酚 C. 水楊酸 D. 苯甲酸 E. 苯甲酸鈉,阿司匹林加碳酸鈉試液加熱后，再加稀硫酸酸化，此時產(chǎn)生的白色沉淀應(yīng)是（） 苯酚 乙酰水楊

18、酸 C. 水楊酸 D. 醋酸鈉 E. 醋酸苯酯,水楊酸與三氯化鐵試液生成紫堇色產(chǎn)物的反應(yīng)，要求溶液的pH值是（） pH10.0 pH2.0 C. pH78 D. pH46 E. pH2.00.1,兩步滴定法測定阿司匹林片或阿司匹林腸溶片時，第一步滴定反應(yīng)的作用是（） 測定阿司匹林含量 消除共存酸性物質(zhì)的干擾 使阿司匹林反應(yīng)完全 便于觀測終點(diǎn) 有利于第二步滴定,對氨基水楊酸鈉中的特殊雜質(zhì)是（） 水楊酸 間氨基酚 氨基酚 苯酚 苯胺,能用與FeC13試液反應(yīng)產(chǎn)生現(xiàn)象鑒別的藥物有（） 苯甲酸鈉 水楊酸 對乙酰氨基酚 氫化可的松 丙酸睪酮,采用雙相滴定法測定苯甲酸鈉含量時，加入乙醚的目的是（） 防止反應(yīng)產(chǎn)物的干擾 乙醚層在水上面，防止樣品被氧化 消除酸堿性雜質(zhì)的干擾 防止樣品水解 以上都不對,采用雙步滴定法測定阿司匹林制劑含量時，被測組分與NaOH的反應(yīng)摩爾比為（） A. 2:1 B. 1:2 C. 1:1 D. 3:1 E. 以上都不對,阿司匹林中含量