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1、光合色素的提取與分離,一、葉綠體中色素的提取 1.原理:葉綠體中的色素能溶于有機溶劑,乙醇可作為溶劑溶解并提取葉綠體中的色素。,2.選材:葉色濃綠的新鮮葉片,3.方法步驟:,(1)材料的處理:葉片烘干,粉碎后放入研缽中,加入少許二氧化硅:使研磨充分(充分破壞細胞膜和葉綠體膜),加入少許碳酸鈣:防止葉綠體中的色素被破壞,(中和細胞中的有機酸,酸性物質(zhì)會破壞葉綠素),加入2-3ml的乙醇,脂溶性色素,(2)研磨:迅速減少乙醇的揮發(fā) 充分徹底破壞細胞膜和葉綠體膜,提取較多 的色素,(3)過濾:收集濾液的試管口用棉塞塞緊防止濾液揮發(fā),二、葉綠體中色素的分離,1.原理:不同的色素在層析液中的溶解度不同,
2、因此隨著層析液在濾紙條上的擴散速度不同,溶解度大的擴散速度快,從而使色素分離。,2.方法步驟:,(1)制備濾紙條:一端剪去兩角使擴散起點一致,(2)點樣:細、直、勻使色素帶擴散后均勻、不重疊,(濾液細線重復(fù)畫34次,兩次之間需干燥后再畫):增加色素的量,使層析出的色素帶清晰),(3)層析(分離色素):將濾紙條斜靠著試管壁插入層析液 (濾液細線要高于層析液:防止層析液將濾液細線中的色 素溶解,影響實驗效果),(4)觀察:幾分鐘后,取出濾紙條等干燥后觀察色素帶,此種分離色素的方法:紙層析法,結(jié)果:可以觀察到色素的種類和顏色,問題討論:,1.如果選用了老葉或者嫩葉分離得到的色素帶會是什么情況? 2.如果研磨時沒有加二氧化硅或碳酸鈣會對實驗結(jié)果造成什么影響? 如果研磨時加入的乙醇太多分離得到的色素帶會如何? 3.如果過濾時使用了濾紙會對濾液有什么影響? 4.如果畫濾液細線的次數(shù)太少分離得到的色帶是什么情況? 5.如果濾液細線畫的太粗或不均勻或彎曲分離得到的色素帶是什么情況? 6.濾液細線沒到了層析液對實驗結(jié)果會造成什么影響? 7.從分
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