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文檔簡介

1、實(shí)驗(yàn):檢測組織中的糖類脂肪和蛋白質(zhì),一、還原糖的鑒定,實(shí)驗(yàn)原理,葡萄糖、果糖、麥芽糖的分子內(nèi)含有還原性基團(tuán)(游離醛基或游離酮基),因此叫還原糖。蔗糖則是非還原性糖,不具有還原性??扇苄赃€原糖與斐林試劑發(fā)生作用,可以生成磚紅色沉淀。斐林試劑實(shí)際是Cu2+的堿性溶液,能使具有游離醛基或游離酮基的糖氧化,Cu2+則被還原成磚紅色的Cu2O沉淀。,實(shí)驗(yàn)步驟,1)向試管中加入2毫升組織液 2)向試管中加入1毫升斐林試劑(現(xiàn)配現(xiàn)用) 3)將試管放入盛有50-65度的溫水的大燒杯中,加熱兩分鐘。 還原糖-斐林試劑-棕色-磚紅色,1 蘋果 組織 樣液,取2mL組織 樣液注入 試管,2注入試劑,向試管注入 1m

2、L剛配置 的斐林試劑,3 水浴加熱2min觀察,可溶性還原糖的鑒定,二、 脂肪的鑒定,脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色。蘇丹在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大,當(dāng)用蘇丹的酒精溶液處理含有脂肪的生物組織時(shí),酒精中的蘇丹進(jìn)入脂肪中,將脂肪染成橘黃色。,脂肪的鑒定方法一,1.向試管中注入組織液毫升 2、滴2-3蘇丹染液染色,觀察顏色變化,脂肪的鑒定方法二,1.制作花生子葉切片,滴加蘇丹染色3分鐘 2.吸取多余的染液,滴加50%的酒精洗去浮色,吸掉多余的酒精。 3.滴上蒸餾水,蓋上蓋玻片。 4.顯微鏡觀察 脂肪-蘇丹-橘黃色 脂肪-蘇丹-紅色,切片,2染色,削平面,去種皮,1制備生物組織實(shí)驗(yàn)材料,脂肪的

3、鑒定,3去浮色,在薄片上滴1-2滴體積分?jǐn)?shù)為50%酒精溶液,洗去浮色,滴2-3蘇丹染液染色3分鐘,4制作臨時(shí)裝片,5放在顯微鏡下觀察,先低倍鏡后高倍鏡,三、 蛋白質(zhì)的鑒定,蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,可以產(chǎn)生紫色反應(yīng)。具有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)。蛋白質(zhì)的肽鍵在堿性溶液中能與Cu2+絡(luò)合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比。,蛋白質(zhì)的鑒定,1.向試管中注入組織液毫升 2.向試管中注入雙縮脲試劑毫升,震蕩,混合均勻. 3.向試管中加入雙縮脲試劑B四滴. 4.觀察顏色變化. 蛋白質(zhì)雙縮脲試劑紫色.,蛋白質(zhì)的鑒定,1 制備蛋白質(zhì)稀釋液,取 0.5mL蛋白液滴入小燒杯加5mL水,攪拌均勻,2 注入蛋白稀釋液,取1支試管注入蛋白稀釋液2mL,3 注入試劑A,加入2mL雙縮脲試劑A,4注入試劑B,再加入3-4滴雙縮脲B,搖勻,5觀察顏色變化,蛋白質(zhì)的鑒定-雙縮脲試劑,雞蛋清溶液或豆?jié){,NaOH 溶液,滴加CuSO2 溶液, 每次滴加均需搖勻,結(jié)果顯示: 紫色,四、淀粉的鑒定,1.用試管取淀粉溶液毫升 2.滴加碘液兩滴,觀察顏色變化 3.淀粉碘液藍(lán)色 作業(yè):完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告,中小

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