1、 四川友誼醫(yī)院作業(yè)指導(dǎo)書常規(guī)石蠟包埋組織制片制備標(biāo)準(zhǔn)操作流程文件編號(hào)：SOP-BL-01-02版本：A/0SOP常規(guī)石蠟包埋組織制片制備標(biāo)準(zhǔn)操作流程 1)制備程序 1水洗。 2脫水。 3透明。 4浸蠟。 5包埋。 6切片。 2)注意事項(xiàng) 組織切片制備及其HE染色過(guò)程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為易燃、有毒物，必須專人管理，2m以內(nèi)不得有明火，局部環(huán)境應(yīng)有良好的通風(fēng)和消防設(shè)施。3)常規(guī)切片的手工操作 1水洗 用流水沖洗已經(jīng)固定的組織塊30min。 2脫水(常溫下) (1)乙醇甲醛(AF)液固定：60120min。 (2)80乙醇：60120min。 (3)95乙醇I：60120min。 (

2、4)95乙醇：60120min。 (5)無(wú)水乙醇I：3060min。 (6)無(wú)水乙醇：3060min。 (7)無(wú)水乙醇：3060min。 注意事項(xiàng)：未經(jīng)充分固定的組織不得進(jìn)入脫水程序；用于脫水的試劑容積應(yīng)為組織塊總體積的5l0倍以上；自低濃度乙醇向高濃度乙醇逐級(jí)移進(jìn)脫水；脫水試劑應(yīng)及時(shí)過(guò)濾、更換(500ml乙醇可用于500個(gè)組織塊脫水；加入硫酸銅的無(wú)水乙醇變藍(lán)時(shí)，提示需要更換)；較大組織塊的脫水時(shí)間長(zhǎng)于較小者，應(yīng)將兩者分開(kāi)進(jìn)行脫水；組織塊置于無(wú)水乙醇內(nèi)的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)(以免硬化)；丙酮脫水性能強(qiáng)，會(huì)使組織塊過(guò)縮、硬脆，不宜用以替代無(wú)水乙醇。3透明 (1)二甲苯I：20min。 (2)二甲苯：20

3、min。 (3)二甲苯：20min。 注意事項(xiàng)：二甲苯的容積應(yīng)為組織塊總體積的510倍以上；組織塊在二甲苯中透明的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)(以防組織硬、脆)，并依不同種類組織及其大小而異(組織塊呈現(xiàn)棕黃或暗紅色透明即可)；二甲苯應(yīng)及時(shí)過(guò)濾、更換；組織塊經(jīng)二甲苯適度處理后不顯透明時(shí)，常提示該組織的固定或脫水不充分，應(yīng)查找原因并妥善處理。 4浸蠟 (1)石蠟工(4550)：60min。 (2)石蠟(5658)：60min。 (3)石蠟(5658)：60min。 注意事項(xiàng)：熔化石蠟必須有專人負(fù)責(zé)，必須在熔蠟箱內(nèi)或水浴中(70)進(jìn)行，不得用明火加溫；熔蠟的容積應(yīng)為組織塊總體積的510倍以上；組織塊經(jīng)二甲苯適度透明

4、后方可轉(zhuǎn)入浸蠟過(guò)程，應(yīng)盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶人熔蠟中；浸蠟時(shí)間適宜，過(guò)短時(shí)浸蠟不充分(組織過(guò)軟)，過(guò)長(zhǎng)時(shí)組織硬脆；熔蠟應(yīng)及時(shí)過(guò)濾、更換。 5包埋 (1)先將熔化的石蠟傾人包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)過(guò)浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中，應(yīng)將組織塊平整地置放于包埋模具底面的中央處。包埋于同一蠟塊內(nèi)的多塊細(xì)小組織應(yīng)彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋(立埋)。 (2)將與組織塊相關(guān)的病理號(hào)小條置人包埋模具內(nèi)熔蠟的一側(cè)。 (3)待包埋模具內(nèi)的熔蠟表面凝固后，即將模具移人冷水中加速凝固。 (4)從包埋模具中取出凝固

5、的包埋蠟塊(簡(jiǎn)稱蠟塊)，用刀片去除組織塊周圍的過(guò)多石蠟(組織塊周圍保留l2mm石蠟為宜)。將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長(zhǎng)方形。 (5)將病理號(hào)小條牢固地烙貼在蠟塊一側(cè)(編號(hào)應(yīng)清晰可見(jiàn))。 (6)把修整好的蠟塊烙貼在支持器上，以備切片。 (7)使用包埋機(jī)的方法按有關(guān)廠商的說(shuō)明書操作。 (8)注意事項(xiàng)。 應(yīng)將組織塊嚴(yán)格分件包埋。包埋時(shí)一定要首先認(rèn)真核對(duì)組織塊的病理號(hào)(包括次級(jí)號(hào))、塊數(shù)和取材醫(yī)師對(duì)包埋面的要求，準(zhǔn)確地置入相應(yīng)的病理號(hào)小條。發(fā)生包埋差錯(cuò)時(shí)，必須立即與取材醫(yī)師和病理科當(dāng)班負(fù)責(zé)人取得聯(lián)系，及時(shí)處置。 必須嚴(yán)防各種異物污染，勿將無(wú)關(guān)組織如縫線、紙屑或其他異物(尤其是硬質(zhì)異物)埋人蠟塊內(nèi)。 包埋過(guò)程要操作迅速，以免組織塊尚未埋妥前熔蠟?zāi)獭?包埋用的熔蠟應(yīng)純凈，熔點(diǎn)適宜。浸蠟I用軟蠟(熔點(diǎn)為4550)，浸蠟、和包埋用蠟均用硬蠟(熔點(diǎn)為5658)。 包埋用熔蠟使用前應(yīng)先靜置沉淀、過(guò)濾。 熔蠟時(shí)不得使用明火，以防燃燒。包埋用熔蠟的溫度應(yīng)30。乙醇、二甲苯