1、DNA的粗提取和鑒定【教學目標】1、通過嘗試對植物或動物組織中的DNA進行粗提取，了解DNA的物理化學性質(zhì)。2、理解DNA粗提取與鑒定的原理【知識梳理】一、自主學習【學點1】基礎(chǔ)知識1、提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路：利用它們的_物理或化學性質(zhì)_不同進行分離。DNA的粗提取，就是利用 DNA 與 RNA 蛋白質(zhì) 脂質(zhì) 等在物理和化學性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分。 DNA粗提取的原理DNA的溶解性特點：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的 Nacl 中溶解度不同，利用這一特點，選擇適當?shù)柠}濃度就能使 DNA 充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達到分離目的；_DNA_不溶于

2、酒精而_某些蛋白質(zhì)_溶于酒精。DNA的耐受性特點：蛋白酶能水解 蛋白質(zhì)，但是對DNA 沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080oC的高溫，而DNA在80oC 以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解 細胞膜 ，但對DNA沒有影響。2、DNA的鑒定原理：在_沸水浴_條件下，DNA遇_二苯胺_呈現(xiàn)_藍_色。學點1學習情況檢測 1、DNA在下列濃度的NaCl溶液中，溶解度最低的是（ c ） A2mol/L B0.015mol/L C0.14mol/L D5mol/L2、在DNA鑒定過程中加入的試劑是（c ）A雙縮脲試劑 B斐林試劑 C二苯胺試劑 D甲基綠3、洗滌劑對DNA沒有影響，但能夠瓦解（ b ）A細胞壁 B

3、細胞膜 C細胞核 D細胞質(zhì)【學點2】實驗設(shè)計1、 實驗材料的選?。悍彩呛蠨NA 的生物材料都可以考慮，選用DNA含量相對高 的生物組織，成功的可能性更大。2、破碎細胞，獲取含DNA的濾液雞血細胞液中加入一定量蒸餾水_并用玻棒攪拌，過濾后收集濾液；洋蔥，加入一定的_和_，攪拌_，過濾后收集濾液。3、去除濾液中的雜質(zhì)方案一的原理： DNA在不同濃度_溶液中_不同: 當NaCl溶液的濃度為2 mol/L，過濾除去不溶的雜質(zhì)，再加蒸餾水調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度為0.14 mol/L，析出DNA，過濾去除_中的雜質(zhì),再用2 mol/L的NaCl溶液溶解DNA。方案二的原理： _分解蛋白質(zhì)，不分解_；方案三

4、的原理：_耐高溫_不耐高溫。4、DNA析出與鑒定加入與濾液_體積、冷卻的 ，靜置 ，出現(xiàn)_ 就是DNA。試管_支，編號甲乙各加等量5mL_溶液甲中放入少量白色絲狀物，使之溶解各加4mL_，混合均勻_5min觀察顏色變化學點2學習情況檢測1. 破譯基因組成的遺傳信息，首先要提取DNA，下列不適于作為DNA提取的實驗材料的是（ c ）A.雞血細胞 B.蛙的紅細胞 C.人的成熟紅細胞 D.菜花2、在“DNA粗提取與鑒定”的實驗中，將提取獲得的含DNA的粘稠物（還含有許多物質(zhì)）分別處理如下：第一， 放入0.14mol/L的NaCl溶液中，攪拌后過濾，得濾液A和粘稠物a。第二， 放入2mol/L的NaC

5、l溶液中，攪拌后過濾，得濾液B和粘稠物b。第三，放入冷卻的95%的酒精溶液中，攪拌后過濾，得濾液C和粘稠物c。以上過程獲得的濾液和粘稠物質(zhì)中，因含DNA少而可以丟棄的是 A b C ?！緦W點3】一、操作提示：1、以雞血液為實驗材料時，血液中需要加入 ，防止 。2、加入洗滌劑后，動作要_、_，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作。3、加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作要 ，沿_方向，以免 。4、二苯胺試劑要 ，否則會影響鑒定的效果。二、實驗步驟：討論、回憶各步驟的目的：防止血凝； 加速血細胞破裂； 溶解DNA； 使2 mol/L的NaCl溶液稀釋至0.14 mol/L，促DNA最大限度地析出

6、； 使含DNA的黏稠物被留在紗布上； 使含DNA的黏稠物盡可能多地溶于溶液中； 除去含DNA的濾液中的雜質(zhì)； 提取DNA； A：出現(xiàn)藍色。B：無變化。學點3學習情況檢測下列可以作為DNA粗提取與鑒定的實驗材料的是（c ）A人的全血 B雞的全血 C雞的血細胞液 D西瓜的汁液【典型例題】1、下列有關(guān)生物技術(shù)的說法，正確的是（ a ） A DNA粗提取時，用體積分數(shù)為95%的冷卻酒精進一步純化DNA B制作果醋時應(yīng)避免通入空氣以保證有關(guān)菌種正常代謝C制作果酒時應(yīng)反復(fù)沖洗葡萄以避免雜菌的影響D測定土壤中能分解尿素的細菌數(shù)目，應(yīng)采用平板劃線法2、在DNA的粗提取過程中，初步析出DNA和提取較純凈的DNA

7、所用的藥品的濃度及其名稱分別是（c ）0.1g/ml檸檬酸鈉溶液 2mol/L氯化鈉溶液 0.14mol/L氯化鈉溶液 體積分數(shù)為95%的酒精溶液 0.015mol/L氯化鈉溶液 0.04mol/L氯化鈉溶液A. B. C. D.3、從細胞核中提取核物質(zhì)所用的提取液是（c ）ANaCl溶液 B酒精 C蒸餾水 D檸檬酸鈉4、以下說法不正確的是（ c ）ADNA在0.14mol/LNaCl溶液溶解度最小，隨著濃度的增加，溶解度將增大BDNA在0.14mol/LNaCl溶液溶解度最小，隨著濃度的減少，溶解度將增大C加熱60800C時，蛋白質(zhì)和DNA都將發(fā)生結(jié)構(gòu)破壞，失去生物活性D在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色5、制備雞血細胞液的過程中，要除去上清液的主要原因是（ c ）A上清液中存在有毒物質(zhì) B上清液中的某些成分能與DNA結(jié)合成復(fù)合物CDNA分子不存在上清液中 D上清液中水分含量高，影響DNA的提取6、在向溶解DNA的NaCl溶液中，不斷加入蒸餾水的目的是（ c ）A加快溶解DNA的速度 B加快溶解雜質(zhì)的速度C減少DNA的溶解度，加快DNA析出 D減少雜質(zhì)的溶解度，加快雜質(zhì)的析出7在采用雞血為材料對DNA進行粗提取的實驗中，若需進一步提取雜質(zhì)較少的D