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1、名校名 推薦第一節(jié)酶的制備及活力測定一、酶的存在及提取1酶是在生物體活細(xì)胞中合成的。其參與反應(yīng)部位可以在細(xì)胞內(nèi),也可以在細(xì)胞外。2在酶的提取過程中,溫度、酸堿性等多種環(huán)境條件都可能影響酶的空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致酶變性,甚至喪失活力。因而提取出的酶首先需要檢測酶的活力。3酶的活力通常以單位時間內(nèi)底物的消耗量或者在單位時間內(nèi)產(chǎn)物的生成量來表示。在測定單位時間內(nèi)麥芽糖的生成量來檢測淀粉酶的活力的實驗中,測麥芽糖的產(chǎn)量可用分光光度法。二、酶活力的測定方法和原理1提取酶液:研磨水稻種子時需加石英砂,目的是充分研磨。制取勻漿并離心后,取上清液,其中一份要在水浴中加熱,目的是使酶失活。2滴加酶液。3恒溫處理。4鈍化
2、處理:酶促反應(yīng)進行一段時間后要向反應(yīng)液中加物質(zhì)的量濃度為0.4 mol/l的naoh溶液,目的是鈍化酶的活性,使反應(yīng)終止。5測定吸光值:測定吸光值時要把反應(yīng)液與2_ml3,5二硝基水楊酸試劑混勻,并沸水浴 5 min,才能產(chǎn)生麥芽糖產(chǎn)物。然后分別移入四支比色杯,用分光光度計在波長520 nm處進行比色。6繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。預(yù)習(xí)完成后,請把你認(rèn)為難以解決的問題記錄在下面的表格中問題 1問題 2問題 3問題 41名校名 推薦一、植物淀粉酶活力的測定原理:淀粉酶將淀粉水解成麥芽糖。在 naoh和丙三醇存在下,二硝基水楊酸 (dns)與還原糖共熱后被還原生成氨基化合物。在過量的naoh堿性溶液中此化合物呈
3、橘紅色,在520 nm 波長處有最大吸收峰,在一定的濃度范圍內(nèi),還原糖的量與光吸收值呈線性關(guān)系,利用比色法可測定樣品中的含糖量。如果在反應(yīng)系統(tǒng)中加入適當(dāng)過量的過氧化氫溶液,經(jīng)酶促反應(yīng)后, 在酸性條件下, 用標(biāo)準(zhǔn)高錳酸鉀溶液滴定多余的h2o2,反應(yīng)如下:5h2o2 2kmno4 4h2so45o2 2khso4 8h2 o 2mnso4根據(jù)消耗的h2o2 的量計算出過氧化氫酶的活力。酶活力用每克鮮重樣品1 min 內(nèi)分解 h2o2 的毫克數(shù)表示。過氧化氫酶活力 mg/(g min) ( a b) (vt/ vs) 1.7/ w t2名校名 推薦式中: a 為對照 kmno4滴定毫升數(shù) (ml)
4、;b為酶反應(yīng)后kmno4滴定毫升數(shù) (ml) ;vt 為提取酶液總量 (ml) , vs 為反應(yīng)時所用酶液量(ml) , w 為樣品鮮重 (g) ; t為反應(yīng)時間 (min) ; 1.7為換算系數(shù),即每消耗1 ml 物質(zhì)的量濃度為0.1 mol/l的高錳酸鉀溶液,相當(dāng)于樣品中含有 1.7 mgh 2o2。用分光光度法也可測定過氧化氫酶的活力。在有過氧化氫存在時,h2o2 將愈創(chuàng)木酚氧化生成茶褐色物質(zhì),后者在波長為470 nm處有最大吸收峰,再用721 型分光光度計進行測定。探究影響酶活力的因素(2016 全國甲卷) 為了研究溫度對某種酶活性的影響,設(shè)置三個實驗組: a 組(20 ) 、 b 組
5、(40 ) 和 c 組(60 ) ,測定各組在不同反應(yīng)時間內(nèi)的產(chǎn)物濃度( 其他條件相同 ) ,結(jié)果如圖?;卮鹣铝袉栴}:(1) 三個溫度條件下,該酶活性最高的是_組。(2) 在時間 t 1 之前,如果a 組溫度提高10 ,那么 a 組酶催化反應(yīng)的速度會_。(3) 如果在時間 t 2 時,向 c 組反應(yīng)體系中增加 2 倍量的底物,其他條件保持不變,那么在 t 3 時, c 組產(chǎn)物總量 _,原因是 _。(4) 生物體內(nèi)酶的化學(xué)本質(zhì)是 _,其特性有 _( 答出兩點即可 ) ?!緦忣}導(dǎo)析】 酶的特性胰蛋白酶 酶的作用特點 影響酶活力的因素【精講精析】(1) 在 60 條件下,反應(yīng)的最終產(chǎn)物濃度比20 和
6、 40 條件下小很多,說明酶在60 條件下最終失活。 20 與40 條件下相比, 40 時酶促反應(yīng)到達反應(yīng)平衡的時間短,說明40 條件下酶活性較高。(2) 在時間 t 1 前,如果a 組溫度提高10 變成 30 ,由該酶活性隨溫度的變化規(guī)律可知,30條件下的該酶活性大于20 條件下的,那么a 組酶催化反應(yīng)的速度會加快。(3) t 2 時 c 組的產(chǎn)物濃度已不再增加,但由a 和 b組 t 2 時的產(chǎn)物濃度可知,t 2 時 c 組底物并未全部被分解,c 組產(chǎn)物濃度不再增加是由于c 組3名校名 推薦溫度條件下t 2 時酶已經(jīng)變性失活。因此如果在時間t 2 時,向 c 組增加 2 倍量的底物,在其他條
7、件不變的情況下,t 3 時產(chǎn)物的總量也不會再增加。(4) 生物體內(nèi)酶的化學(xué)本質(zhì)絕大多數(shù)是蛋白質(zhì),極少數(shù)是rna。酶具有高效性、專一性等特性,并且需要適宜的溫度和ph 等。【答案】(1)b(2) 加快(3) 不變60 條件下,t 2 時酶已失活,即使增加底物,反應(yīng)產(chǎn)物總量也不會增加(4) 蛋白質(zhì)或 rna 高效性和專一性 ( 其他合理答案可酌情給分 )將實驗數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成曲線圖的方法(1) 以自變量為橫坐標(biāo),以因變量為縱坐標(biāo)建立直角坐標(biāo)系;(2) 注明坐標(biāo)軸的名稱、單位、坐標(biāo)原點以及曲線名稱;(3) 每個坐標(biāo)軸上的取值單位要相等;(4) 將實驗數(shù)據(jù)標(biāo)到坐標(biāo)系中,并用相應(yīng)線型連接起來。1種子萌發(fā)時,貯
8、藏物質(zhì)發(fā)生水解作用過程中,活力最高的酶應(yīng)該是()脂肪酶淀粉酶蛋白酶轉(zhuǎn)氨酶過氧化氫酶蔗糖酶abcd【解析】植物種子中貯存的是不能被細(xì)胞直接利用的大分子物質(zhì),如蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉等。 它們必須轉(zhuǎn)化成溶于水的小分子物質(zhì)才能被植物細(xì)胞所利用,在轉(zhuǎn)化過程中, 起作用的是各種水解酶。如蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等。【答案】a酶的制備和應(yīng)用下列有關(guān)淀粉酶制備的描述錯誤的是()a選材應(yīng)選萌發(fā)的水稻種子( 或其他含淀粉多的種子)b研磨時加入石英砂使研磨更加充分c用蒸餾水稀釋的目的是讓細(xì)胞吸水漲破d室溫下放置及振蕩的目的是讓酶充分溶解【審題導(dǎo)析】4名校名 推薦【精講精析】植物細(xì)胞有細(xì)胞壁不能用吸水漲破法。【答案】c制
9、備酶時應(yīng)注意選材,具體有:(1) 所要制備的酶是什么酶(2) 它所存在的組織或細(xì)胞(3) 含量較多的時期2(2012 廣東高考) 食品種類多,酸堿度范圍廣。生物興趣小組擬探究在食品生產(chǎn)中應(yīng)用范圍較廣的蛋白酶,查閱相關(guān)文獻,得知:(1)ph 對不同蛋白酶的活力影響有差異。據(jù)圖可知,_更適宜作為食品添加劑,理由是 _ 。蛋白酶的活力可用_ 的量來表示。(2) 該蛋白酶的提取工藝流程如下:興趣小組分別對酶保護劑濃度、提取液ph 進行了探究實驗。結(jié)果顯示,酶保護劑濃度在 0.02 0.06 mol/l范圍內(nèi),酶活力較高;提取液ph 在 6.0 8.0 范圍內(nèi),酶活力較高。他們認(rèn)為, 要進一步提高粗酶制
10、劑的酶活力,以達到最佳提取效果,還需對酶保護劑濃度和提取液 ph進行優(yōu)化,并確定以此為探究課題。請擬定該課題名稱,設(shè)計實驗結(jié)果記錄表?!窘馕觥?1) 題目中已經(jīng)提供了信息“食品種類多,酸堿度范圍廣”,所以選擇的食品添加劑應(yīng)該有較廣的酸堿度適應(yīng)范圍。由圖可知,木瓜蛋白酶的活力不隨ph 的變化而變5名校名 推薦化,所以可以選作食品添加劑。酶的活力可用單位時間內(nèi)、單位體積中底物的減少量( 或產(chǎn)物的增加量 ) 來表示。(2) 由題中信息已知酶保護劑的適宜濃度范圍和提取液ph的適宜范圍,故實驗的自變量是酶保護劑的濃度和提取液的ph,需在適宜范圍內(nèi)確定較小的梯度進行實驗。實驗結(jié)果記錄表要包含自變量酶保護劑
11、的濃度和提取液的ph 以及因變量底物的減少量( 或產(chǎn)物的產(chǎn)生量) ?!敬鸢浮?1) 木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶的活力不隨ph 的變化而變化單位時間內(nèi)、 單位體積中底物減少( 或產(chǎn)物增加 )(2) 課題:探究酶保護劑的濃度和提取液的ph 的最佳組合1下列與酶的活性有關(guān)的說法不正確的是()a酶的活性是由蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)決定的,不受外界條件的影響b酶的活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力c酶的活性受溫度、酸堿性等因素的影響d酶活性高低與反應(yīng)物濃度無關(guān)【解析】酶的活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力,其高低可以用在一定條件下,酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度來表示。酶的催化作用受外界條件影響,溫度、酸堿性等對酶的催化能力
12、都有較大影響,反應(yīng)物濃度與酶的活性高低無關(guān)。【答案】a2下列關(guān)于酶的論述錯誤的是()a酶的數(shù)量隨化學(xué)反應(yīng)的進行而減少b有的酶是蛋白質(zhì),有的是核酸c酶的活性與ph 有關(guān)d細(xì)胞內(nèi)、外都可能有酶存在【解析】酶的特性之一就是反應(yīng)前后保持不變。【答案】a6名校名 推薦3如圖表示在不同條件下,酶促反應(yīng)的速度變化曲線,試分析:(1) 酶促反應(yīng)的速度可以用 _來表示。(2) 和相比較,酶促反應(yīng)速度慢,這是因為_ 。(3) 圖中 ab段和 bc段影響酶促反應(yīng)速度的主要限制因子分別是_和 _。(4) 若想探究酶的最適 ph,至少應(yīng)設(shè)計 _ 種不同的 ph。(5) 請在原圖中繪出在酶濃度相對值為1 個單位、溫度為
13、25 條件下酶促反應(yīng)速度曲線?!窘馕觥棵复俜磻?yīng)速度可用底物利用速率或產(chǎn)物生成速率表示。圖中與的不同在于反應(yīng)溫度, ab 段說明影響反應(yīng)速度的是底物濃度,而bc段則是酶濃度。在探究ph(或溫度 ) 對酶活性的影響時,常設(shè)置高、適、低三個條件。【答案】 (1) 底物利用速率 ( 或產(chǎn)物生成速率 )(2) 溫度低,酶活性降低(3) 底物濃度 酶濃度 (4)3(5) 如圖 ( 虛線所示 )學(xué)業(yè)達標(biāo)測評( 六 )一、選擇題1科學(xué)家從細(xì)菌中分離得到了分解石油的酶,其活力的大小可表示為()a單位時間、單位體積內(nèi)反應(yīng)物的總量b一段時間后生成物的總量c一段時間后,一定體積中消耗的反應(yīng)物量d單位時間內(nèi)、單位體積中
14、反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量【解析】酶活力的大小可用在一定條件下酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度表示,7名校名 推薦此速度是指單位時間內(nèi),單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量。【答案】d2在植物淀粉酶制備及活力測定實驗中,淀粉水解反應(yīng)一段時間后,加naoh溶液的目的是 ()a緩沖作用b與麥芽糖反應(yīng)生成黃褐色產(chǎn)物c鈍化酶的活性,使反應(yīng)終止d以上都不對【解析】淀粉酶的活力測定以單位時間內(nèi)麥芽糖的生成量來表示,對照的試管要同時結(jié)束反應(yīng)來計算時間,所以利用naoh來鈍化酶的活性,使反應(yīng)終止?!敬鸢浮縞3從水稻種子中提取酶液時,首先要研磨種子,在此過程中要加入石英砂,其原因是()a防止酶失活b使研磨充
15、分,有利于酶釋放c有利于種子內(nèi)淀粉酶的大量合成d使酶失活【解析】提取酶液時, 要將種子研磨成勻漿,加入石英砂目的是使研磨充分,提取到足夠多的酶液。【答案】b4利用水稻種子制備植物淀粉酶要選用()a曬干的種子b萌發(fā)的種子c死種子d剛成熟的種子【解析】植物種子在萌發(fā)時,因需大量的物質(zhì)和能量,此時淀粉酶含量升高,活力增強以促進淀粉的大量水解。【答案】b5某有機物加入酶后,置于0 至 80 環(huán)境中,有機物的分解總量與溫度的關(guān)系如右圖所示。根據(jù)該圖判斷,如果把這些物質(zhì)置于80 至 0 的環(huán)境中處理,在ad 四圖中,符合其關(guān)系的圖是( 注:縱坐標(biāo)為有機物的分解總量)()8名校名 推薦【解析】高溫使酶變性失
16、活,降低溫度后, 酶的活性也不能恢復(fù),因此分解物總量也就不再變化?!敬鸢浮縝6有人測定了a、 b、 c、d 四種植物體內(nèi)多種酶的活性與溫度的關(guān)系,結(jié)果如圖所示。根據(jù)上圖中的信息,你認(rèn)為在25 條件下競爭能力最強的生物和對溫度適應(yīng)范圍最廣的生物分別是 ()a b 和 db b 和 cc b 和 ad a 和 c【解析】酶活性具有一定的溫度范圍和適宜溫度,溫度過高,酶會失活;低溫抑制酶的活性;最適溫度下,酶活性最強,生物在此溫度下生活得也最好,競爭力就強;酶的活性的范圍越大,生物的生存溫度范圍就越廣?!敬鸢浮縝7某一有機物加酶后,先置于 ph為 2 的環(huán)境中一段時間,然后把 ph 逐漸由 2 調(diào)到
17、 10,則此過程中,底物量的變化為()【解析】過酸、過堿都能使酶變性失活,當(dāng)ph 為 2 時酶已變性失活,即使再把酶所處環(huán)境的ph 調(diào)到最適值,酶促反應(yīng)也不再進行,底物量不再變化?!敬鸢浮縝8根據(jù)下圖依次指出每一圖形最可能代表了什么因素對酶的作用的影響。曲線中縱坐標(biāo)表示反應(yīng)速度,橫坐標(biāo)表示影響因素。按甲、乙、丙、丁順序組合正確的是()9名校名 推薦酶濃度底物的濃度溫度phabcd【解析】溫度和 ph 都有一個最適值。當(dāng)?shù)孜餄舛容^低時,隨底物濃度升高,酶催化作用增強, 但當(dāng)所用酶都參加催化之后,反應(yīng)也達到最大值;而隨著酶濃度增加,反應(yīng)速率會明顯增加?!敬鸢浮縜二、非選擇題9將某種玉米子粒浸種發(fā)芽
18、后研磨勻漿、過濾,得到提取液。取6 支試管分別加入等量的淀粉溶液后, 分為 3 組并分別調(diào)整到不同溫度, 如圖所示, 然后在每支試管中加入少許等量的玉米子粒提取液, 保持各組溫度 30 分鐘后, 繼續(xù)進行實驗 ( 提取液中還原性物質(zhì)忽略不計 ) :(1) 若向 a、c、 e 三支試管中分別加入適量的班氏試劑,沸水浴一段時間,觀察該三支試管, 其中液體顏色呈磚紅色的試管是 _;磚紅色較深的試管是 _,顏色較深的原因是 _ ;不變色的試管是 _,不變色的原因是 _。(2) 若向 b、d、 f 三支試管中分別加入等量的碘液,觀察三支試管,發(fā)現(xiàn)液體的顏色都是藍色,產(chǎn)生該顏色的原因是 _。(3) 以上實驗的三種處理溫度不一定是玉米子粒提取液促使淀粉分解的最適溫度。你怎樣設(shè)計實驗才能確定最適溫度? ( 只要求寫出設(shè)計思路 )【解析】本題考查植物淀粉酶的制備、應(yīng)用及影響因素。 發(fā)芽的玉米子粒中含有淀粉酶,在不同溫度下,淀粉酶的活性不同,對淀粉液的催化程度也不相同
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