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1、名校名 推薦第 38 講細(xì)胞工程 考綱要求 1. 植物的組織培養(yǎng) ( ) 。 2. 動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆( ) 。 3. 細(xì)胞融合與單克隆抗體 ( ) ??键c(diǎn)一理解植物組織培養(yǎng)技術(shù)1 判斷正誤(1)理論上,每個(gè)正?;罴?xì)胞都具有全能性()(2)植物的每個(gè)細(xì)胞在植物體內(nèi)和體外都能表現(xiàn)出細(xì)胞的全能性()(3)愈傷組織是外植體脫分化和再分化后形成的()2 用流程圖形式寫出植物組織培養(yǎng)的操作流程答案3 寫出組織培養(yǎng)的條件(1) 離體、無(wú)菌。(2) 環(huán)境條件適宜:如營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) ( 如水、無(wú)機(jī)鹽、蔗糖、維生素等 ) 、激素 ( 如生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素 ) 、適宜的溫度和光照等。易錯(cuò)警示 植物組織培養(yǎng)的 6
2、 個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)(1) 幼嫩的組織脫分化較為容易,如莖尖、根尖、形成層細(xì)胞易脫分化,而植物的莖、葉和成熟的組織則較難。(2) 對(duì)外植體要進(jìn)行消毒處理,而對(duì)各種器械要徹底滅菌。(3) 植物組織培養(yǎng)中用到的有機(jī)碳源一般為蔗糖,用葡萄糖也可以,但后者的成本高。(4) 不同細(xì)胞的全能性不同,具體表現(xiàn)為:受精卵生殖細(xì)胞 體細(xì)胞,離體細(xì)胞的全能性表達(dá)與分化程度呈負(fù)相關(guān),但生殖細(xì)胞特殊。(5) 脫分化形成愈傷組織的過(guò)程不需要光,再分化過(guò)程需要光,因?yàn)橛鷤M織利用有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分,而試管苗需要進(jìn)行光合作用以自養(yǎng)。(6) 植物組織培養(yǎng)中不同培養(yǎng)階段培養(yǎng)基含有的激素不同,因?yàn)榕囵B(yǎng)的目的不同( 生根或生芽 ) 。1 下列關(guān)于
3、植物組織培養(yǎng)的敘述中,錯(cuò)誤的是()A培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓B培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長(zhǎng)和分化C離體器官或組織的細(xì)胞都必須通過(guò)脫分化才能形成愈傷組織D同一株綠色開花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因組成相同1名校名 推薦答案D解析錯(cuò)答本題的原因是忽視了采用綠色開花植物的生殖器官如花藥進(jìn)行培養(yǎng)獲得的愈傷組織的基因組成和正常體細(xì)胞的不同,利用花藥細(xì)胞培養(yǎng)得到的是單倍體植株,利用一般體細(xì)胞培養(yǎng)獲得的是二倍體植株,兩者的基因組成不同。2 下圖表示胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞通過(guò)無(wú)菌操作接入試管后,在一定的條件下,形成試管苗的培育過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1) 要
4、促進(jìn)細(xì)胞分裂生長(zhǎng),培養(yǎng)基中應(yīng)有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括_和小分子有機(jī)物,激素包括細(xì)胞分裂素和_兩類植物激素。(2) 此過(guò)程依據(jù)的原理是 _ 。 A 和 B 階段主要進(jìn)行的分裂方式是_ , B 階段除了細(xì)胞分裂外,還進(jìn)行細(xì)胞_等。(3) 此過(guò)程需要無(wú)菌操作,主要是指對(duì) _進(jìn)行滅菌消毒。 B 階段需要光照,原因是 _ 。(4) 試 管 苗 的 根 細(xì) 胞 沒(méi) 有 葉 綠 素 , 而 葉 的 葉 肉 細(xì) 胞 具 有 葉 綠 素 , 這 是 基 因_ 的結(jié)果。答案(1) 無(wú)機(jī)物生長(zhǎng)素(2) 植物細(xì)胞的全能性有絲分裂分化(3) 培養(yǎng)基芽發(fā)育成葉,葉肉細(xì)胞中葉綠素的合成需要光照條件(4) 選擇性表達(dá)解
5、析植物組織培養(yǎng)是用離體的植物組織、器官或細(xì)胞接種到經(jīng)消毒滅菌的培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基含有供組織細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育所需要的無(wú)機(jī)物和小分子有機(jī)物,還有供調(diào)節(jié)細(xì)胞分化和再分化的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素。由外植體發(fā)育成試管苗,脫分化階段細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,再分化階段愈傷組織經(jīng)細(xì)胞有絲分裂和分化形成試管苗,此階段需要光照,原因是葉肉細(xì)胞中葉綠素的合成需要光照條件。1 脫分化和再分化的比較比較內(nèi)容脫分化再分化過(guò)程外植體愈傷組織愈傷組織幼苗形成體特點(diǎn)排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞有根、芽a. 離體a. 離體b. 適宜的營(yíng)養(yǎng)b. 適宜的營(yíng)養(yǎng)需要條件c. 生長(zhǎng)素 / 細(xì)胞分c. 生長(zhǎng)素 / 細(xì)胞分裂素的比例適中裂素的比例高或d.
6、不需光低誘導(dǎo)生根或生2名校名 推薦芽d. 光照2 植物激素在組織培養(yǎng)中的作用在配制好的MS培養(yǎng)基中,常常需要添加植物激素。其中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、 脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。 植物激素的濃度、 使用的先后順序以及用量的比例等,都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(1) 按照不同的順序使用這兩類激素,會(huì)得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用分化頻率提高(2) 當(dāng)同時(shí)使用這兩類激素時(shí),兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的用量比值植物細(xì)胞的發(fā)育方向比值高有利于根的分化、抑
7、制芽的形成比值低有利于芽的分化、抑制根的形成比值適中促進(jìn)愈傷組織的形成考點(diǎn)二植物細(xì)胞工程及其應(yīng)用1 觀察植物體細(xì)胞雜交技術(shù)圖示,完善相關(guān)問(wèn)題(1) 過(guò)程為去除細(xì)胞壁獲得具有活力的原生質(zhì)體,常用方法是酶解法,所用到的酶是纖維素酶和果膠酶。(2) 過(guò)程是原生質(zhì)體的融合,人工誘導(dǎo)的物理法包括離心、振動(dòng)、電激等;化學(xué)法一般用聚乙二醇 (PEG)作誘導(dǎo)劑。(3) 過(guò)程是原生質(zhì)體融合后再生出細(xì)胞壁,這是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志。(4) 植物體細(xì)胞雜交的意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。2 說(shuō)出植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用(1) 植物繁殖的新途徑微型繁殖:用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)。a. 保持優(yōu)良品種的
8、遺傳特性特點(diǎn)b. 高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖作物脫毒:選取作物無(wú)毒組織( 如莖尖 ) 進(jìn)行組織培養(yǎng),獲得脫毒苗的技術(shù)。人工種子:以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等為材料,經(jīng)過(guò)人工3名校名 推薦薄膜包裝得到的種子。(2) 作物新品種的培育:?jiǎn)伪扼w育種和突變體的利用突變體 Aa 中 A 為突變新基因,并控制著優(yōu)良性狀,利用單倍體育種,方法步驟如下:優(yōu)點(diǎn):穩(wěn)定遺傳,縮短育種年限。(3) 細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn):細(xì)胞產(chǎn)物有蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿等。易錯(cuò)警示 植物細(xì)胞工程的 3 個(gè)易錯(cuò)點(diǎn)(1) 對(duì)植物體細(xì)胞雜交和有性雜交辨析不清植物體細(xì)胞雜交:若兩個(gè)不同品種的植物細(xì)胞A、
9、B 進(jìn)行融合, A 含有 2X 條染色體,2 個(gè)染色體組,基因型為Aabb, B 含有 2Y 條染色體, 2 個(gè)染色體組,其基因型為ccDd,則新植株應(yīng)為四倍體,其體細(xì)胞中染色體數(shù)為2X 2Y,基因型為 AabbccDd。從中不難看出,體細(xì)胞雜交即兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞,不管是染色體數(shù)、 基因型還是染色體組都采用直接相加的方法。植物有性雜交的結(jié)果: 子代細(xì)胞中染色體數(shù)、 基因型分別為“XY”、 “AbcD”或“ abcD”或“ Abcd”或“ abcd”,即先減半再相加。有性生殖過(guò)程中符合孟德爾遺傳規(guī)律,而植物體細(xì)胞雜交不符合孟德爾遺傳規(guī)律。(2) 利用植物組織培養(yǎng)生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物時(shí),有時(shí)只需將外
10、植體培養(yǎng)到愈傷組織,從愈傷組織中獲取產(chǎn)物。(3) 人工種子發(fā)育初期需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)由人工胚乳提供。3 以下為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖,其中甲和乙分別表示兩種二倍體植物細(xì)胞,所含有的染色體組分別是AA和 BB。據(jù)圖分析不正確的是()A圖中過(guò)程發(fā)生的化學(xué)變化是纖維素和果膠水解B經(jīng)過(guò)和過(guò)程形成的c 細(xì)胞只有AABB這一種類型C過(guò)程一般使用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑D過(guò)程和分別是脫分化和再分化答案B解析將若干 a 和 b 等量混合后轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基上培養(yǎng),經(jīng)過(guò)細(xì)胞融合,c 的細(xì)胞類型包括沒(méi)有融合的細(xì)胞、相同細(xì)胞的融合和不同細(xì)胞的融合,即 AA、BB、AAAA、BBBB、AABB。4名校名 推薦4 如圖是利用基因型為
11、 AaBb 的某二倍體植物作為實(shí)驗(yàn)材料所做的一些實(shí)驗(yàn)示意圖,請(qǐng)分析回答:(1) 途徑 1、 2、3 中過(guò)程所采用的生物技術(shù)是_ 。(2) 由途徑 1 形成的植株 B的基因型有 _ ,植株 B 成熟時(shí)不可育的原因是_ 。使 植株 B 可育的方法是_ 。(3) 從植株 A 到植株 C 的培育過(guò)程,需要發(fā)揮調(diào)控作用的植物激素至少有_和 _。(4) 一般情況下, 相同發(fā)育程度的植株 C 與植株 D 的性狀 _(“相同”“不相同”或“不一定相同” ) 。(5) 在相同條件和相同發(fā)育程度的情況下,植株D 的表現(xiàn)型與植株A 相同的可能性為_ 。答案(1) 植物組織培養(yǎng)(2)AB 、Ab、aB、ab減數(shù)分裂時(shí)
12、染色體聯(lián)會(huì)紊亂,不能形成正常的生殖細(xì)胞幼苗期用秋水仙素處理,使染色體數(shù)目加倍(3) 細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素 (4) 相同 (5)100%解析(1) 實(shí)驗(yàn)中選用花藥或植物體細(xì)胞離體培養(yǎng)后獲得新植株,該項(xiàng)技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng)。 (2) 植株 A 的基因型為AaBb,經(jīng)減數(shù)分裂形成的花粉粒有AB、Ab、 aB、ab 四種,花粉粒經(jīng)植物組織培養(yǎng)形成的植株B 也有 AB、Ab、 aB、ab 四種基因型,均為單倍體植株, 由于不能形成正常的生殖細(xì)胞而不可育,若使植株 B 可育常采取用秋水仙素處理使染色體數(shù)目加倍的方法。 (3)植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。(4) 植
13、株 C、D 具有相同的基因組成,相同條件和相同發(fā)育程度的情況下,它們的性狀表現(xiàn)相同。(5) 植株 D由植株 A 的花藥壁 ( 屬于體細(xì)胞 ) 經(jīng)組織培養(yǎng)發(fā)育而成,屬于無(wú)性生殖,不發(fā)生基因重組,故二者表現(xiàn)型應(yīng)完全相同。1 植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交的比較名稱植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性5名校名 推薦過(guò)程選取根尖、 莖尖、形成層部位最容易誘導(dǎo)選材不同植物細(xì)胞融合后形成的雜種細(xì)胞脫分化技術(shù)除脫分化、 再分化外, 還要用酶解法去除操作脫分化、再分化等細(xì)胞壁,用一定的方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合關(guān)系植物組織培養(yǎng)是植物體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ),植物體細(xì)胞雜交所用的技術(shù)更復(fù)雜
14、2 單倍體育種和突變體利用的比較項(xiàng) 目原 理優(yōu) 點(diǎn)成 果單倍體單育 1 號(hào)煙草品種,中花 8染色體變異明顯縮短育種年限號(hào)、11 號(hào)水稻和京花1 號(hào)小育種麥品種等突變體基因突變產(chǎn)生新基因,大幅度改良某抗花葉病毒的甘蔗、抗鹽堿利用些性狀的野生煙草等考點(diǎn)三聚焦動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1 用流程圖形式寫出動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的操作流程答案或2 說(shuō)出動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1) 無(wú)菌、無(wú)毒:對(duì)培養(yǎng)液和所用培養(yǎng)用具無(wú)菌處理,添加抗生素,定期更換培養(yǎng)液以清除代謝產(chǎn)物。(2) 營(yíng)養(yǎng):除正常的有機(jī)和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)外,加入血清、血漿。(3) 適宜的溫度和pH:溫度為36.5 0.5 _ ( 哺乳動(dòng)物 ) , pH 為 7.2 7.4 。(4)
15、 氣體環(huán)境:含 95%的空氣加 5%CO2的混合氣體。3 動(dòng)物細(xì)胞核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,6名校名 推薦使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。易錯(cuò)警示動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)及動(dòng)物體細(xì)胞核移植的易錯(cuò)點(diǎn)(1) 植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都存在細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程,但植物細(xì)胞可以先分裂再分化,而動(dòng)物細(xì)胞不分化只分裂。(2) 區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關(guān)鍵是是否分瓶培養(yǎng)。貼壁生長(zhǎng)到一定程度需要用胰蛋白酶處理,然后再分瓶培養(yǎng),原代培養(yǎng)結(jié)束,開始了傳代培養(yǎng)。(3) 經(jīng)植物組織培養(yǎng)成的植株與提供外植體的植株完全相同,而動(dòng)物細(xì)胞核移植形成的個(gè)體與供體大部分性
16、狀相同,也有部分性狀與受體相同。(4) 核移植過(guò)程中供體理論上是提供細(xì)胞核,但操作過(guò)程中可以把整個(gè)體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中去, 原因是體細(xì)胞體積相對(duì)較小, 取核難度較大, 另外細(xì)胞膜對(duì)核融合的障礙性較小。5 關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),下列敘述錯(cuò)誤的是()A用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織B將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞C在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶處理使細(xì)胞從瓶壁上脫離,制成懸浮液D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳至50 代左右,所培育的細(xì)胞會(huì)衰老死亡答案D解析進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),選取胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織是因?yàn)樗鼈兊姆至涯芰^強(qiáng)。動(dòng)物組織細(xì)胞間含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)
17、,易被胰蛋白酶催化分解,從而使細(xì)胞分散開來(lái)。當(dāng)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)就會(huì)停止分裂增殖,需定期用胰蛋白酶處理使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái),制成細(xì)胞懸浮液。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)傳至50 代左右,部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制地分裂下去。6 科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長(zhǎng)激素基因的奶牛,如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育,可以對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆( 如下圖所示 ) ,請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列問(wèn)題:(1) 在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分散處理,形成單個(gè)細(xì)胞,這個(gè)過(guò)程中需要利用_酶處理。(2) 用 于 核 移 植 的 供 體 細(xì) 胞 , 一
18、般 都 選 用 傳 代 10 代 以 內(nèi) 的 細(xì) 胞 , 原 因 是_ 。(3) 在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞增殖的方式是_,此外,細(xì)胞增殖還表現(xiàn)出_ 和接觸抑制等特點(diǎn)。(4) 將進(jìn)行培養(yǎng)的供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中,去除卵母細(xì)胞細(xì)胞核的目的是7名校名 推薦_ 。(5) 將重組細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后,該母牛就會(huì)生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的犢牛,但也不是100%的復(fù)制,原因最可能是 _ 。(6) 上述動(dòng)物細(xì)胞工程中涉及的技術(shù)有_ 。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功,說(shuō)明了動(dòng)物 _ 具有全能性。答案(1) 胰蛋白(2) 該種細(xì)胞代謝旺盛、分裂能力強(qiáng),且遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變(3) 有絲分裂 貼
19、壁生長(zhǎng)(4) 使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞(5) 生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制;生物的性狀還受環(huán)境因素的影響(6) 核移植、細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植技術(shù)體細(xì)胞的細(xì)胞核解析 (1) 實(shí)踐中常用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織細(xì)胞使其分離開來(lái)。(2) 傳代 10 代以內(nèi)的細(xì)胞代謝旺盛、分裂能力強(qiáng),遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變,適于作核移植的供體細(xì)胞。(3)在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí), 細(xì)胞以有絲分裂的方式進(jìn)行增殖,同時(shí)表現(xiàn)出貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制的現(xiàn)象。 (4)去除卵母細(xì)胞細(xì)胞核的目的是使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞。(5) 生物的性狀是細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同作用的結(jié)果,同時(shí),生物
20、的性狀還受環(huán)境的影響,因此,克隆動(dòng)物不可能是供體奶牛100%的復(fù)制品。 (6)該克隆動(dòng)物的培育過(guò)程中涉及核移植、 細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù),說(shuō)明了高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植的比較植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)核移植原理植物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞核的全能性8名校名 推薦過(guò)程與外植體完全相同的相同分化程度的細(xì)胞與供體基本相同的個(gè)結(jié)果個(gè)體群體細(xì)胞的脫分化、再分關(guān)鍵環(huán)節(jié)細(xì)胞分化、細(xì)胞癌變核融合、細(xì)胞分化化、分化加速良種繁育生產(chǎn)生物制品保護(hù)瀕危物種應(yīng)用基因工程生產(chǎn)醫(yī)用蛋白培育新品種檢測(cè)有毒物質(zhì)提供克隆器官、組生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品織等考點(diǎn)四聚焦動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體
21、1 完善動(dòng)物細(xì)胞融合的相關(guān)問(wèn)題(1) 概念:指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。(2) 融合方法:聚乙二醇 (PEG)、滅活的病毒、電激等。(3) 意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能,也為制造單克隆抗體開辟了新途徑。2 用流程圖形式寫出單克隆抗體的制備過(guò)程答案易錯(cuò)警示(1) 植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合需注意的問(wèn)題:植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合中酶的作用對(duì)象不同,纖維素酶和果膠酶作用于細(xì)胞壁,而胰蛋白酶等作用于細(xì)胞間質(zhì)。 植物雜交細(xì)胞在激素誘導(dǎo)下能表達(dá)出全能性,但動(dòng)物雜交細(xì)胞的全能性不能表達(dá)。 (2) 單克隆抗體制備過(guò)程中需注意的幾個(gè)問(wèn)題:滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒
22、或細(xì)菌失去感染能力,但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。除了受到注射的抗原的刺激, 小鼠在生活過(guò)程中還可能受到其他抗原的刺激,因此從小鼠體內(nèi)取出的多個(gè) B 淋巴細(xì)胞可能產(chǎn)生多種不同抗體,所以進(jìn)行第二次篩選是非常必要的。單克隆9名校名 推薦抗體制備過(guò)程中, 進(jìn)行了多次動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的操作, 說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。7 與植物體細(xì)胞雜交相比,動(dòng)物細(xì)胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)因子分別是()A細(xì)胞膜的流動(dòng)性、離心B細(xì)胞膜的流動(dòng)性、滅活的病毒C細(xì)胞的全能性、電激D細(xì)胞的全能性、滅活的病毒答案B解析植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性, 動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性;動(dòng)物細(xì)胞
23、融合的常用誘導(dǎo)因子有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等,其中滅活的病毒是其特有的誘導(dǎo)因子。8 如圖表示單克隆抗體的制備過(guò)程,據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1) 制備單克隆抗體的步驟:a將 _注入小鼠體內(nèi), 從小鼠脾臟中獲得B 淋巴細(xì)胞, 若要生產(chǎn)預(yù)防SARS的疫苗,則應(yīng)用 _感染小鼠。b通過(guò)圖中過(guò)程獲得的細(xì)胞為_ ,它除了具有無(wú)限增殖的特點(diǎn)外,還有哪些特征? _ 。c將誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞,放在_培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)、篩選,篩選得到的 細(xì) 胞 中 的 染 色 體 數(shù) 正 好 是 小 鼠 體 細(xì) 胞 中 的 二 倍 嗎 ? _ , 原 因 是_ _ 。(2) 單克隆抗體與一般的血清抗體相比,優(yōu)點(diǎn)是_ ;將該抗體制成生物導(dǎo)彈,則生物導(dǎo)彈的組成是_ ;為了便于了解生物導(dǎo)彈的作用部位,常要對(duì)生物導(dǎo)彈中的成分進(jìn)行_ 。(3) 單克隆抗體的制備過(guò)程中需要兩次篩選,請(qǐng)寫出圖中的編號(hào)和篩選目的。第一次篩選: _ ;第二次篩選:_ 。答案(1) a 抗原SARS病毒b骨髓瘤細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著變化、
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