1、名校名 推薦第一節(jié)酶的制備及活力測定一、酶的存在及提取1酶是在生物體活細(xì)胞中合成的。其參與反應(yīng)部位可以在細(xì)胞內(nèi)，也可以在細(xì)胞外。2在酶的提取過程中，溫度、酸堿性等多種環(huán)境條件都可能影響酶的空間結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致酶變性，甚至喪失活力。因而提取出的酶首先需要檢測酶的活力。3酶的活力通常以單位時(shí)間內(nèi)底物的消耗量或者在單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物的生成量來表示。在測定單位時(shí)間內(nèi)麥芽糖的生成量來檢測淀粉酶的活力的實(shí)驗(yàn)中，測麥芽糖的產(chǎn)量可用分光光度法。二、酶活力的測定方法和原理1提取酶液：研磨水稻種子時(shí)需加石英砂，目的是充分研磨。制取勻漿并離心后，取上清液，其中一份要在水浴中加熱，目的是使酶失活。2滴加酶液。3恒溫處理。4鈍化

2、處理：酶促反應(yīng)進(jìn)行一段時(shí)間后要向反應(yīng)液中加物質(zhì)的量濃度為0.4 mol/L的NaOH溶液，目的是鈍化酶的活性，使反應(yīng)終止。5測定吸光值：測定吸光值時(shí)要把反應(yīng)液與2_mL3,5二硝基水楊酸試劑混勻，并沸水浴 5 min，才能產(chǎn)生麥芽糖產(chǎn)物。然后分別移入四支比色杯，用分光光度計(jì)在波長520 nm處進(jìn)行比色。6繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。預(yù)習(xí)完成后，請把你認(rèn)為難以解決的問題記錄在下面的表格中問題 1問題 2問題 3問題 41名校名 推薦一、植物淀粉酶活力的測定原理：淀粉酶將淀粉水解成麥芽糖。在 NaOH和丙三醇存在下，二硝基水楊酸 (DNS)與還原糖共熱后被還原生成氨基化合物。在過量的NaOH堿性溶液中此化合物呈

3、橘紅色，在520 nm 波長處有最大吸收峰，在一定的濃度范圍內(nèi)，還原糖的量與光吸收值呈線性關(guān)系，利用比色法可測定樣品中的含糖量。如果在反應(yīng)系統(tǒng)中加入適當(dāng)過量的過氧化氫溶液，經(jīng)酶促反應(yīng)后， 在酸性條件下， 用標(biāo)準(zhǔn)高錳酸鉀溶液滴定多余的H2O2，反應(yīng)如下：5H2O2 2KMnO4 4H2SO45O2 2KHSO4 8H2 O 2MnSO4根據(jù)消耗的H2O2 的量計(jì)算出過氧化氫酶的活力。酶活力用每克鮮重樣品1 min 內(nèi)分解 H2O2 的毫克數(shù)表示。過氧化氫酶活力 mg/(g min) ( A B) (VT/ VS) 1.7/ W t2名校名 推薦式中： A 為對照 KMnO4滴定毫升數(shù) (mL)

4、；B為酶反應(yīng)后KMnO4滴定毫升數(shù) (mL) ；VT 為提取酶液總量 (mL) ， VS 為反應(yīng)時(shí)所用酶液量(mL) ， W 為樣品鮮重 (g) ； t為反應(yīng)時(shí)間 (min) ； 1.7為換算系數(shù)，即每消耗1 mL 物質(zhì)的量濃度為0.1 mol/L的高錳酸鉀溶液，相當(dāng)于樣品中含有 1.7 mgH 2O2。用分光光度法也可測定過氧化氫酶的活力。在有過氧化氫存在時(shí)，H2O2 將愈創(chuàng)木酚氧化生成茶褐色物質(zhì)，后者在波長為470 nm處有最大吸收峰，再用721 型分光光度計(jì)進(jìn)行測定。探究影響酶活力的因素(2016 全國甲卷) 為了研究溫度對某種酶活性的影響，設(shè)置三個實(shí)驗(yàn)組： A 組(20 ) 、 B 組

5、(40 ) 和 C 組(60 ) ，測定各組在不同反應(yīng)時(shí)間內(nèi)的產(chǎn)物濃度( 其他條件相同 ) ，結(jié)果如圖?；卮鹣铝袉栴}：(1) 三個溫度條件下，該酶活性最高的是_組。(2) 在時(shí)間 t 1 之前，如果A 組溫度提高10 ，那么 A 組酶催化反應(yīng)的速度會_。(3) 如果在時(shí)間 t 2 時(shí)，向 C 組反應(yīng)體系中增加 2 倍量的底物，其他條件保持不變，那么在 t 3 時(shí)， C 組產(chǎn)物總量 _，原因是 _。(4) 生物體內(nèi)酶的化學(xué)本質(zhì)是 _，其特性有 _( 答出兩點(diǎn)即可 ) ?！緦忣}導(dǎo)析】 酶的特性胰蛋白酶 酶的作用特點(diǎn) 影響酶活力的因素【精講精析】(1) 在 60 條件下，反應(yīng)的最終產(chǎn)物濃度比20 和

6、 40 條件下小很多，說明酶在60 條件下最終失活。 20 與40 條件下相比， 40 時(shí)酶促反應(yīng)到達(dá)反應(yīng)平衡的時(shí)間短，說明40 條件下酶活性較高。(2) 在時(shí)間 t 1 前，如果A 組溫度提高10 變成 30 ，由該酶活性隨溫度的變化規(guī)律可知，30條件下的該酶活性大于20 條件下的，那么A 組酶催化反應(yīng)的速度會加快。(3) t 2 時(shí) C 組的產(chǎn)物濃度已不再增加，但由A 和 B組 t 2 時(shí)的產(chǎn)物濃度可知，t 2 時(shí) C 組底物并未全部被分解，C 組產(chǎn)物濃度不再增加是由于C 組3名校名 推薦溫度條件下t 2 時(shí)酶已經(jīng)變性失活。因此如果在時(shí)間t 2 時(shí)，向 C 組增加 2 倍量的底物，在其他條

7、件不變的情況下，t 3 時(shí)產(chǎn)物的總量也不會再增加。(4) 生物體內(nèi)酶的化學(xué)本質(zhì)絕大多數(shù)是蛋白質(zhì)，極少數(shù)是RNA。酶具有高效性、專一性等特性，并且需要適宜的溫度和pH 等?！敬鸢浮?1)B(2) 加快(3) 不變60 條件下，t 2 時(shí)酶已失活，即使增加底物，反應(yīng)產(chǎn)物總量也不會增加(4) 蛋白質(zhì)或 RNA 高效性和專一性 ( 其他合理答案可酌情給分 )將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成曲線圖的方法(1) 以自變量為橫坐標(biāo)，以因變量為縱坐標(biāo)建立直角坐標(biāo)系；(2) 注明坐標(biāo)軸的名稱、單位、坐標(biāo)原點(diǎn)以及曲線名稱；(3) 每個坐標(biāo)軸上的取值單位要相等；(4) 將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)標(biāo)到坐標(biāo)系中，并用相應(yīng)線型連接起來。1種子萌發(fā)時(shí)，貯

8、藏物質(zhì)發(fā)生水解作用過程中，活力最高的酶應(yīng)該是()脂肪酶淀粉酶蛋白酶轉(zhuǎn)氨酶過氧化氫酶蔗糖酶ABCD【解析】植物種子中貯存的是不能被細(xì)胞直接利用的大分子物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉等。 它們必須轉(zhuǎn)化成溶于水的小分子物質(zhì)才能被植物細(xì)胞所利用，在轉(zhuǎn)化過程中， 起作用的是各種水解酶。如蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等?！敬鸢浮緼酶的制備和應(yīng)用下列有關(guān)淀粉酶制備的描述錯誤的是()A選材應(yīng)選萌發(fā)的水稻種子( 或其他含淀粉多的種子)B研磨時(shí)加入石英砂使研磨更加充分C用蒸餾水稀釋的目的是讓細(xì)胞吸水漲破D室溫下放置及振蕩的目的是讓酶充分溶解【審題導(dǎo)析】4名校名 推薦【精講精析】植物細(xì)胞有細(xì)胞壁不能用吸水漲破法。【答案】C制

9、備酶時(shí)應(yīng)注意選材，具體有：(1) 所要制備的酶是什么酶(2) 它所存在的組織或細(xì)胞(3) 含量較多的時(shí)期2(2012 廣東高考) 食品種類多，酸堿度范圍廣。生物興趣小組擬探究在食品生產(chǎn)中應(yīng)用范圍較廣的蛋白酶，查閱相關(guān)文獻(xiàn)，得知：(1)pH 對不同蛋白酶的活力影響有差異。據(jù)圖可知，_更適宜作為食品添加劑，理由是 _ 。蛋白酶的活力可用_ 的量來表示。(2) 該蛋白酶的提取工藝流程如下：興趣小組分別對酶保護(hù)劑濃度、提取液pH 進(jìn)行了探究實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，酶保護(hù)劑濃度在 0.02 0.06 mol/L范圍內(nèi)，酶活力較高；提取液pH 在 6.0 8.0 范圍內(nèi)，酶活力較高。他們認(rèn)為， 要進(jìn)一步提高粗酶制

10、劑的酶活力，以達(dá)到最佳提取效果，還需對酶保護(hù)劑濃度和提取液 pH進(jìn)行優(yōu)化，并確定以此為探究課題。請擬定該課題名稱，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表?！窘馕觥?1) 題目中已經(jīng)提供了信息“食品種類多，酸堿度范圍廣”，所以選擇的食品添加劑應(yīng)該有較廣的酸堿度適應(yīng)范圍。由圖可知，木瓜蛋白酶的活力不隨pH 的變化而變5名校名 推薦化，所以可以選作食品添加劑。酶的活力可用單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中底物的減少量( 或產(chǎn)物的增加量 ) 來表示。(2) 由題中信息已知酶保護(hù)劑的適宜濃度范圍和提取液pH的適宜范圍，故實(shí)驗(yàn)的自變量是酶保護(hù)劑的濃度和提取液的pH，需在適宜范圍內(nèi)確定較小的梯度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表要包含自變量酶保護(hù)劑

11、的濃度和提取液的pH 以及因變量底物的減少量( 或產(chǎn)物的產(chǎn)生量) ?！敬鸢浮?1) 木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶的活力不隨pH 的變化而變化單位時(shí)間內(nèi)、 單位體積中底物減少( 或產(chǎn)物增加 )(2) 課題：探究酶保護(hù)劑的濃度和提取液的pH 的最佳組合1下列與酶的活性有關(guān)的說法不正確的是()A酶的活性是由蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)決定的，不受外界條件的影響B(tài)酶的活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力C酶的活性受溫度、酸堿性等因素的影響D酶活性高低與反應(yīng)物濃度無關(guān)【解析】酶的活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力，其高低可以用在一定條件下，酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度來表示。酶的催化作用受外界條件影響，溫度、酸堿性等對酶的催化能力

12、都有較大影響，反應(yīng)物濃度與酶的活性高低無關(guān)?！敬鸢浮緼2下列關(guān)于酶的論述錯誤的是()A酶的數(shù)量隨化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行而減少B有的酶是蛋白質(zhì)，有的是核酸C酶的活性與pH 有關(guān)D細(xì)胞內(nèi)、外都可能有酶存在【解析】酶的特性之一就是反應(yīng)前后保持不變?！敬鸢浮緼6名校名 推薦3如圖表示在不同條件下，酶促反應(yīng)的速度變化曲線，試分析：(1) 酶促反應(yīng)的速度可以用 _來表示。(2) 和相比較，酶促反應(yīng)速度慢，這是因?yàn)開 。(3) 圖中 AB段和 BC段影響酶促反應(yīng)速度的主要限制因子分別是_和 _。(4) 若想探究酶的最適 pH，至少應(yīng)設(shè)計(jì) _ 種不同的 pH。(5) 請?jiān)谠瓐D中繪出在酶濃度相對值為1 個單位、溫度為

13、25 條件下酶促反應(yīng)速度曲線。【解析】酶促反應(yīng)速度可用底物利用速率或產(chǎn)物生成速率表示。圖中與的不同在于反應(yīng)溫度， AB 段說明影響反應(yīng)速度的是底物濃度，而BC段則是酶濃度。在探究pH(或溫度 ) 對酶活性的影響時(shí)，常設(shè)置高、適、低三個條件?！敬鸢浮?(1) 底物利用速率 ( 或產(chǎn)物生成速率 )(2) 溫度低，酶活性降低(3) 底物濃度 酶濃度 (4)3(5) 如圖 ( 虛線所示 )學(xué)業(yè)達(dá)標(biāo)測評( 六 )一、選擇題1科學(xué)家從細(xì)菌中分離得到了分解石油的酶，其活力的大小可表示為()A單位時(shí)間、單位體積內(nèi)反應(yīng)物的總量B一段時(shí)間后生成物的總量C一段時(shí)間后，一定體積中消耗的反應(yīng)物量D單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中

14、反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量【解析】酶活力的大小可用在一定條件下酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度表示，7名校名 推薦此速度是指單位時(shí)間內(nèi)，單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量?！敬鸢浮緿2在植物淀粉酶制備及活力測定實(shí)驗(yàn)中，淀粉水解反應(yīng)一段時(shí)間后，加NaOH溶液的目的是 ()A緩沖作用B與麥芽糖反應(yīng)生成黃褐色產(chǎn)物C鈍化酶的活性，使反應(yīng)終止D以上都不對【解析】淀粉酶的活力測定以單位時(shí)間內(nèi)麥芽糖的生成量來表示，對照的試管要同時(shí)結(jié)束反應(yīng)來計(jì)算時(shí)間，所以利用NaOH來鈍化酶的活性，使反應(yīng)終止?！敬鸢浮緾3從水稻種子中提取酶液時(shí)，首先要研磨種子，在此過程中要加入石英砂，其原因是()A防止酶失活B使研磨充

15、分，有利于酶釋放C有利于種子內(nèi)淀粉酶的大量合成D使酶失活【解析】提取酶液時(shí)， 要將種子研磨成勻漿，加入石英砂目的是使研磨充分，提取到足夠多的酶液?！敬鸢浮緽4利用水稻種子制備植物淀粉酶要選用()A曬干的種子B萌發(fā)的種子C死種子D剛成熟的種子【解析】植物種子在萌發(fā)時(shí)，因需大量的物質(zhì)和能量，此時(shí)淀粉酶含量升高，活力增強(qiáng)以促進(jìn)淀粉的大量水解?！敬鸢浮緽5某有機(jī)物加入酶后，置于0 至 80 環(huán)境中，有機(jī)物的分解總量與溫度的關(guān)系如右圖所示。根據(jù)該圖判斷，如果把這些物質(zhì)置于80 至 0 的環(huán)境中處理，在AD 四圖中，符合其關(guān)系的圖是( 注：縱坐標(biāo)為有機(jī)物的分解總量)()8名校名 推薦【解析】高溫使酶變性失

16、活，降低溫度后， 酶的活性也不能恢復(fù)，因此分解物總量也就不再變化?！敬鸢浮緽6有人測定了A、 B、 C、D 四種植物體內(nèi)多種酶的活性與溫度的關(guān)系，結(jié)果如圖所示。根據(jù)上圖中的信息，你認(rèn)為在25 條件下競爭能力最強(qiáng)的生物和對溫度適應(yīng)范圍最廣的生物分別是 ()A B 和 DB B 和 CC B 和 AD A 和 C【解析】酶活性具有一定的溫度范圍和適宜溫度，溫度過高，酶會失活；低溫抑制酶的活性；最適溫度下，酶活性最強(qiáng)，生物在此溫度下生活得也最好，競爭力就強(qiáng)；酶的活性的范圍越大，生物的生存溫度范圍就越廣?！敬鸢浮緽7某一有機(jī)物加酶后，先置于 pH為 2 的環(huán)境中一段時(shí)間，然后把 pH 逐漸由 2 調(diào)到

17、 10，則此過程中，底物量的變化為()【解析】過酸、過堿都能使酶變性失活，當(dāng)pH 為 2 時(shí)酶已變性失活，即使再把酶所處環(huán)境的pH 調(diào)到最適值，酶促反應(yīng)也不再進(jìn)行，底物量不再變化?！敬鸢浮緽8根據(jù)下圖依次指出每一圖形最可能代表了什么因素對酶的作用的影響。曲線中縱坐標(biāo)表示反應(yīng)速度，橫坐標(biāo)表示影響因素。按甲、乙、丙、丁順序組合正確的是()9名校名 推薦酶濃度底物的濃度溫度pHABCD【解析】溫度和 pH 都有一個最適值。當(dāng)?shù)孜餄舛容^低時(shí)，隨底物濃度升高，酶催化作用增強(qiáng)， 但當(dāng)所用酶都參加催化之后，反應(yīng)也達(dá)到最大值；而隨著酶濃度增加，反應(yīng)速率會明顯增加?！敬鸢浮緼二、非選擇題9將某種玉米子粒浸種發(fā)芽

18、后研磨勻漿、過濾，得到提取液。取6 支試管分別加入等量的淀粉溶液后， 分為 3 組并分別調(diào)整到不同溫度， 如圖所示， 然后在每支試管中加入少許等量的玉米子粒提取液， 保持各組溫度 30 分鐘后， 繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn) ( 提取液中還原性物質(zhì)忽略不計(jì) ) ：(1) 若向 A、C、 E 三支試管中分別加入適量的班氏試劑，沸水浴一段時(shí)間，觀察該三支試管， 其中液體顏色呈磚紅色的試管是 _；磚紅色較深的試管是 _，顏色較深的原因是 _ ；不變色的試管是 _，不變色的原因是 _。(2) 若向 B、D、 F 三支試管中分別加入等量的碘液，觀察三支試管，發(fā)現(xiàn)液體的顏色都是藍(lán)色，產(chǎn)生該顏色的原因是 _。(3) 以上實(shí)驗(yàn)的三種處理溫度不一定是玉米子粒提取液促使淀粉分解的最適溫度。你怎樣設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)才能確定最適溫度？ ( 只要求寫出設(shè)計(jì)思路 )【解析】本題考查植物淀粉酶的制備、應(yīng)用及影響因素。 發(fā)芽的玉米子粒中含有淀粉酶，在不同溫度下，淀粉酶的活性不同，對淀粉液的催化程度也不相同