1、11.現(xiàn)有A和B兩個(gè)肉牛品種，A品種牛的細(xì)胞組成可表示為A細(xì)胞核、A細(xì)胞質(zhì)，B品種牛則為B細(xì)胞核、B細(xì)胞質(zhì)。（1）如果要獲得一頭克隆牛，使其細(xì)胞由A細(xì)胞核和B細(xì)胞質(zhì)組成，基本步驟是，從A品種牛體內(nèi)取出體細(xì)胞，進(jìn)行體外培養(yǎng)。然后再?gòu)呐囵B(yǎng)細(xì)胞中取出_注入B品種牛的_卵母細(xì)胞，經(jīng)過(guò)某種刺激和培養(yǎng)后，可形成胚胎，該胚胎被稱為 ，將該胚胎移入代孕母牛的_中，通過(guò)培育可達(dá)到目的。（2）一般來(lái)說(shuō)，要想大量獲得這種克隆牛比較難，原因之一是卵母細(xì)胞的數(shù)量_，為解決這一問(wèn)題，可以用_激素處理B品種母牛。（3）克隆牛的產(chǎn)生說(shuō)明 具有全能性?？寺∨５男誀钪饕憩F(xiàn)_品種牛的特征。由A、B兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比，

2、雜交牛細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來(lái)自_個(gè)親本，克隆牛和雜交牛的遺傳物質(zhì)組成_（相同，不同）。,細(xì)胞核,去核,重組胚胎,子宮,不足,促性腺,動(dòng)物體細(xì)胞核,A,兩,不同,2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程,2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體,2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體,一、動(dòng)物細(xì)胞融合,1.概念：,動(dòng)物細(xì)胞融合（cell fusion）也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。,融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳物質(zhì)的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。,纖維素酶果膠酶,植物細(xì)胞A,原生質(zhì)體融合,離心、 振動(dòng)、 電刺激; 聚乙二醇,再生細(xì)胞壁,雜種細(xì)胞,脫分化,愈傷組織,雜種植株,篩選,再分化,植物

3、體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖,去除細(xì)胞壁,原生質(zhì)體,植物細(xì)胞B,雜種細(xì)胞,植物細(xì)胞融合,植物組織培養(yǎng),細(xì)胞膜的流動(dòng)性,植物細(xì)胞的全能性,一、動(dòng)物細(xì)胞融合,3.誘導(dǎo)方法：,物理法：,化學(xué)法：,生物法：,滅活的病毒,電激等,聚乙二醇（PEG)等,仙臺(tái)病毒,喪失感染性,（不感染細(xì)胞）,保留融合活性,（誘導(dǎo)細(xì)胞融合）,2.原理：,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,4.融合過(guò)程：,取不同DNA的細(xì)胞,滅活的病毒誘導(dǎo),細(xì)胞融合,雜交細(xì)胞,一、動(dòng)物細(xì)胞融合,5.意義：,克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）成為可能。,6.應(yīng)用：,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段； 特別是利用

4、雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體,植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較,細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,獲得雜種植株,獲得雜交細(xì)胞,物理（離心、振蕩、 電刺激） 化學(xué)（聚乙二醇）,物理、化學(xué)方法（同左） 滅活的病毒,去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合,纖維素酶、果膠酶,胰蛋白酶,1能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是 A.離心 B.滅活的病毒 C.電刺激 D.振動(dòng) 2.培育克隆牛的過(guò)程中，如果供體細(xì)胞來(lái)自同一頭牛，培育出的這些個(gè)體在性狀上也不完全相同，分析其原因，下列說(shuō)法不正確的是 A性狀變異可由環(huán)境條件引起 B.基因可能會(huì)發(fā)生突變 C.受體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因不同 D.細(xì)胞

5、核基因發(fā)生了重組,B,D,3.在動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是 A結(jié)果是相同的 B雜種細(xì)胞的形成過(guò)程基本相同 C操作過(guò)程中酶的作用相同 D誘導(dǎo)融合的手段相同 4.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用是 A制備單克隆抗體 B制備大量的動(dòng)物細(xì)胞 C制備胚胎 D進(jìn)行細(xì)胞核移植,A,二、單克隆抗體,1）抗體是怎樣產(chǎn)生的、化學(xué)本質(zhì)、分布？ 2）傳統(tǒng)的抗體是怎樣生產(chǎn)出來(lái)的？ 它有什么缺陷？ 3） B淋巴細(xì)胞分泌抗體有什么特點(diǎn)？,P52最后一段,每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。,感 應(yīng) 階 段,反 應(yīng) 階 段,效應(yīng)階段,抗原,吞噬細(xì)胞,T細(xì)胞,B細(xì)胞,效應(yīng)B細(xì)胞（漿細(xì)胞）,記憶細(xì)胞,抗體,抗原

6、與抗體特異性結(jié)合,吞噬細(xì)胞消化,增殖、分化,淋巴因子,二次刺激,被吞噬,呈遞抗原，產(chǎn)生淋巴因子,增殖、分化,暴露并呈遞特異抗原,體液免疫,形成沉淀或細(xì)胞集團(tuán),二、單克隆抗體,1.概念：,用單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖（克?。┬纬杉?xì)胞群，這樣的細(xì)胞群就有可能生產(chǎn)出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，即單克隆抗體。,思考討論: 體外培養(yǎng)條件下，一個(gè)B淋巴細(xì)胞是不可能無(wú)限增殖的，怎樣解決這一問(wèn)題呢？,獲取B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,融合細(xì)胞,同種細(xì)胞相互融合,未融合細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞,抗體檢驗(yàn)、篩選,分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,得到單克隆抗體,選擇性培養(yǎng)基篩選,滅活病毒誘導(dǎo),體外培養(yǎng)或注入小鼠腹腔,2

7、、過(guò)程,1）本過(guò)程利用了哪些原理？,2）為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？,思考：,免疫學(xué)原理、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖,這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體,3）整個(gè)制備過(guò)程為何要經(jīng)過(guò)兩次篩選?,思考：,第一次篩選得到雜交瘤細(xì)胞。 第二次（重復(fù)進(jìn)行）篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。,二、單克隆抗體,3.單克隆抗體的應(yīng)用,與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體產(chǎn)量高，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯。,1）作為診斷試劑,2）治療疾病和制成“生物導(dǎo)彈”用于運(yùn)載藥物,（準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速）,1.動(dòng)物細(xì)胞融合

8、與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（ ） A. 誘導(dǎo)融合的方法完全相同 B. 所用的技術(shù)手段基本相同 C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成雜種細(xì)胞,D,2.動(dòng)物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)融合決定于 ( )A.細(xì)胞膜的流動(dòng)性 B.細(xì)胞膜的選擇透過(guò)性C.細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)性 D.細(xì)胞質(zhì)酶的活性,A,3. 單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選雜交細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（ ） 淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 A. B.C. D.,C,4.“生物導(dǎo)彈”是指（ ） A.單克隆抗體 B.雜交瘤細(xì)

9、胞 C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞 D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物,D,5.將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合,可使融合的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體,其依據(jù)是( )(雙選) A.B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無(wú)限增殖 B.B淋巴細(xì)胞只有與骨髓瘤細(xì)胞融合后才能產(chǎn)生抗體 C.骨髓瘤細(xì)胞可以無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體 D.骨髓瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無(wú)限增殖,AC,6.單克隆抗體的制備過(guò)程用到了下列哪些細(xì)胞工程技術(shù)（ ）（雙選） A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) B.動(dòng)物細(xì)胞融合 C.胚胎移植 D.核移植,AB,7.A、B細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞,請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:,(1)若A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞B細(xì)胞為淋巴細(xì)胞,那么D細(xì)胞稱為 細(xì)

10、胞,D細(xì)胞具有兩個(gè)親本細(xì)胞的特征,一方面因具有骨髓瘤細(xì)胞的 性質(zhì),通過(guò) 方式產(chǎn)生大量細(xì)胞,我們稱之為 過(guò)程;另一方面能分泌大量的抗體,我們把該過(guò)程分泌的抗體稱 .,雜交瘤,連續(xù)分裂,有絲分裂,單克隆,單克隆抗體,(2)D細(xì)胞中產(chǎn)生的抗體其化學(xué)本質(zhì)是 ,合成該物質(zhì)的場(chǎng)所是 ,它是由 控制合成的,合成過(guò)程包括 和 兩個(gè)重要步驟.,球蛋白,核糖體,基因,轉(zhuǎn)錄,翻譯,7.A、B細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞,請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:,(3)D細(xì)胞中產(chǎn)生的抗體具有 作用,與血清抗體相比其優(yōu)越之處在于 強(qiáng) 高.,免疫,特異性,靈敏度,(4)若A為人細(xì)胞,B為鼠細(xì)胞,用同位素標(biāo)記A細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì),B不標(biāo)記,在C細(xì)胞時(shí),檢測(cè)結(jié)果發(fā)

11、現(xiàn)整個(gè)細(xì)胞一半有放射性另一半沒有.在D細(xì)胞時(shí),檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)整個(gè)細(xì)胞都有放射性,請(qǐng)解釋原因 .,構(gòu)成細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)分子大都可以流動(dòng),細(xì)胞工程,植物細(xì)胞工程,動(dòng)物細(xì)胞工程,植物細(xì)胞工程的基本技術(shù),植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用,植物組織培養(yǎng),植物體細(xì)胞雜交,原理,過(guò)程,知識(shí)延伸,過(guò)程,意義,知識(shí)延伸,植物繁殖的新途徑,作物新品種的培育,細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),動(dòng)物細(xì)胞核移植,動(dòng)物細(xì)胞融合,單克隆抗體,過(guò)程、,概念、,條件、,應(yīng)用,概念、,過(guò)程、,應(yīng)用、,存在問(wèn)題,原理、,過(guò)程、,意義、,應(yīng)用,原理、,過(guò)程、,特點(diǎn)、,應(yīng)用,1.利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體，下

12、列相關(guān)敘述正確的是（ ） A.把純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體 B.體外培養(yǎng)單個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體 C.將等量效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞 D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者,D,鞏固練習(xí),2.在植物細(xì)胞工程中，當(dāng)原生質(zhì)體融合成一個(gè)細(xì)胞后，需要誘導(dǎo)產(chǎn)生出細(xì)胞壁，參與該過(guò)程的細(xì)胞器有（ ） A.葉綠體、高爾基體 B.線粒體、高爾基體 C.葉綠體、線粒體 D.線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),B,3.A種植物細(xì)胞（基因型Aa），B種植物細(xì)胞（基因型為Bb）；去掉細(xì)胞壁后，

13、誘導(dǎo)兩種細(xì)胞的原生質(zhì)體融合，形成單核的雜種細(xì)胞，再經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)得到雜種植株，則該雜種植株是（ ） A.二倍體，基因型為AaBb B.二倍體，基因型為AAaaBBbb C.四倍體，基因型為AaBb D.四倍體，基因型為AaaaBbbb,C,8.“白菜甘藍(lán)”是用細(xì)胞工程的方法培育出來(lái)的蔬菜新品種，它具有生長(zhǎng)期短和耐儲(chǔ)藏等優(yōu)點(diǎn)。下圖是“白菜甘藍(lán)”的培育過(guò)程示意圖，他們的基因型分別為AaBB、ccDd，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：,在上述過(guò)程中，實(shí)現(xiàn)過(guò)程常用的物質(zhì)為。 (2)過(guò)程是_ _，該過(guò)程的誘導(dǎo)方法有物理法和化學(xué)法兩大類過(guò)程。若用化學(xué)法，所用化學(xué)試劑名稱： ，該過(guò)程中獲得的融合細(xì)胞的基因型為： 。 (3)過(guò)

14、程是細(xì)胞壁的再生過(guò)程，與此過(guò)程密切相關(guān)的細(xì)胞器是_ _。 (4)已知白菜細(xì)胞中含2M條染色體，甘藍(lán)細(xì)胞中含有2N條染色體，則雜種植株體細(xì)胞染色體數(shù)為 。若對(duì)白菜和甘藍(lán)采用雜交育種方法能成功的話，得到的后代應(yīng)含 條染色體。,纖維素酶和果膠酶,原生質(zhì)體融合,聚乙二醇,AAaaBBBB、AaBBccDd、ccccDDdd,高爾基體,2M+2N,M+N,(5)通常情況下，白菜和甘藍(lán)有性雜交是不能成功的，原因是 。若要使有性雜交的后代可育，請(qǐng)寫出培育的大致過(guò)程？ 其基因型是 ，屬于倍體。 (6)過(guò)程中進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式是 ，該過(guò)程先誘導(dǎo)細(xì)胞分裂形成 ，再由它分化形成雜種植物幼苗。 (7)植物體細(xì)胞雜交方

15、法的優(yōu)點(diǎn)是 。,8.“白菜甘藍(lán)”是用細(xì)胞工程的方法培育出來(lái)的蔬菜新品種，它具有生長(zhǎng)期短和耐儲(chǔ)藏等優(yōu)點(diǎn)。下圖是“白菜甘藍(lán)”的培育過(guò)程示意圖，他們的基因型分別為AaBB、ccDd，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：,存在生殖隔離,取白菜和甘藍(lán)雜交所得的F1種子播種，待幼苗長(zhǎng)出后，用一定濃度的秋水仙素處理使之染色體加倍。,AABBccDD等,四,有絲分裂,愈傷組織,克服遠(yuǎn)緣雜交不親合的障礙,細(xì)胞工程,植物組織培養(yǎng),植物體細(xì)胞雜交,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),動(dòng)物細(xì)胞核移植,動(dòng)物細(xì)胞融合,單克隆抗體,作業(yè)：寫出細(xì)胞工程6項(xiàng)技術(shù)的流程圖,植物細(xì)胞工程,動(dòng)物細(xì)胞工程,植物組織培養(yǎng)的流程簡(jiǎn)圖,植物組織培養(yǎng)技術(shù)知識(shí)延伸：,植物的激素調(diào)節(jié)：,

16、有絲分裂過(guò)程,培養(yǎng)基需加入的激素：細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素,植物細(xì)胞的增殖：,基因的選擇性表達(dá),單倍體育種,植物細(xì)胞的分化：,植物細(xì)胞 A(馬鈴薯),植物細(xì)胞 B（番茄）,原生質(zhì)體 A,原生質(zhì)體 B,再生出細(xì)胞壁,去除細(xì)胞壁,原生質(zhì)體融合的過(guò)程,雜種植株(馬鈴薯番茄),脫分化,愈傷組織,雜種細(xì)胞,植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過(guò)程,再分化,植物體細(xì)胞雜交技術(shù)知識(shí)延伸：,細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞壁的成分、 參與新細(xì)胞壁形成的細(xì)胞器,動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官,細(xì)胞懸浮液,10代細(xì)胞,50代細(xì)胞,無(wú)限傳代,原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng),細(xì)胞株,細(xì)胞系,剪碎,胰蛋白酶處理,培養(yǎng)液培養(yǎng),細(xì)胞貼壁、接觸抑制,培養(yǎng)液培養(yǎng),培養(yǎng)液培養(yǎng),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程:,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí)延伸：,細(xì)胞株、細(xì)胞系的本質(zhì)理解,內(nèi)環(huán)境的組成成分和理化性質(zhì),癌細(xì)胞的特點(diǎn),克隆羊培育過(guò)程,黑面綿羊去核卵細(xì)胞,白面綿羊乳腺細(xì)胞核,重組細(xì)胞,早期胚胎,另一頭綿羊的子宮,克隆羊多利,動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程：,取不同DNA的細(xì)胞,滅活的病毒誘導(dǎo),細(xì)胞融合,雜