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文檔簡介
1、年云南省微生物專業(yè)(第二次)室間質(zhì)評小結(jié)號標(biāo)本:惡臭假單胞菌。嚴(yán)格需氧,有鞭毛,無芽胞、無莢膜的革蘭陰性桿菌,有些菌株為卵圓形,單端叢毛菌,運動活潑,最適生長溫度2530, 42不生長, 4生長不定,菌落與銅綠假單胞菌相似。氧化酶陽性,試驗為氧化型,借此可與腸桿菌科細(xì)菌相鑒別。鑒定中注意與其他假單胞菌相區(qū)別,惡臭假單胞菌只產(chǎn)生熒光素(即青膿素),而不產(chǎn)生綠膿素,且 42不生長,借此可與銅綠假單胞菌區(qū)別;惡臭假單胞菌不液化明膠、不產(chǎn)生卵磷酯酶、陳舊培養(yǎng)物上有腥臭味,借此可與熒光假單胞菌相區(qū)別。惡臭假單胞菌為魚的一種致病菌,常從腐敗的魚中檢出, 可作為人類咽部的正常菌群, 是人類少見的條件致病菌,
2、 偶從人類尿道感染、 皮膚感染和骨髓炎標(biāo)本中分離出,分泌物有腥臭味; 也可引起化膿性關(guān)節(jié)炎和菌血癥等。號標(biāo)本: 熱帶假絲酵母菌。 屬于假絲酵母菌屬。 熱帶假絲酵母菌在玉米粉吐溫培養(yǎng)基上培養(yǎng)天后涂片, 可見大量菌絲,菌絲上端有芽生孢子,可分枝或呈短鏈狀,在隔膜處和隔膜之前形成芽; 在培養(yǎng)基上培養(yǎng)天后形成乳白色到奶油色無光澤或稍有光澤的菌落;在顯色培養(yǎng)基上菌落成藍(lán)色。目前省內(nèi)大多數(shù)實驗室采用了顯色培養(yǎng)基來初次分離和鑒別假絲酵母菌屬。該顯色培養(yǎng)基可對臨床常見的幾種假絲酵母菌進(jìn)行鑒別,如白假絲酵母菌、 熱帶假絲酵母菌、克柔假絲酵母菌、光滑假絲酵母菌(不同產(chǎn)家的顏色判定標(biāo)準(zhǔn)不同),但對于白色的假絲酵母菌
3、, 如近平滑, 則需要與隱球酵母屬和其他酵母菌屬進(jìn)行鑒別,通常的方法可以用墨汁染色和脲酶試驗將近平滑假絲酵母與隱球菌屬區(qū)分開,前者都為陰性, 與其他酶母菌屬的鑒別就要借此很多生化試驗和形態(tài)學(xué)來區(qū)分。熱帶假絲酵母菌應(yīng)注意與偽熱帶假絲酵母菌的鑒別,前者不同化乳糖和蜜三糖,同化海藻糖, 芽管試驗形成類似白假絲酵母菌樣的芽管(但萌發(fā)出的是帶縊痕的芽,不是真正的芽管)。值得一提的是,微觀檢測對酵母菌屬的鑒別有至關(guān)重要的作用,可觀察有助于識別的結(jié)構(gòu):、生物體的大小和形狀; 、生芽位置;、莢膜的有無;、胞壁的厚度; 、假菌絲的存在; 、分生節(jié)孢子的存在,但由于真菌種類繁多,鏡下形態(tài)觀察需有豐富的臨床經(jīng)驗才可
4、做出正確判斷,因此借此一些商品化的鑒定手段是可行的,如采用真菌鑒定板條、 細(xì)菌鑒定儀等。 本次標(biāo)本在顯色培養(yǎng)基中 (科碼嘉) 呈現(xiàn)為藍(lán)色菌落,不難鑒別,因此幾乎所有實驗室回報的結(jié)果都正確。號標(biāo)本:溶血隱秘桿菌。 屬于棒桿菌科中的隱秘桿菌屬。 隱秘桿菌屬有個種,其中與醫(yī)學(xué)相關(guān)的有溶血隱秘桿菌、 化膿隱秘桿菌 (最近從放線菌中重新劃分出來的) 和伯爾德隱秘桿菌。該菌為革蘭陽性,呈多形性、棒狀,有時呈顆粒狀和念珠狀,類似小鏈球菌,無鞭毛,無抗酸性。該菌在環(huán)境中生長良好,在血瓊脂平板上形成直徑的白色小菌落,有兩種菌落形態(tài),即粗糙型(主要從呼吸道分離出來)和光滑型(主要從傷口分離),小時后形成狹窄的溶血
5、環(huán)(但溶血環(huán)不如化膿隱秘桿菌深和寬)。生化特征為:觸酶陰性,硝酸鹽陰性,無動力,不分解木糖。 值得注意的是該菌屬曾經(jīng)歸放在放線菌屬和棒狀桿菌屬,因脂肪酸分析顯示更接近前兩者。 本次標(biāo)本鏡下形態(tài)與放線菌屬、 諾卡菌屬形態(tài)很相似, 因此有些實驗室報告為星形諾卡菌和放線菌(均不得分) ,三者可以用觸酶、脲酶、弱抗酸染色試驗進(jìn)行鑒別(見表)。還有部分實驗室報告為紅斑丹毒絲菌而未得分,那么如何區(qū)分兩者呢?最簡便的方法是通過血培養(yǎng)上的溶血情況和產(chǎn)生與否進(jìn)行區(qū)分,紅斑丹毒絲菌在血培養(yǎng)板上呈現(xiàn)為溶血或不溶血, 產(chǎn),而溶血隱秘桿菌為溶血、不產(chǎn)。溶血穩(wěn)秘桿菌還需與其他隱秘桿菌相區(qū)別,見表,也可通過 系統(tǒng)準(zhǔn)確地鑒定
6、隱秘桿菌中與醫(yī)學(xué)相關(guān)的三個種。此外,對鑒定溶血隱秘桿菌有主要作用的是所謂的逆向反應(yīng), 在這個現(xiàn)象中起作用的蛋白質(zhì)是一種由溶血穩(wěn)秘桿菌1 / 3排出的磷脂酶。 溶血隱秘桿菌可引起大齡兒童咽炎、傷口及軟組織感染、骨髓炎、心內(nèi)膜炎等。本菌治療一般選用紅霉素、青霉素、 第一代頭孢菌素或萬古霉素等抗生素,但所有內(nèi)酰胺、 利福平和四環(huán)素對隱秘桿菌的都很低, 而大環(huán)內(nèi)酯類對其有很強(qiáng)的作用,因此可將大環(huán)內(nèi)酯類與內(nèi)酰胺抗生素交替使用來治療感染。表隱秘桿菌屬、放線菌屬和諾卡菌屬鑒別的關(guān)鍵性試驗菌名觸酶脲酶(弱)抗酸染色隱秘桿菌屬(與醫(yī)學(xué)相關(guān)的種)放線菌屬諾卡菌屬表 隱秘桿菌屬鑒別的關(guān)鍵性試驗菌名 七葉苷 葡萄糖
7、麥芽糖 蔗糖 苷露醇 木糖溶血隱秘桿菌化膿隱秘桿菌伯爾德隱秘桿菌注:“”為以上菌株陽性, “”為以上菌株陰性, “”為菌株陽性。號標(biāo)本:大腸埃希氏菌。為腸出血性大腸桿菌()的主要血清型。腸出血性大腸桿菌也是大腸桿菌的一個亞型,又細(xì)分為、血清型,主要致病菌株為,可引起感染性腹瀉,因能引起人類的出血性腸炎而得名。在年一次出血性結(jié)腸炎流行中被分離出。該菌在菌落形態(tài)和生長特性上與普通的大腸埃希菌幾乎沒有區(qū)別,主要鑒別試驗為大腸埃希氏菌不分解山梨醇,因此實驗室可用自制或商品的山梨醇麥康凱平板進(jìn)行該菌的篩選:大腸埃希氏菌在平板上呈現(xiàn)為無色菌落, 而普通大腸埃希菌產(chǎn)生紅色菌落;也可通過科碼嘉顯色平板進(jìn)行篩選
8、:大腸埃希氏菌呈紫色菌落; 目前還有一種商品化的大腸埃希氏菌抗原檢測試劑盒可用于檢測糞便標(biāo)本。,不發(fā)酵山梨醇或遲發(fā)酵為本菌的主要特征。但需注意的是該菌最有力的鑒定依據(jù)仍然為血清分型。 大腸埃希氏菌與致瀉性大腸埃希氏菌產(chǎn)生的毒素相似,即類志賀氏毒素, 也叫做細(xì)胞毒素, 這類大腸埃希氏菌在南美和歐洲是很常見,在發(fā)展中國家該血清型也是血性腹腹瀉的常見病原菌。 當(dāng)攝入腸出血性大腸埃希菌后,即在大腸中產(chǎn)生這類志賀毒素,它們可直接損傷粘膜, 對腸壁上血管內(nèi)皮細(xì)胞具有毒性作用;如果被吸收, 則對其他血管內(nèi)皮細(xì)胞 (例如腎臟 )產(chǎn)生毒性作用。其主要臨床癥狀為突發(fā)性腹痛、血性糞便(初期為水樣瀉)、低燒或不發(fā)熱,
9、 嚴(yán)重患者可顯現(xiàn)出血性腸炎, 甚至溶血性尿毒綜合征。該菌的治療與普通大腸埃希氏菌引起的感染治療方法一致。因此,結(jié)合年藥敏標(biāo)準(zhǔn)和臨床用藥習(xí)慣,本次藥敏試驗考核了以下幾個藥物:氨芐西林(分)、慶大霉素(分) 、復(fù)方新諾明左氧氟沙星(任一藥物正確得分)、頭孢呋辛阿米卡星 (任一藥物正確得分) 。本次標(biāo)本中大腸埃希氏菌為一個全敏感菌株,這與相關(guān)統(tǒng)計數(shù)據(jù)是相符的 (直至最近,大腸埃希氏菌對抗生素一律都是敏感的)。絕大多數(shù)實驗室鑒定和藥敏都正確,但有些實驗室盡管對考核的這幾個藥物檢測為敏感,而有些未考核藥物卻報告為耐藥,還有極個別實驗室報告為產(chǎn)的大腸埃希菌,需要查找原因并改進(jìn)。號標(biāo)本:遲鈍愛德華菌。 屬于
10、腸桿菌科愛德華菌屬,該菌屬含個種,其中遲鈍愛德華菌是唯一與人類感染相關(guān)的種。該菌為革蘭陰性桿菌,有周鞭毛,有動力,無芽胞,無莢膜;在血2 / 3瓊脂平板上 35培養(yǎng)小時后形成圓形、濕潤、光滑、灰白色的菌落。由于該菌不分解乳糖,在麥康凱瓊脂平板上形成無色半透明、濕潤、光滑的菌落,故需與非發(fā)酵菌相鑒別,關(guān)鍵性鑒別試驗為試驗: 遲鈍愛德華菌為發(fā)酵型,而非發(fā)酵菌為氧化型或產(chǎn)堿型。該菌的很多生化反應(yīng)和菌落形態(tài)都與不分解乳糖的大腸埃希氏菌相似,兩者的關(guān)鍵性鑒別試驗為產(chǎn)生情況:遲鈍愛德華菌可產(chǎn), 而后者多數(shù)不產(chǎn)。 但由于有極少數(shù)的大腸埃希菌也可產(chǎn)少量,故還需要借助其他試驗進(jìn)行鑒別,如木糖、 山梨醇和黏液酸發(fā)
11、酵試驗: 遲鈍愛德華菌可發(fā)酵這三種物質(zhì),而大腸埃希菌則相反。遲鈍愛德華菌與沙門菌屬、志賀菌屬的鑒別主要根據(jù)吲哚試驗和血清凝集試驗: 前者吲哚試驗陽性、 不與沙門菌或志賀菌抗血清發(fā)生凝集,而后二者吲哚試驗陽性、 可與相應(yīng)菌屬的抗血清發(fā)生凝集。遲鈍愛德華菌與其他愛德華菌的鑒別見表。遲鈍愛德華菌存在于自然界中,是一種條件致病菌, 其最顯著的臨床特征是類沙門氏菌腸炎,在所有的年齡組中都能發(fā)病,但小孩和老人更易感染, 且感染多與水和其他環(huán)境事故導(dǎo)致的外傷后感染有關(guān)。 該菌對多黏菌素具有抗性。如果需要對該菌感染進(jìn)行抗生素治療,氨芐青霉素、增效聯(lián)磺片和環(huán)丙沙星都是有效的。因此,結(jié)合年中腸桿菌科的藥敏標(biāo)準(zhǔn),本次選擇性考核了以下幾個藥物的敏感性:氨芐西林 (分)、慶大霉素(分)、左氧氟沙星復(fù)方新諾明 (任一藥物正確得分) 、頭孢他啶氨曲南(任一藥物正確得分)、頭孢呋辛亞胺培南 (任一藥物正確得分)。本標(biāo)本為一個全敏菌株, 以上藥物均為敏感。 絕大多數(shù)實驗室鑒定和藥敏都正確。表 愛德華菌屬鑒別的關(guān)鍵性
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