1、第十章 血脂及血漿脂蛋白檢驗,第一節(jié)概述 第二節(jié)血脂、脂蛋白及載脂蛋白測定,本章內(nèi)容概要,教學(xué)目標(biāo)與要求,1、掌握脂蛋白的分類及其主要功能；高脂血癥的分型及血液生化特點；血脂、脂蛋白與載脂蛋白測定的原理與方法。,2、熟悉各種脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu)要點；異常脂蛋白血癥的原因；血脂檢查前應(yīng)注意的問題。,3、了解載脂蛋白的種類與生理功能；各個檢驗項目的臨床意義與應(yīng)用。,第一節(jié) 概 述 一、血脂及血漿脂蛋白 （一）血漿脂蛋白的分類 （二）血漿脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu) （三）載脂蛋白 （四）脂蛋白受體 （五）膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白 (六)血漿脂蛋白代謝 二、脂蛋白代謝紊亂 （一）高脂蛋白血癥 (二) 低脂蛋白血癥,一、

2、血脂及血漿脂蛋白,血脂：血漿脂類即血脂。包括游離膽固醇(free cholesterol，F(xiàn)C)、膽固醇酯(cholesterol ester，CE)、磷脂(phospholipid，PL)、甘油三(triacylglycerol，TG)、糖酯、游離脂肪酸(free fatty acid，F(xiàn)FA)等。,定義：,脂蛋白：脂類難溶于水，正常血漿脂類物質(zhì)與蛋白質(zhì)結(jié)合成脂蛋白的形式存在。,（一）血漿脂蛋白的分類,超速離心法：CM 、 VLDL 、 LDL 、 HDL,電泳法： CM 、前 - LP、-LP與-LP,超速離心法(ultra centrifugation method)亦稱密度梯度法(de

3、nsity-gradient method) 依據(jù)不同脂蛋白的密度差異，在離心時漂浮速率不同而進(jìn)行分離。Sf (Svedberg floatation rate),電泳法 (electrophoresis method) 依據(jù)血漿脂蛋白分子中蛋白質(zhì)表面電荷多少的不同而分離。,（二）血漿脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu),組成：,蛋白質(zhì)、甘油三酯、磷脂（phospholipid，PL）、游離膽固醇（free cholesterol ，F(xiàn)C）及膽固醇酯（cholesterol ester，CE）等成分組成。,結(jié)構(gòu)：,大致為球形顆粒，由兩大部分組成，即疏水性的內(nèi)核與親水性的外殼（圖10-1）。內(nèi)核由不同量的CE與T

4、G組成，表層由載脂蛋白、PL及FC組成，F(xiàn)C及PL的極性基團(tuán)向外露在血漿中，載脂蛋白是兼性化合物，它的疏水部分掩蔽在脂蛋白中，而親水部分突出于脂蛋白顆粒的表面。,、乳糜 微粒（chylomicron,CM） 物理性質(zhì)： 密度：0.95 g/ml Sf400 直徑：80500nm 電 泳時處于點樣點 化學(xué)組成 ： 載脂蛋白1-2 ： ApoB48、 A、C、。 脂類 98-99：TG 85-95、磷脂 3-8，ch 2-8 合成部位： 小腸粘膜細(xì)胞（十二指腸、空腸） 功 能： 運輸外源性TG到全身各組織,應(yīng)用：CM顆粒大，一般不致動脈粥樣硬化, 但易誘發(fā)胰腺炎。近年研究表明, CM殘 粒(代謝殘

5、骸)可被巨噬細(xì)胞表面受體所識別而攝取, 因而可能與AS有關(guān)。,、極低密度脂蛋白（very low density lipoprotein ,VLDL ）,物理性質(zhì)：密度0.951.006 g/ml Sf 20400 直徑30 80nm 電泳時pre-LP 位 化學(xué)組成：載脂蛋白5-10: ApoB100、C、E 脂類90-95 （TG 50-70， CH 10-25 PL 15-20）,合成部位：肝細(xì)胞 功 能：運輸內(nèi)源性TG的主要形式 應(yīng) 用：血漿VLDL水平升高已被確認(rèn)為冠心病 的危險因子。,、低密度脂蛋白（low density lipoprotein ,LDL）,物理性質(zhì)：密度1.00

6、61.063g/ml 、 Sf 0-20 電泳時處于-LP 化學(xué)組成：載脂蛋白2025: ApoB100 、脂類 75-80（TG 5-10% 、 CH 45-50% PL 20%） 合成部位： 在血漿中由VLDL經(jīng)過IDL轉(zhuǎn)化而來（主要） 一部分肝細(xì)胞合成（次要）,功能：攜帶膽固醇由肝臟轉(zhuǎn)運到全身血漿中 應(yīng)用：LDL相對較小,易于穿過動脈內(nèi)膜，是首要的致AS性脂蛋白。已證明AS斑塊中的膽固醇主要來自循環(huán)中的LDL。,、高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL）,物理性質(zhì)： 密度1.063-1.21 g/ml , Sf 0 ,直徑 7-10 nm,電泳時處位于-L

7、P 化學(xué)組成： 載脂蛋白45-55, ( ApoA、A、D),脂類 45-55（TG 2-7,CH 18-25 ,PL 26-32）,HDL按密度大小可分為HDL1、HDL2與HDL3。HDL1 又稱為HDLc，僅在攝取高膽固醇膳食后才在血中 出現(xiàn)，健康人血漿中主要含HDL2與HDL3。 合成部位： 1.一部分肝細(xì)胞合成（主要），小腸也可合成 2.VLDLHDL 功能： 將肝外組織細(xì)胞表面的膽固醇攝入并酯化再轉(zhuǎn)運 到肝內(nèi)的載體進(jìn)行代謝。 應(yīng)用：HDL有防止動脈粥樣硬化的作用。 HDL被認(rèn)為是一種抗AS的血漿脂蛋白,是冠心病的保護(hù)因子。,5、脂蛋白(a)LP-(a)，Lipoprotein(a)

8、 1963年被發(fā)現(xiàn)。組成與結(jié)構(gòu)類似于LDL，但分子量、顆粒較大，電泳較慢。 脂類：TG、PL、FC、CE 組成 蛋白質(zhì)：ApoB100、Apo(a)(特色)結(jié)構(gòu)：類似于LDL,臨床意義： 血漿LP(a)是導(dǎo)致As的獨立危險因子,因Apo(a)與纖溶酶原具有高度同源性，在纖溶系統(tǒng)多個環(huán)節(jié)發(fā)揮作用，從而影響As的發(fā)生與發(fā)展。,TGrich Lipoprotein,Chrich Lipoprotein,血 漿 脂 蛋 白 的 組 成 特 點,（三）載脂蛋白,脂蛋白的蛋白部分稱為載脂蛋白(apolipoprotein，Apo),定義：,種類：,按1972年Alaupovic建議的命名方法，用英文字母順

9、序編碼，分為ApoA、B、C、D、E、F、G、H、J等。由于氨基酸組成的差異，每一型又可分若干亞型。, apoA： 目前發(fā)現(xiàn)有四種亞型，即apoA，apoA，apoA，apoA。 apoA與apoA主要存在于HDL中。, apoB： 有兩種亞型，即在肝細(xì)胞內(nèi)合成的apoB100；小腸粘膜細(xì)胞內(nèi)合成的apoB48。 apoB100主要存在于LDL中，而apoB48主要存在于CM中。, apoC： 有四種亞型，即apoC，apoC，apoC，apoC。VLDL主要存在的載脂蛋白是apoB100與apoC。 apoD： 只有一種。 apoE： 有三種亞型，即apoE2，apoE3，apoE4。,功能

10、： 轉(zhuǎn)運脂類物質(zhì)。 作為脂類代謝酶的調(diào)節(jié)劑： LCAT可被apoA，apoA，apoC等激活，也可被apoA所抑制。 LpL（脂蛋白脂肪酶）可被apoC所激活，apoA也有輔助激活作用；也可被apoC所抑制。 HL（肝脂酶）可被apoA激活。, 作為脂蛋白受體的識別標(biāo)記： apoB可被細(xì)胞膜上的apoB，E受體（LDL受體）所識別； apoE可被細(xì)胞膜上的apoB，E受體與apoE受體（LDL受體相關(guān)蛋白，LRP）所識別。 apoA參與HDL受體的識別。, 參與脂質(zhì)交換： 膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白（CETP）可促進(jìn)膽固醇酯由HDL轉(zhuǎn)移至VLDL與LDL； 磷脂轉(zhuǎn)運蛋白（PTP）可促進(jìn)磷脂由CM與VLD

11、L轉(zhuǎn)移至HDL。 作為連接蛋白： apoD可作為LCAT與apoA之間的連接蛋白，構(gòu)成apoA-apoD-LCAT復(fù)合物，與膽固醇的酯化與轉(zhuǎn)運有關(guān)。,人血漿載脂蛋白的結(jié)構(gòu)、功能及含量,（四）脂蛋白受體,定義：,脂蛋白受體是一類位于細(xì)胞膜上的糖蛋白。它能以高度的親與方式與相應(yīng)的脂蛋白配體作用，從而介導(dǎo)細(xì)胞對脂蛋白的攝取與代謝，進(jìn)一步調(diào)節(jié)細(xì)胞外脂蛋白的水平。,脂蛋白與脂蛋白受體的作用：,不僅是運送脂蛋白至細(xì)胞所必需，也是從血與外周組織中有效清除具有潛在致動脈粥樣硬化的脂蛋白所必需的。,種類：,已有很多種，主要有LDL受體、殘粒受體（remnant receptor）及清道夫受體（scavenger

12、 receptor）。,LDL受體： 不僅能識別ApoB100，也可識別ApoE，在細(xì)胞結(jié)合、攝取與降解LDL及其它含ApoB100的脂蛋白過程中起中介作用，對維持細(xì)胞與全身膽固醇平衡起重要作用。,功能,殘粒受體： 能識別ApoE，是清除血液循環(huán)中CM殘粒與-VLDL殘粒的主要受體，它也能結(jié)合含ApoE的HDL。,清道夫受體： 主要存在于巨噬細(xì)胞表面,介導(dǎo)修飾LDL(包括氧化LDL與-VLDL)從血液循環(huán)中清除。,（五）膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白,定義：,血漿中脂蛋白部分含有一種特殊的轉(zhuǎn)運蛋白，能促進(jìn)血漿各脂蛋白間膽固醇酯、甘油三酯與磷脂的單向或雙向轉(zhuǎn)運與交換，這類特殊轉(zhuǎn)運蛋白稱脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白（lipid

13、 transfer protein,LTP）。,組成：,膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白（cholesterol ester transfer protein,CETP）,磷脂轉(zhuǎn)運蛋白（phospholipid transfer protein,PTP）,甘油三酯轉(zhuǎn)運蛋白（triglyceride transfer protein,TTP）,(六)血漿脂蛋白代謝,外源性代謝途徑：指食物中攝入的膽固醇與甘油三酯在 小腸中合成CM及CM代謝的過程 。,內(nèi)源性代謝途徑：指肝臟合成VLDL，然后轉(zhuǎn)變?yōu)镮DL與 LDL，并被肝臟或其它器官代謝的過程,膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運：HDL參與將膽固醇從外周組織運輸?shù)礁闻K的過程。,乳糜

14、微粒的代謝,將食物中的甘油三酯轉(zhuǎn)運至肝與脂肪組織（轉(zhuǎn)運外源性甘油三酯）。,CM的生理功能,VLDL的代謝,組裝形成 新生HDL,IDL,將肝合成的甘油三酯轉(zhuǎn)運至肝外組織 （轉(zhuǎn)運內(nèi)源性甘油三酯）。,VLDL的生理功能,LDL的代謝,攝入組織細(xì)胞的膽固醇具有以下功能： 抑制HMG-CoA還原酶的活性，調(diào)節(jié)膽固醇的合成； 抑制LDL受體的合成，調(diào)節(jié)外周組織對膽固醇的攝?。?激活A(yù)CAT，促進(jìn)組織細(xì)胞對膽固醇的酯化。,將膽固醇由肝轉(zhuǎn)運至肝外組織。,LDL的生理功能,HDL的代謝,將膽固醇由肝外組織轉(zhuǎn)運至肝 （膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運）。,HDL的生理功能,二、脂蛋白代謝紊亂,（一）高脂蛋白血癥,定義：,高脂血

15、癥（hyperlipidemia）是指血漿中膽固醇或/ 與甘油三酯水平升高。血漿脂類以血漿脂蛋白形式存在，因此，高脂血癥一定是高脂蛋白血癥（hyperlipoproteinemia）。,近年來，已逐漸認(rèn)識到血漿中HDL降低也是一種脂代謝紊亂。,從原因分類 原發(fā)性高脂蛋白血癥 繼發(fā)性高脂蛋白血癥,原發(fā)性高脂蛋白血癥 原發(fā)性高脂蛋白血癥是由遺傳因素造成蛋白質(zhì)缺陷引起的脂蛋白代謝紊亂，包括Apo、酶與受體的缺陷等幾種情況。1967年Fredrickson將原發(fā)性高脂蛋白血癥分為6種表型。,型高脂蛋白血癥（家族性高CM血癥） 1.發(fā)病原因： 常染色體隱性遺傳 （1）LPL遺傳性缺陷 （2） ApoC缺

16、乏 Apo C缺陷(缺乏或結(jié)構(gòu)異常) LPL活性 CM中的TG不能被水解 CM變成CM殘粒受阻 CM在血漿中堆積。 2.臨床表現(xiàn)： 常伴有視網(wǎng)膜止血癥、腹痛、胰腺炎、肝脾腫大等，發(fā)病多在兒童期。,3.生化特征： （1）血清外觀：乳白色混濁，4過夜，血漿上層出現(xiàn)“奶油樣”上層（由CM構(gòu)成），下層為透明至混濁。 （2）血脂分析：TG ，膽固醇正常或輕度增高。 （3）電泳圖譜：正常人無CM帶，此時有區(qū)帶深染。 （4）脂蛋白分析：CM （5）血漿LPL活性降低，肝脂酶正常，毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞LPL活性因其輔助因子ApoC缺乏而低下。,IIa型高脂蛋白血癥(家族性高膽固醇血 癥）,1.發(fā)病原因： 主要為L

17、DL受體缺陷，常染色體隱性遺傳 (1) LDL受體缺乏或減少 (2) LDL受體活性（與LDL結(jié)合能力）降低 (3) LDL受體入胞（內(nèi)吞）障礙，即 LDL受體可與LDL形成復(fù)合物，但不能被內(nèi)吞。 以上均導(dǎo)致LDL不能以正常速度進(jìn)入細(xì)胞而堆積于血漿中，久之則使LDL-Ch大量沉積在動脈管壁 AS。,2.臨床表現(xiàn)： 黃色瘤、角膜弓狀云、AS等，純合子患者在青春期即發(fā)生AS與冠心病，可致死。 3.生化特征： （1）血清外觀：透明，少有混濁 （2）血脂分析：膽固醇 ，TG正常。 （3）電泳圖譜：區(qū)帶深染、增寬 （4）脂蛋白分析：LDL ，ApoB ,b型高脂蛋白血癥（高-LP合并高 前-LP血癥，混

18、合型高脂蛋白血癥） 1.發(fā)病原因： 主要因ApoB100過多生成，導(dǎo)致血漿VLDL、LDL過量生成而分解并不加快，從而堆積。常染色體顯性遺傳。 2.臨床表現(xiàn)： b型與a的主要區(qū)別是前者LDL受體活性正常，患者多合并肥胖，糖代謝及胰島素分泌異常，易伴發(fā)黃色瘤及動脈粥樣硬化癥。,3.生化特征： (1）血清外觀：少有混濁 （2）血脂分析：膽固醇 、TG （3）電泳圖譜：-LP與Pre -LP區(qū)帶均深染，但兩者并不融合。 （4）脂蛋白分析： LDL 、 VLDL ,型高脂蛋白血癥(高-VLDL血癥，寬-脂蛋白血癥) 1.發(fā)病原因： 主要為ApoE異常所致，顯性遺傳 ApoE分為ApoE2、E3、E4等

19、，性質(zhì)上的差異主要在于與ApoE受體(VLDL受體等)的結(jié)合能力不同，E2幾乎不能與VLDL受體結(jié)合。正常人基因型多為ApoE3/E3，其與VLDL受體的結(jié)合力正常，但型患者多為ApoE2/E2型，其與VLDL受體的結(jié)合力大為降低，導(dǎo)致VLDL在血漿中堆積。,2.臨床癥狀黃色瘤，AS與冠心病等 3.生化特征： （1）血清外觀：混濁，表面薄層奶油層 （2）血脂分析：TG，Ch （3）電泳圖譜：出現(xiàn)-VLDL ；LP與Pre LP區(qū)帶連接在一起形成寬而深染的色帶，故稱寬-病。亦稱高-VLDL血癥。 （4）脂蛋白分析：IDL 、(-VLDL),型高脂蛋白血癥(家族性高TG血癥或高VLDL血癥) 本癥

20、為高脂蛋白血癥中常見的類型，我國一半以上的高脂蛋白血癥屬于此型。常染色體顯性遺傳。 1.發(fā)病原因： 由于VLDL合成亢進(jìn)與/或VLDL分解受阻。機(jī)制不詳。,2.生化特征： （1）血清外觀：混濁，4冰箱過夜無奶油層 （2）血脂分析 ：TG、Ch正?；蜉p度升高。 （3）電泳圖譜： Pre 深染， （4）脂蛋白分析： VLDL，所以稱高VLDL血癥 3.臨床表現(xiàn)： 多在成年人發(fā)現(xiàn)，青少年少見?；颊吆苌儆悬S色瘤等皮膚特點，易發(fā)生冠心病，但不如、型嚴(yán)重。其他的癥狀可有肥胖、胰島素抵抗、高胰島素血癥、葡萄糖耐量異常及高尿酸血癥等。,型高脂蛋白血癥(高CM與高前-LP血癥) 1.發(fā)病原因： ApoC LPL

21、活性 其它原因?qū)е碌腖PL活性 VLDL中的 CM、 TG降解受阻,2.臨床表現(xiàn)： 常于20歲前發(fā)病，家族史明顯者，丘疹狀黃色瘤的發(fā)病率可高達(dá)3050，并伴有胰腺炎、肝脾腫大；葡萄糖耐量異常、尿酸血癥以及缺血性心臟病等。 3. 生化特征： （1）血清外觀：上層奶油層、下層混濁。 （2）血脂分析：TG Ch 正?；?（3）電泳圖譜：可見CM及前脂蛋白深染 （4）脂蛋白：CM 、 VLDL ,繼發(fā)性高脂蛋白血癥(secondary hyperlipoproteinemia) 繼發(fā)性高脂蛋白血癥(secondary hyperlipoproteinemias)比原發(fā)性高脂蛋白血癥更為多見，成人的發(fā)病

22、率為35，常繼發(fā)于糖尿病、肝膽疾病與腎病等。過量攝入糖或飲酒也可引起繼發(fā)性高脂蛋白血癥。（1）糖尿病;（2）甲減; （3）腎病綜合征; （4）急性肝炎; （5）酗酒.,(二)低脂蛋白血癥(自學(xué)),1家族性低-脂蛋白血癥,2-脂蛋白缺乏血癥,3家族性低-脂蛋白血癥,4 Tangier病,第二節(jié) 血脂、脂蛋白及載脂蛋白測定 一、血清（漿）靜置試驗 二、血清（漿）總膽固醇測定 三、血清（漿）甘油三酯測定 四、血清（漿）脂蛋白測定 五、血清載脂蛋白測定,第二節(jié) 血脂、脂蛋白及載脂蛋白測定,目前臨床上開展的血脂測定項目包括TC、TG、HDL及其亞類膽固醇、LDL-C、Lp（a）以及部分載脂蛋白如ApoA

23、I、ApoB等。其中TC、TG、HDL-C、LDL-C測定是血脂測定的四個基本指標(biāo)。血漿4冰箱中過夜觀察其分層現(xiàn)象及清澈度可初步估計各種脂蛋白的變化狀況。血漿脂蛋白電泳結(jié)合TC、TG水平有助于高脂血癥分型。,概況：,血脂測定標(biāo)準(zhǔn)化：,血脂分析前變異來源于： 生物因素，如年齡、性別、種族等因素的個體差異。 生活方式，包括飲食習(xí)慣、吸煙、運動及應(yīng)激等。 臨床方面包括疾病或藥物引起的脂代謝改變。 血標(biāo)本采集與處理方面,準(zhǔn)確測定應(yīng)從分析前的準(zhǔn)備開始，包括受試者的準(zhǔn)備，標(biāo)本 采集，合格的試劑、校準(zhǔn)物的選用，檢測方法選擇。,方法學(xué)上應(yīng)該采用美國疾病控制中心（CDC）或中華醫(yī)學(xué)會檢驗分會推薦的操作方法。,一

24、、血清（漿）靜置試驗,將患者空腹12h后采集靜脈血分離出血清置4冰箱中過夜，然后觀察其分層現(xiàn)象及清澈度。,正常空腹血清應(yīng)清澈透明。,二、血清（漿）總膽固醇測定,化學(xué)法,酶 法,（一）化學(xué)測定法 由于操作較繁，不適于分析大批量標(biāo)本，且不適于自動分析，目前臨床少用。,(二)酶測定法,原理：,是用膽固醇酯酶(CEH)水解膽固醇酯生成脂肪酸與膽固醇，膽固醇被膽固醇氧化酶(cholesterol oxidase，COD)氧化生成4膽甾烯酮與H2O2，然后在過氧化物酶(POD)催化下， H2O2與4-氨基安替比林(4AAP)及酚(三者合稱PAP)結(jié)合，生成紅色醌亞胺。醌亞胺的最大吸收峰在500nm左右，吸

25、光度與標(biāo)本中的膽固醇含量成正比。反應(yīng)式如下：,評價：,優(yōu)點： 特異性好、靈敏度高，線性范圍寬。既可用于手工操作，也可自動化分析；既可作終點法檢測，也可作速率法檢測。 缺點： 某些膽固醇酯酶對膽固醇酯的水解不完全，造成結(jié)果偏低； 表面活性劑，如吐溫-40可以干擾膽固醇酯酶的作用，而聚乙烯醇6000可使結(jié)果提高1-2； 易受一些還原性物質(zhì)如尿酸、膽紅素、維生素C與谷 胱甘肽等的干擾。,參考值,血清參考值：3.05.20mmolL； 危險閾值： 5.206.20mmolL； 高膽固醇血癥：6.20mmolL,臨床意義,1、生理變化 （1）20歲以上，隨年齡增加而升高，20歲至40歲，男性高于女性；5

26、0歲以上，女性高于男性。70歲以上，男女均有下降趨勢； （2）城市人群高于農(nóng)村人群，可能與飲食、生活環(huán)境等有關(guān)； （3）長期高脂、高蛋白飲食可使血清膽固醇升高； （4）腦力勞動者高于體力勞動者，精神緊張也可使血清膽固醇升高。,臨床意義,2、病理變化 （1）TC增高 腎病綜合征，由于大量蛋白質(zhì)從尿液中丟失，機(jī)體代償性合成-脂蛋白增加的緣故； 糖尿病，由于糖尿病患者體內(nèi)乙酰CoA堆積，促進(jìn)膽固醇合成增加； 膽道梗阻，造成膽固醇排出減少； 甲狀腺功能減退，膽固醇轉(zhuǎn)變?yōu)槟懼釡p少，血清膽固醇增高。 （2）TC降低 常見于低脂蛋白血癥、貧血、敗血癥、甲狀腺功能亢進(jìn)、肝疾病、嚴(yán)重感染、營養(yǎng)不良、腸道吸收不

27、良與藥物治療過程中的溶血性黃疸及慢性消耗性疾病，如癌癥晚期等。,三、血清（漿）甘油三酯測定,化學(xué)法,酶 法,因操作步驟繁多、不能自動化等不適應(yīng)檢驗工作的發(fā)展而逐漸退出臨床實驗室。,（一）化學(xué)測定法,(二)酶測定法,1、磷酸甘油氧化酶法（GPO-PAP法） 原理,評價 優(yōu)點：酶試劑較穩(wěn)定，靈敏度高，線性范圍較寬。 缺點：膽紅素與維生素C可使測定結(jié)果偏低,2 乳酸脫氫酶法,原理：,評價： 優(yōu)點：結(jié)果準(zhǔn)確。 缺點：靈敏度較低，試劑也不太穩(wěn)定。,3甘油氧化酶法,原理：這是一種直接測定甘油的方法，分兩步反應(yīng)。第一步反應(yīng)：,第二步反應(yīng)：,評價：靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確。,參考值,正常參考范圍：0.55-1.70

28、mmol/L； 臨界閾值： 2.30mmol/L； 危險閾值： 4.50mmol/L。,臨床意義,1、血清TG增高： 常見于家族性脂類代謝紊亂、腎病綜合征、糖尿病、甲狀腺機(jī)能減退、急性胰腺炎、糖原累積病、膽道梗阻、酗酒等。 大量前瞻性的研究證實，富含TG的脂蛋白是CHD的獨立的危險因子，TG增加表明患者存在代謝綜合征，需進(jìn)行治療。 2、血清TG降低： 比較少見，甲狀腺功能亢進(jìn)、腎上腺皮質(zhì)功能減退與肝功能嚴(yán)重?fù)p傷時可以見到甘油三酯降低。,四、血清(漿)脂蛋白測定,(一)高密度脂蛋白測定 1磷鎢酸鎂沉淀法 原理： 用磷鎢酸鹽與鎂離子沉淀血清中的LDL、VLDL與Lp(a)后，上清液中只含有HDL，

29、然后用酶法測定其中的膽固醇含量(與酶法測TC相同)。以HDL中的膽固醇含量(即HDL-C)作為HDL的定量依據(jù)。 評價： 優(yōu)點：標(biāo)本用量少，操作簡便易行，結(jié)果穩(wěn)定，高TG血清不影響沉淀劑的沉淀效果，沉淀效果好，且不干擾酶法分析。批內(nèi)CVl.87%，批間CV2.93%。 缺點：對溫度與pH改變很敏感，沉淀離心后放置時間不能過長，應(yīng)于4h內(nèi)立即檢測，若放置過久會使結(jié)果偏高。,2 直接測定法,原理： 分兩步反應(yīng)，第一試劑用聚陰離子及分散型表面活性劑(即反應(yīng)抑制劑)，后者與LDL、VLDL與CM表面的疏水基團(tuán)有高度親與力，吸附在這些脂蛋白表面形成掩蔽層，但不發(fā)生沉淀，能抑制這類脂蛋白中的膽固醇與酶試劑

30、起反應(yīng)。第二試劑含膽固醇測定酶及具有對HDL表面的親水基團(tuán)有親與力的表面活性劑(即反應(yīng)促進(jìn)劑)，使酶與HDL中的膽固醇起反應(yīng)。 評價： 可用于自動分析。,參考值,HDL-C合適范圍：1.04mmolL(40mgd1)； 減低：0.91mmolL(35mgd1)。,臨床意義,(1)HDL-C與冠心病發(fā)病呈負(fù)相關(guān)，HDL-C低于0.9mmolL是冠心病危險因素。 (2)HDL-C下降還多見于腦血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化病人。 (3)高TG血癥往往伴以低HDL-C。 （4）肥胖者的HDL-C也多偏低。 （5）吸煙可使HDL-C下降。 （6）適量飲酒、長期體力勞動與運動會使HDL-C升高。,(二)低

31、密度脂蛋白測定,1 Friedewald公式法 LDL-CTCHDL-CTG2.2(以mmolL為單位時) 評價： Friedewald公式計算法是目前應(yīng)用較廣的估測LDL-C的方法，具有簡便、直接、快速等優(yōu)點。主要是利用血清TC、TG及HDL-C濃度測定結(jié)果，計算LDL-C的濃度。 但在血清中存在CM、血清TG4.52mmolL(400mgd1)、血清中存在異常-脂蛋白、型高脂血癥等脂代謝異常的高脂血癥時不宜采用Friedewald公式法計算。低密度脂蛋白水平通常以LDL-C含量表示，參考方法亦為超速離心法。,2 聚乙烯硫酸鹽沉淀法(PVS沉淀法),原理： 空腹血清中主要含有HDL、LDL、

32、VLDL，用聚乙烯硫酸鹽沉淀LDL，上清液中存有VLDL與HDL；同時測定血清與上清液中的膽固醇含量，以總膽固醇減去上清液中的膽固醇含量即為LDL-C的量。膽固醇的測定同前述的酶法測定膽固醇含量。 評價： PVS沉淀法是中華醫(yī)學(xué)會推薦的血脂測定方法。該法精密度中等水平，LDL-C的批內(nèi)CV4.5mmolL時，有時會因LDL沉淀不完全而出現(xiàn)結(jié)果偏低。,3 直接測定法消除法,原理： 在第一反應(yīng)中，表面活性劑I使非LDL脂蛋白結(jié)構(gòu)改變促進(jìn)其與CEH與COD反應(yīng)，并保護(hù)LDL不反應(yīng)非LDL脂蛋白被消除； 在第二反應(yīng)中，表面活性劑促進(jìn)未被消除的LDL-C與CEH與COD反應(yīng)經(jīng)Trinder反應(yīng)顯色測定。 顏色深淺與LDL-C量呈正比。 評價： 方便、準(zhǔn)確，可用于自動分析，目前在臨床上使用最為廣泛,參考值,正常范圍：1.53.1mmol/L； 臨界范圍：3.13.58mmol/L； 高膽固醇血癥：3.6mmol/L。,臨床意義,目前以LDL中膽固醇(LDL-C)為定量LDL的依據(jù)，LDL-C水平與TC一樣，是判斷高脂血癥、預(yù)防動脈粥樣硬化的重要指標(biāo)。并且近年來，許多學(xué)者認(rèn)為LDL-C水平更能說明膽固醇的代謝狀況，LDLC水平與冠心病發(fā)病率呈正相關(guān)，所以臨床推薦LDLC為必查指標(biāo)之一。,五、血清