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1、紫外吸收光譜法測(cè)定苯酚含量一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康? ( M% Q* A3 x6 4 t% G2 p 1、了解紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)、性能及使用方法8 D0 j2 G# S3 C 2、熟悉定性、定量測(cè)定的方法$ t7 h- Y8 po! k% H3 b二、實(shí)驗(yàn)原理- s( C* E4 O: c! T v 紫外分光光度法,又稱紫外吸收光譜法,它是研究分子吸收200.0800.0nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸收光譜。紫外吸收光譜主要產(chǎn)生于分子價(jià)電子在電子能級(jí)間的躍遷,是研究物質(zhì)電子光譜的分析方法。通過(guò)測(cè)定分子對(duì)紫外光的吸收,可以對(duì)大量的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物進(jìn)行定性和定量測(cè)定。/ g; Q6 _9 H% k3 _; N$ b$
2、 Q! d 苯酚已經(jīng)被列入有機(jī)污染物的黑名單。但在一些藥品、食品添加劑、消毒液等產(chǎn)品中均含有一定量的苯酚。如果其含量超標(biāo),就會(huì)產(chǎn)生很大的毒害作用。苯酚在紫外光區(qū)的最大吸收波長(zhǎng)max=270nm。對(duì)苯酚溶液進(jìn)行掃描時(shí),在270nm處有較強(qiáng)的吸收峰。 : m# ?4 n3 O3 c; _7 k定性分析時(shí),可在相同的條件下,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品進(jìn)行波長(zhǎng)掃描,通過(guò)比較未知樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的光譜圖對(duì)未知樣進(jìn)行鑒定。在沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)樣品的情況下,可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)譜圖或有關(guān)的電子光譜數(shù)據(jù)表進(jìn)行比較。, q& 3 G1 m3 gd& ) h 定量分析是在270nm處測(cè)定不同濃度苯酚的標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光值,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再在相
3、同的條件下測(cè)定未知樣品的吸光度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可得出未知樣中苯酚的含量。7 , k5 O7 P5 u6 ?+ 1 三、儀器與試劑& 7 c+ E7 o$ s2 P1紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)# T2 f& C( V( |+ R. M0 U2容量瓶(1000ml、250ml、50ml)3 I7 d: W6 K% X) z% i & N3吸量管(5ml、10ml)+ i0 W# v7 m$ H% J j4苯酚(AR) + Q, 1 Z: # j- N + R, j7 b* N9 m_ 于5支50ml的容量瓶中,用吸量管分別加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液,用
4、蒸餾水定容至刻度,搖勻。; R D4 f% H9 A四、最大吸收波長(zhǎng)的選擇 - v# A O V* w: E在標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中任取一種,以水為參比,分別在波長(zhǎng)200300nm之間以10為間隔測(cè)定其吸光度,在吸光度最大值附近以間隔2nm為單位測(cè)定,直至找到最大吸收波長(zhǎng)。8 j |3 T7 T9 五、數(shù)據(jù)記錄及結(jié)果分析(1)、標(biāo)準(zhǔn)表 標(biāo)準(zhǔn)溶液編號(hào)250nm260 nm270nm280nm290 nm10.3420.7140.950.2850.028420.4971.3751.930.3630.031330.5051.4412.640.3590.035740.4992.6463.720.2860.036650.4783.2574.620.4130.0349(2)、苯酚的吸收曲線圖 (根據(jù)上表任意組標(biāo)準(zhǔn)溶液數(shù)據(jù)作圖)(3)、標(biāo)準(zhǔn)曲線圖 標(biāo)準(zhǔn)曲線方程:Y =0 .055+ 0.1515 * X 相關(guān)系數(shù)r=0.9979: X2 / Q/ l& : S- a六、苯酚濃度的測(cè)定- da6 L& s+ C0 |4 z: x 在相同情況下,直接測(cè)定未知樣品的吸光度。根據(jù)回歸曲線方程計(jì)算出待測(cè)苯酚濃度。樣品濃度 測(cè)得樣品A = 2.44,代人標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算得樣品濃度c=13.12ug/ml# H9 2 h; h+ p! a$
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