分枝桿菌屬 Mycobacterium 病原生物學(xué)教研室 又稱抗酸桿菌 acid fastbacillus 本菌屬種類頗多 可分為3組 結(jié)核分枝桿菌 模式種 非結(jié)核分枝桿菌 麻風(fēng)分枝桿菌 根據(jù)分枝桿菌分類國際研究班 IWGMT 的分類方案將本屬細菌分為三類 即緩慢生長菌 結(jié)核分枝桿菌 Runyon 光產(chǎn)色菌 暗產(chǎn)色菌 群 不產(chǎn)色菌 迅速生長菌 Runyon 群 特殊營養(yǎng)要求 麻風(fēng)桿菌 第一節(jié)結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌 M tuberculosis 是結(jié)核病的病原菌 俗名結(jié)核桿菌 1882年由科霍 Koch 發(fā)現(xiàn) 對人有致病性的有人型 牛型和非洲型結(jié)核桿菌 形態(tài)與染色 生物學(xué)特性 生物學(xué)特性 培養(yǎng)特性培養(yǎng)特點 饞 懶 丑 饞 營養(yǎng)要求較高 必須在含血清 卵黃 馬鈴薯 甘油以及含某些無機鹽類的特殊培養(yǎng)基 羅氏 上才能生長良好 懶 生長緩慢 14 18h分裂1次 在固體培養(yǎng)基上2 5w才出現(xiàn)肉眼可見的菌落 丑 典型菌落為粗糙型 表面干燥呈顆粒狀 不透明 乳白色或淡黃色 如菜花樣 生物學(xué)特性 菌體的化學(xué)成分1 脂質(zhì) 磷脂 脂肪酸 蠟質(zhì) waxes 分枝菌酸 mycolicacid 索狀因子 蠟質(zhì)D 2 蛋白質(zhì) 如結(jié)核菌素 tuberculin 3 多糖 生物學(xué)特性 抵抗力對理化因素抵抗力較強 耐干燥 耐酸 耐鹼 對濕熱敏感 在70 75 乙醇中數(shù)分鐘即被殺死 對紫外線敏感 生物學(xué)特性 變異性結(jié)核分枝桿菌易發(fā)生菌落 毒力以及耐藥性的變異 BCG就是牛型結(jié)核分枝桿菌毒力變異株 耐藥菌株 尤其是耐異煙肼菌株 致病物質(zhì) 致病性與免疫性 不產(chǎn)生內(nèi) 外毒素以及侵襲酶 其毒力可能與下述物質(zhì)有關(guān) 1 索狀因子 cordfactor 2 C 分枝菌酸苷酯 C mycosides 3 硫酸腦苷酯 sulfatides 4 分枝桿菌生長素 mycobactin 5 蠟質(zhì)D 致病性與免疫性 所致疾病人型結(jié)核分枝桿菌主要通過呼吸道 消化道和受損傷的皮膚等多種途徑侵入易感機體 引起多種臟器組織的結(jié)核病 tuberculosis 以肺結(jié)核為最多見 1 原發(fā)感染 primaryinfection 2 繼發(fā)感染 reinfection 亦稱復(fù)活感染 reactivationtypetuberculosis orreactivationtuberculosis 致病性與免疫性 免疫性人體對結(jié)核分枝桿菌有相當強的免疫力 1 結(jié)核的免疫為有菌免疫或稱傳染性免疫 2 結(jié)核分枝桿菌感染機體后 可刺激機體產(chǎn)生抗體 3 結(jié)核病的細胞免疫在抗感染免疫中起重要作用 細胞免疫以遲發(fā)型超敏反應(yīng)為主 即致敏淋巴細胞與抗原相遇 釋放淋巴因子 主要是IFN 作用于巨噬細胞 促使細胞內(nèi)溶酶體含量增加 其中酶的活性增高 吞噬能力增強 科霍現(xiàn)象 Koch sphenomenon 1891 將微量結(jié)核分枝桿菌注入豚鼠皮下 易感組 10 14d后注射部位潰爛 壞死 同時附近淋巴結(jié)腫大 干酪樣病變 形成慢性潰瘍很難愈合 曾感染組 經(jīng)24 48h后在接種的局部迅速發(fā)生淺潰爛 但能較快愈合 不擴散到附近淋巴結(jié)和全身 結(jié)核菌素試驗 tuberculintest 1 原理結(jié)核菌素 OT或PPD 注入皮內(nèi)后如受試者已感染結(jié)核 則結(jié)核菌素與致敏淋巴細胞特異性結(jié)合 在局部釋放淋巴因子 形成遲發(fā)型超敏反應(yīng)性炎癥 若受試者未感染過結(jié)核則無反應(yīng) 2 方法3 結(jié)果分析 1 陽性注射部位硬結(jié) 紅腫直徑0 5 1 5cm之間 2 強陽性硬結(jié)直徑超過1 5cm以上 3 陰性注射部位有針眼大的紅點或稍有紅腫 硬結(jié)直徑小于0 5cm 4 應(yīng)用 1 選擇BCG接種對象及測定接種效果 結(jié)核菌素反應(yīng)陰性者應(yīng)接種BCG 2 結(jié)核菌素試驗對嬰幼兒可做診斷結(jié)核病之用 3 可在未接種BCG的人群中作結(jié)核分枝桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查 4 可借用其測定腫瘤病人的細胞免疫功能 微生物學(xué)檢查方法 細菌的分離培養(yǎng)鑒定動物接種用于結(jié)核分枝桿菌的分離和毒力測定 常用的動物為豚鼠 免疫學(xué)診斷1 結(jié)核菌素試驗嬰幼兒陽性結(jié)果可結(jié)合臨床癥狀做出診斷 在成人可作為判定機體細胞免疫的一種指標 2 ELISA檢測抗PPD的IgG 肺結(jié)核病人的陽性率為80 90 3 全血干擾素測定法以診斷結(jié)果與結(jié)核菌素試驗相當 且具有受BCG接種史影響小 又能區(qū)分非結(jié)核分枝桿菌的優(yōu)點 同時還可避免結(jié)核菌素試驗在操作上與結(jié)果判斷上存在的多種主觀或人為因素的影響 預(yù)防接種卡介苗 BCG 接種 治療 第一線抗結(jié)核藥物包括異煙肼 利福平 利福定 乙胺丁醇和鏈霉素 第二線抗結(jié)核藥物有對氨水楊酸 吡嗪酰胺 乙硫異煙胺和環(huán)絲氨酸等 結(jié)核分枝桿菌耐藥株的增多使結(jié)核病成為人類健康的一個新的嚴峻事實 防治原則 結(jié)核桿菌對一些藥物的耐藥機制已被證實 利福平耐藥是由結(jié)核分枝桿菌編碼RNA聚合酶b亞基 rpoB 的基因突變所致 鏈霉素的耐藥機制主要是編碼核糖體S12蛋白的rpsl基因發(fā)生突變以及編碼16SrRNA的rrs基因發(fā)生突變 異煙肼的耐藥與過氧化氫酶和過氧化物酶的失活有關(guān) 編碼該酶的KatG基因的缺失 堿基插入或突變 使得酶分子活性嚴重降低或失活以及熱穩(wěn)定性發(fā)生改變 Banerjee等研究發(fā)現(xiàn) 由inhA基因編碼的酶可能是異煙肼和乙硫異煙肼共同的靶子 因此inhA基因的突變導(dǎo)致了對這兩種藥物的耐藥 防治原則 麻風(fēng)分枝桿菌麻風(fēng)分枝桿菌 M leprae 是麻風(fēng)病的病原菌 1873年由挪威學(xué)者ArmauerHansen從麻風(fēng)患者的皮膚結(jié)節(jié)中分離發(fā)現(xiàn) 麻風(fēng)是一種慢性傳染病 主要表現(xiàn)為皮膚 粘膜和神經(jīng)末梢的損害 晚期可侵犯深部組織和器官 形成肉芽腫 麻風(fēng)分枝桿菌迄今仍不能人工培養(yǎng) 用從組織獲得的麻風(fēng)分枝桿菌感染小鼠足墊或接種至犰狳 armadillo 一種南美洲的野生動物 成為研究麻風(fēng)的動物模型 組織內(nèi)的麻風(fēng)分枝桿菌與結(jié)核分枝桿菌相似 并表現(xiàn)明顯的抗酸特性 在病人破潰皮膚滲出液的細胞中呈束狀排列 麻風(fēng)分枝桿菌為典型的胞內(nèi)寄生菌 有麻風(fēng)分枝桿菌存在的細胞胞漿呈泡沫狀 稱為麻風(fēng)細胞 瘤型麻風(fēng)為進行性和嚴重的臨床類型 傳染性強 為開放性麻風(fēng) 如不治療 往往致死 細菌侵犯皮膚