.,1,第十一章吩噻嗪類抗精神病藥物的分析,第四節(jié)含量測定,.,2,性質(zhì)：弱堿性、紫外光吸收特性、金屬離子配合呈色測定方法：酸堿滴定法、分光光度法、高效液相色譜法和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),.,3,一、酸堿滴定法(一)非水溶液滴定法結(jié)構(gòu)：母核上10位取代基的烴胺-NR2、哌嗪基及哌啶基具有堿性1.HClO4非水溶液滴定法基本原理,當(dāng)HA酸性較強時，反應(yīng)不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。,因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測定條件。,.,4,10ml30ml,若供試品為氫鹵酸鹽再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml5ml,堿性溶液pKb10，冰醋酸中滴定突躍不明顯，需加入醋酐，使堿性增強，突躍更明顯,.,5,2.一般方法,供試品：以消耗標準液體積計算溶劑：HAc，一般用量1030ml滴定劑：0.1mol/LHClO4無水HAc溶液指示劑：電位法,.,6,HClO4在冰醋酸溶液中，具強氧化性，可氧化吩噻嗪類藥物產(chǎn)生紅色的氧化物，干擾指示劑終點的觀察。排除方法：（1）改用中性溶劑（2）加抗壞血酸（3）電位法指示終點,.,7,4、適用范圍主要用于Kb10-8的有機堿鹽的含量測定。對堿性較弱的雜環(huán)類藥物，只要選擇合適的溶劑、滴定劑和終點指示的方法，可使pKb為813的弱堿性藥物采用本法滴定。Kb為10-810-10時，宜選冰醋酸作為溶劑；Kb為10-1010-12時，宜選冰醋酸與醋酐的混合溶液；Kb10-12時，應(yīng)用醋酐作為溶劑。冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突躍顯著增大。,.,8,【示例11-31】鹽酸氯丙嗪測定ChP（2010）,取本品約0.2g，精密稱定，加冰醋酸10ml與醋酐30ml，溶解后，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于35.53mg的C17H19N2ClS.HCl。,.,9,提取后HClO4非水滴定法：,取本品約0.15g置分液漏斗,加氨水堿化,乙醚提取6次，合并,水浴加熱揮干乙醚,殘渣,丙酮溶解,HClO4非水滴定法,溴甲酚綠-結(jié)晶紫指示液,紫紅色藍紫色,【示例11-32】鹽酸氯丙嗪注射液測定JP（15）,每1ml高氯酸滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于17.77mg的C17H19N2ClS.HCl。,.,10,（二）乙醇水溶液的氫氧化鈉滴定法,本類藥物的鹽酸鹽的水溶液顯酸性，在乙醇-水溶液中，可用NaOH滴定劑滴定，電位法指示滴定終點。,V1,V2,等當(dāng)點,突躍體積,滴定體積V=V1-V2,.,11,二、分光光度法,（一）直接分光光度法在254nm的波長處，C17H19ClN2S.HCl的吸收系數(shù)（）為915計算。,.,12,（二）提取后分光光度法-排除輔料干擾【示例11-36】鹽酸氯丙嗪口服液USP32-NF27,對照品：50同法測定As。,.,13,萃取除去抗氧劑的干擾,.,14,（三）提取后雙波長分光光度法,提取后分光光度法能夠除去一些干擾物質(zhì)，但卻不能除去吩噻嗪類藥物的氧化物。提取時，氧化物隨游離堿進入有機相；測定時，因結(jié)構(gòu)相近，氧化物在吩噻嗪類藥物的測定波長處產(chǎn)生吸收，干擾測定。,.,15,定量依據(jù)樣品在二波長下吸收度差值（A）：,即，吸收度差值（A）僅與待測組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無關(guān)，干擾組分的干擾被消除。,.,16,【示例11-37】,鹽酸氯丙嗪注射液的含量測定（USP32-NF27）,測定波長：,254nm（最大吸收波長）277nm（等吸收波長）,空白對照液：0.1mol/L鹽酸溶液,計算公式：,式中：C(mg/ml)為對照品溶液的濃度；V(ml)為所取供試品的體積；括號內(nèi)的公式分別為供試品溶液(U)和對照品溶液(S)在下標所示波長處的吸光度差。,.,17,.,18,（五）鈀離子比色法,吩噻嗪類藥物在pH20.1的緩沖溶液中，與鈀離子(Pd2+)形成紅色配合物，在500nm波長附近具有最大吸收,由于鈀離子僅與未被氧化的硫元素配合顯色，消除了藥物中氧化物對測定的干擾。,比色液的濃度：50250g/mL,顯色穩(wěn)定性：10分鐘后可穩(wěn)定約2小時,.,19,【示例11-38】鹽酸異丙嗪注射液USP32-NF27,精密稱取適量置分液漏斗,依次加氯化鉀氫氧化鈉堿化甲醇,合并正庚烷提取液,正庚烷提取3次,鹽酸酸化,合并鹽酸提取液并定容至50ml,對照品0.124mg/ml,稱取標準品和對照品溶液各2ml+PdCl2顯色，測A470,.,20,三、高效液相色譜法,（一）反相高效液相色譜法(RP-HPLC),固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）流動相：水甲醇或水乙腈系統(tǒng)，極性較強極性較強的組分在分離時先流出柱子，極性較弱的組分后流出柱子，適合于共存組分極性差異較大樣品的分析。雜環(huán)類藥物分析一般在流動相中加入含氮堿性競爭試劑(掃尾劑:醋酸銨、三乙胺、二乙胺、乙腈等),以抑制堿性藥物與未硅烷化的硅醇基作用。,.,21,（二）離子對高效液相色譜法(Ion-RP-HPLC),常用的離子對試劑：烷基磺酸鹽陰離子對試劑，如戊烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、十二烷磺酸鈉等。,影響離子對形成的條件,反離子的性質(zhì)與濃度流動相的組成pH離子強度等,影響待測組分的保留,.,22,四、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)集HPLC的高分離效能和MS的高專屬性及高靈敏度于一體，已經(jīng)成為目前測定復(fù)雜生物樣本中微量藥物的首選方法，同時也是進行藥物及有關(guān)物質(zhì)定性分析的常用方法。,.,23,色譜圖：,圖11-4血漿中7種抗抑