2.2.2動物細(xì)胞融合與單克隆抗體,雜合的原生質(zhì)體,雜種細(xì)胞,愈傷組織,雜種植株,溫故知新:,植物體細(xì)胞雜交過程,材料1:1970年，有兩位科學(xué)家做了一個人鼠細(xì)胞融合的實驗，以證明細(xì)胞膜的流動性。那么，如何實現(xiàn)人鼠細(xì)胞的融合，動物細(xì)胞融合后還有什么用途呢？,人-鼠(想像圖),科幻電影對人-鼠雜交種的想像,植物細(xì)胞A,植物細(xì)胞B,原生質(zhì)體A,原生質(zhì)體B,原生質(zhì)體融合,雜合的原生質(zhì)體,雜種細(xì)胞,愈傷組織,雜種植株,如何實現(xiàn)人鼠細(xì)胞的融合？閱讀教材52頁相關(guān)內(nèi)容，思考下列問題：,思考：1、動物細(xì)胞融合的概念是什么？2、動植物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何區(qū)別？這對它們雜交或融合過程有什么影響？3、植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？那動物細(xì)胞融合呢？4、動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理是否相同？是什么原理？5、動物細(xì)胞融合有什么意義？主要應(yīng)用在哪些方面？6、參照植物細(xì)胞雜交過程寫出動物細(xì)胞融合過程。,雜合的細(xì)胞,2個完整的雜交細(xì)胞AB,如何實現(xiàn)人鼠細(xì)胞的融合？閱讀教材52頁相關(guān)內(nèi)容，思考討論下列問題：,小組活動，,討論：7、植物體細(xì)胞雜交可得到雜種植株，動物細(xì)胞融合后能象電影上一樣形成雜種動物個體嗎?為什么？,植物細(xì)胞A,植物細(xì)胞B,原生質(zhì)體A,原生質(zhì)體B,原生質(zhì)體融合,雜合的原生質(zhì)體,雜種細(xì)胞,愈傷組織,雜種植株,獲得雜種植株,去壁原生質(zhì)體融合誘導(dǎo)新壁雜種植株,細(xì)胞膜的流動性,細(xì)胞膜的流動性,結(jié)果,誘導(dǎo)方法,步驟,融合的原理,動物細(xì)胞融合,植物體細(xì)胞雜交,比較項目,植物、動物細(xì)胞融合的比較,獲得雜種細(xì)胞,小結(jié)1,材料2：在基因工程中,采用抗原-抗體雜交法檢測基因表達(dá)產(chǎn)物需用到純度很高的抗體。材料3：傳統(tǒng)獲得抗體的方法：把某種抗原反復(fù)注射到動物體內(nèi)，然后從動物血清中分離出所需抗體。用這種方法獲得的抗體，不僅產(chǎn)量低，而且抗體的特異性差，純度低，反應(yīng)不夠靈敏。,思考：1、抗體由哪種細(xì)胞產(chǎn)生的？2、抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法的缺陷是什么？3、能否通過相應(yīng)效應(yīng)B細(xì)胞體外培養(yǎng)的方式大量獲得抗體?,材料4：效應(yīng)B淋巴細(xì)胞在體內(nèi)只能由B淋巴細(xì)胞增殖分化而來,不再進(jìn)行分裂,在體外培養(yǎng)的條件下，也很難分裂。,提示：,1.什么細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體？2.什么細(xì)胞可以無限增殖？,思考：用什么方法才能讓B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖?,材料5：1975年,米爾斯坦和柯勒首先將抗原注射入小鼠體內(nèi)，然后從小鼠脾臟中獲得能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，得到多種雜交細(xì)胞。在特定的選擇性培養(yǎng)基中可篩選出雜交瘤細(xì)胞。經(jīng)過再次篩選和抗體檢測,得到能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。但純度達(dá)不到100%。對單一雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆培養(yǎng),獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，在體外培養(yǎng)或注射到小鼠體內(nèi)增殖。從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中，可提取出大量抗體。（由于產(chǎn)生抗體的細(xì)胞來自一個雜交瘤細(xì)胞,故產(chǎn)生的抗體稱為單克隆抗體.）,請根據(jù)以上材料,討論設(shè)計單克隆抗體制備過程圖.,討論：,B淋巴細(xì)胞,注射特定抗原蛋白,骨髓瘤細(xì)胞,培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞,融合,多種雜交細(xì)胞,單克隆抗體的制備過程,結(jié)合單克隆抗體的制備過程，思考以下問題：1、（只考慮兩兩融合）融合細(xì)胞幾種類型？2、本過程中進(jìn)行了兩次篩選，目的分別是什么？第1次篩選要淘汰哪些細(xì)胞？3、本過程利用的那些技術(shù)？4、雜交瘤細(xì)胞有何特點？,單克隆抗體的應(yīng)用信息,材料6：,診斷疾?。ㄗR別作用，如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）優(yōu)點：,單克隆抗體的應(yīng)用,用于治療疾病和運載藥物（主要用于癌癥治療，如單克隆抗體+藥物=“生物導(dǎo)彈”）優(yōu)點：,準(zhǔn)確、高效、簡易、快速,位置準(zhǔn)確、療效高、副作用小,閱讀教材P54相關(guān)內(nèi)容，試說明單克隆抗體有何應(yīng)用？優(yōu)點是什么？,單克隆抗體,B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞,誘導(dǎo)融合,選擇培養(yǎng),雜交瘤細(xì)胞,克隆化培養(yǎng),抗體檢測,產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞,體外培養(yǎng),小鼠腹腔內(nèi)增殖,單克隆抗體,多種雜交細(xì)胞,1、該過程中用到了兩種技術(shù),小結(jié)2,單克隆抗體的制備過程：,動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),動物細(xì)胞融合技術(shù),2、單克隆抗體的制備過程的三個“一”：,一種誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法，產(chǎn)生了一種新細(xì)胞，得到了一種優(yōu)勢抗體。,滅活病毒誘導(dǎo)融合,雜交瘤細(xì)胞,單克隆抗體優(yōu)勢：特異性強、靈敏度高，可大量制備,1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（）A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D.沒經(jīng)過免疫的淋巴細(xì)胞,A,鞏固練習(xí),2.動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（）誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C.操作步驟基本相同D.都能形成雜種細(xì)胞,D,3.單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是（）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合B.由小鼠一個B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成C.由小鼠一個B淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D.由小鼠一個B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成,D,4.只能使動物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法是（）APEGB滅活的病毒C電刺激D離心,B,5.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（）淋巴細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞A.B.C.D.,C,6.“生物導(dǎo)彈”是指（）A.單克隆抗體B.雜交瘤細(xì)胞C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物,D,有夢想，才會有創(chuàng)造！,Bl