1、旋毛蟲病肉品檢驗(yàn)技術(shù)旋毛蟲病是重要的人畜共患寄生蟲病，它是由毛形科的旋毛形線蟲（Trichinella spiralis）成蟲寄生于腸管，幼蟲寄生于橫紋肌所引起的。該病流行于哺乳類動(dòng)物間，鳥類可實(shí)驗(yàn)感染。人若攝食了生的或未煮熟的含旋毛蟲包囊的豬肉可感染生病，主要臨床表現(xiàn)為胃腸道癥狀、發(fā)熱、肌痛、水腫和血液嗜酸性粒細(xì)胞增多等，嚴(yán)重者可以導(dǎo)致死亡，故肉品衛(wèi)生檢驗(yàn)中將旋毛蟲列為首要項(xiàng)目。旋毛蟲病的肉品檢驗(yàn)是生豬屠宰檢疫中的一項(xiàng)重要內(nèi)容，通過該項(xiàng)檢驗(yàn)可以檢出感染旋毛蟲的豬只。對(duì)于杜絕病豬肉流入肉品市場(chǎng)，有著重要的作用。 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康募耙?#160;1掌握肌肉旋毛蟲壓片鏡檢法、消化

2、法的操作方法。 2了解酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的方法。 3掌握旋毛蟲病肉的處理方法。 二、實(shí)驗(yàn)器材 （一）旋毛蟲壓片鏡檢法 1材料：被檢肉品。 2器材：載玻片，剪刀，鑷子，天平，顯微鏡。 3試劑：50%甘油水溶液，10%稀鹽酸。 旋毛蟲壓片鏡檢法1采樣。自胴體左右兩側(cè)橫膈膜的膈肌腳（見圖21-1），各采膈肌1塊（與胴體編成相同號(hào)碼），每塊肉樣不少于20g，記為一份肉樣，送至檢驗(yàn)臺(tái)檢查。如果被檢樣品為部分胴體，則可從肋間肌、腰肌、咬肌等處采樣。 2肉眼檢查。撕去被檢樣品肌膜，將肌肉拉平，在良好的光線下仔細(xì)檢查表面有

3、無可疑的旋毛蟲病灶（見圖21-2）。未鈣化的包囊呈露滴狀，半透明，細(xì)針尖大小，較肌肉的色澤淡；隨著包囊形成時(shí)間的增加，色澤逐步變深而為乳白色、灰白色或黃白色。若見可疑病灶時(shí)，做好記錄且告知總檢將可疑肉尸隔離，待壓片鏡檢后做出處理決定。 3制片。取清潔載玻片1塊放于檢驗(yàn)臺(tái)上，并盡量靠近檢驗(yàn)者。用鑷子夾住肉樣順著肌纖維方向?qū)⒖梢刹糠旨粝?。如果無可疑病灶的，則順著肌纖維方向在肉塊的不同部位剪取12個(gè)麥粒大小的肉粒（2塊肉樣共剪取24個(gè)小肉粒）。將剪下的肉粒依次均勻地附貼于載玻片上且排成兩行，每行6粒。然后，再取一清潔載玻片蓋放在肉片的載玻片上，并用力適度捏住兩端輕輕加壓，把肉粒壓成很薄的薄

4、片，以能通過肉片標(biāo)本看清下面報(bào)紙上的小字為標(biāo)準(zhǔn)。另一塊膈肌按上法制作，兩片壓片標(biāo)本為一組進(jìn)行鏡檢4鏡檢。把壓片標(biāo)本放在低倍（4×10）顯微鏡下，從壓片的一端第一塊肉片處開始，順肌纖維依次檢查。鏡檢時(shí)應(yīng)注意光線的強(qiáng)弱及檢查速度，切勿漏檢。 5結(jié)果判定。 （1）沒有形成包囊的幼蟲，在肌纖維之間呈直桿狀或逐漸蜷曲狀態(tài)，但有時(shí)因標(biāo)本壓得太緊，可使蟲體擠入壓出的肌漿中。 （2）包囊形成期的旋毛蟲，在淡黃色背景上，可看到發(fā)光透明的圓形或橢圓形物。包囊的內(nèi)外兩層主要由均質(zhì)透明蛋白質(zhì)和結(jié)締組織組成，囊中央是蜷曲的蟲體。成熟的包囊位于相鄰肌細(xì)胞所形成的梭形肌腔內(nèi)。

5、0;（3）發(fā)生機(jī)化現(xiàn)象的旋毛蟲。蟲體未形成包囊以前，包圍蟲體的肉芽組織逐漸增厚、變大，形成紡錘形、橢圓形或圓形的肉芽腫。被包圍的蟲體有的結(jié)構(gòu)完整，有的破碎甚至完全消失。蟲體形成包囊后的機(jī)化，其病理過程與上述相似。由于機(jī)化灶透明度較差，需用50甘油水溶液作透明處理，即在肉粒上滴加數(shù)滴50%甘油水溶液，數(shù)分鐘后，肉片變得透明，再覆蓋上玻片壓緊觀察。 （4）鈣化的旋毛蟲。在包囊內(nèi)可見數(shù)量不等、濃淡不均的黑色鈣化物，包囊周圍有大量結(jié)締組織增生。由于鈣化的不同發(fā)展過程，有時(shí)可能看到下列變化：包囊內(nèi)有不透明黑色鈣鹽顆粒沉著；鈣鹽在包囊腔兩端沉著，逐漸向包囊中間擴(kuò)展；鈣鹽沉積于整個(gè)包囊腔，并波及蟲

6、體，尚可見到模糊不清的蟲體或蟲體全部被鈣鹽沉著。此外，在鏡檢中有時(shí)也能見到由蟲體開始鈣化逐漸擴(kuò)展到包囊的鈣化過程（多數(shù)是由于蟲體死亡后而引起的鈣化）。發(fā)現(xiàn)鈣化旋毛蟲時(shí)，可以通過脫鈣處理，滴加10%稀鹽酸將鈣鹽溶解后，可見到蟲體及其痕跡，與包囊毗鄰的肌纖維變性，橫紋消失。 （5）鑒別診斷。在旋毛蟲檢驗(yàn)時(shí)，往往會(huì)發(fā)現(xiàn)住肉孢子蟲和發(fā)育不完全的囊尾蚴，蟲體典型者，容易辨認(rèn)，如發(fā)生鈣化，死亡或溶解現(xiàn)象時(shí)，則容易混淆，在檢查時(shí)可參旋毛蟲、住肉孢子蟲、囊尾蚴肉眼檢查及鏡下區(qū)別項(xiàng)目旋毛蟲住肉孢子蟲囊尾蚴發(fā)育早期發(fā)育中期成熟期蟲 體 形 態(tài)呈灰白色半透明小點(diǎn)，包囊呈紡錘形

7、，橢圓形，蟲體常蜷曲成S形或8字形呈灰白色或黃白色毛根狀小體。鏡下，米氏囊內(nèi)充滿香蕉形滋養(yǎng)體和卵圓形孢子粟粒大到米粒大包囊，囊內(nèi)有可見的白色頭節(jié)。鏡下：頭節(jié)上有四個(gè)吸盤，尚無或有發(fā)育不全的角質(zhì)鉤黃豆大包囊，囊內(nèi)充滿無色液體，白色頭節(jié)如米粒大。鏡下：頭節(jié)上有四個(gè)吸盤和角質(zhì)鉤黃豆大包囊，囊內(nèi)充滿無色液體，白色頭節(jié)如米粒大。鏡下：頭節(jié)上有四個(gè)吸盤和角質(zhì)鉤寄 生 部 位多見于膈肌、肩胛肌、腰肌及腓腸肌等 骨骼肌、心肌。尤其以食道、腹部、股部等部位寄生最多 肩胛外肌、股部?jī)?nèi)側(cè)肌、心肌、咬肌及腰肌等肩胛外肌、股部?jī)?nèi)側(cè)肌、心肌、咬肌及腰肌等肩胛外肌、股部?jī)?nèi)側(cè)肌、心肌、咬肌及腰肌等蟲體鈣化灶肉眼檢查針尖大或針頭大，灰白或灰黃色。與鈣化的住肉孢子蟲不易區(qū)別蟲體鈣化灶略小于囊尾蚴鈣化灶，呈灰白或灰黃色。觸摸有堅(jiān)實(shí)感針尖大灰白色小點(diǎn)粟粒大或米粒大，呈灰黃色 橢圓或圓形，粟粒至黃豆大，呈灰白-淡黃-黃色，觸摸有堅(jiān)硬感壓片鏡檢包囊內(nèi)有大小不等的黑色鈣鹽顆粒，