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文檔簡介

1、AxSYM和其配套的檢測試劑是用于超微量定量或定性測定人類血清,血漿,全血或其它各類體液中病毒抗原,抗體,激素,多肽,腫瘤蛋白,代謝產(chǎn)物,藥物化學(xué)成份的一套系統(tǒng)。技術(shù)原理:主要包含4種檢測原理- MEIA 微粒子捕捉免疫發(fā)光技術(shù)- ICIA離子捕捉免疫發(fā)光技術(shù)- FPIA熒光偏振免疫發(fā)光技術(shù)- REA輻射能衰減免疫檢測技術(shù)檢測程序:Flexible ProtocolTM Processing 技術(shù),為免疫檢測程序的最優(yōu)化步驟。根據(jù)檢測目的物的不同靈活選擇不同的分析技術(shù),分析步驟和分析過程以達(dá)到最佳的檢測效果和最高的檢測速度。Flexible ProtocolTM Processing技術(shù)被運用

2、于樣本處理、試劑處理、吸樣處理和分析處理等整個檢測過程中,檢測程序各步驟被處理成為完全獨立的分析基元,不同的分析技術(shù)、步驟和過程可在同一臺儀器上同時進(jìn)行,使整個分析表現(xiàn)(如靈敏度,特異性,精密度,準(zhǔn)確性等)達(dá)到最佳狀態(tài),同時使分析過程成為真正的隨機連續(xù)分析步序,達(dá)到最快出結(jié)果的速度。MEIAMEIA(MICROPARTICLE ENZYME IMMUNOASSAY),微粒子酶免分析法是雅培公司的專利技術(shù)之一,主要用于測定蛋白質(zhì),病毒抗原等大分子物質(zhì)。其方法而生產(chǎn)的試劑具有極高地靈敏度,特異性和穩(wěn)定性。試劑特點:A. 抗原抗體包被的微粒子:微粒子的直徑只有,表面多孔,從而大大增加了反應(yīng)的表面積,

3、提高了反應(yīng)的靈敏度,縮短了反應(yīng)的時間,微粒子是由多孔高分子粒子制成,具有很好地親水性,且比重與水相仿,懸浮性極佳。微粒子可與玻璃纖維不可逆結(jié)合,從而提高了反應(yīng)的特異性。B. 酶標(biāo)抗體:采用堿性磷酸酶作為標(biāo)記物,堿性磷酸酶是最穩(wěn)定的一種酶標(biāo)記物。C.基質(zhì)液:采用極穩(wěn)定的MUP(4-Methylumbelliferyl Phosphate),4-甲基磷酸傘型酮。測定熒光發(fā)光的強度來檢測被測物的濃度,極微的熒光就被特制的感光結(jié)構(gòu)所感應(yīng)到,具有更好地靈敏度和穩(wěn)定性。并采用測初速度法代替終點法,每秒8次的讀數(shù)大大提高了結(jié)果的準(zhǔn)確性和縮短了反應(yīng)的時間。反應(yīng)過程:一般在反應(yīng)的第一階段,標(biāo)本與微粒子以一定比例

4、混合,標(biāo)本中被檢物質(zhì)與微粒子上包被的抗體進(jìn)行一定時間的反應(yīng)。第一反應(yīng)終了后,反應(yīng)液的一部分被移到玻璃纖維上,洗去未反應(yīng)的被檢物質(zhì)與其它的不要成份。反應(yīng)的第二階段終了后,為了將未反應(yīng)的第二抗體除去,再一次進(jìn)行沖洗。反應(yīng)的第三階段,加入基質(zhì)液(MUP),基質(zhì)液(MUP)被堿性磷酸酶所分解生成Methylumbelliferone。當(dāng)該生成物受熒光照射后就產(chǎn)生熒光。MEIA原理圖測定熒光強度的變化率,從而決定被測物質(zhì)的濃度。傳統(tǒng)的終點法 AxSYM的速率法FPIAFPIA法(FLUORESCENCE POLARIZATION IMMUNASSAY),即熒光偏振免疫發(fā)光分析法。主要用于測定藥物,激素等

5、小分子物質(zhì)。用其方法而生產(chǎn)的試劑具有極高的靈敏度,特異性和穩(wěn)定性及反應(yīng)快速。反應(yīng)過程:根據(jù)競爭結(jié)合法的原理,同時利用偏振光的特性進(jìn)行測量。分子量小的物質(zhì)由于在溶液中進(jìn)行活潑的旋轉(zhuǎn)運動,當(dāng)吸收了一定方向的激發(fā)偏振光后,會將偏振光散射掉,即失去偏振性。分子量大的物質(zhì),因為旋轉(zhuǎn)運動受抑制,當(dāng)它受到一定方向振動的光照后仍能發(fā)出按一定方向振動的偏振光來。熒光標(biāo)記抗原由于分子量小,失去大部分偏振光性,所以它的偏振光強度相應(yīng)變小,另一方面,當(dāng)熒光標(biāo)記抗原與抗體大分子的物質(zhì)結(jié)合后,分子量極大,所以熒光偏振光仍保持相應(yīng)的強度。標(biāo)本中抗原與一定量的熒光標(biāo)記抗原與抗體進(jìn)行競爭反應(yīng),樣本中的抗原越多,與抗體結(jié)合的標(biāo)記

6、抗原就越少,從而測得的熒光偏振光度也就越少,當(dāng)我們知道了已知濃度的抗原與熒光偏振光強度的關(guān)系后就可以測量未知濃度的物質(zhì)。FPIA原理圖ICIAICIA(ION CAPTURE IMMUNOASSAY),離子捕捉免疫分析法是雅培公司最近才發(fā)展起來的一項測試技術(shù)。主要用于GHb、葉酸等這類項目的測定,具有極高地靈敏度,特異性和穩(wěn)定性。反應(yīng)過程:在這個技術(shù)中,在反應(yīng)孔中的玻璃纖維預(yù)先包被了高分子的四銨化合物。從而使纖維網(wǎng)的表面帶正電,得以能夠捕捉帶負(fù)電的反應(yīng)復(fù)合物。通過靜電正負(fù)離子結(jié)合的原理,使反應(yīng)復(fù)合物吸附在纖維上。此特有的離子網(wǎng)分離技術(shù)大大減少了干擾,提高了特異性和精密度。反應(yīng)的復(fù)合物是通過抗原

7、抗體反應(yīng)的原理,并聯(lián)以熒光標(biāo)記物,這個復(fù)合物通過連接帶負(fù)電的多聚陰離子復(fù)合物,吸附到帶正電的纖維表面,經(jīng)過一系列徹底清洗等步驟后,測定熒光強度變化率,從而決定被測物質(zhì)的濃度。ICIA原理圖 REA 輻射能衰減(RADIATIVE ENERGY ATTENUATION),分析包含了一個顏色變化的反應(yīng)。分析物的存在通過使色原(無反應(yīng)染料)物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)樯ㄓ猩玖希┪镔|(zhì)來測試。一個穩(wěn)定的熒光物質(zhì)(熒光原)也包含在反應(yīng)混合物中。色基有對光吸收的特性,當(dāng)色基存在時,所能測得的熒光原物質(zhì)的熒光強度就會下降(輻射能衰減)。FPIA光路系統(tǒng)用來測定熒光變化的強度,輻射能強度變化的原理遵守Beer,Lambert和Bonguer定律(常稱做Be

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