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文檔簡介
1、探討蚊香對小白鼠的毒性李忠清(20037021)、(20037036)、(20037033)、(20037015)(廣西醫(yī)科大學 2003 級本碩 1 班)摘要 目的 探討蚊香對小白鼠的毒性將小白鼠分為 4 組,其中慢性組每晚熏兩盤蚊香連續(xù) 6 晚,性組在慢性的基礎上再急熏 2.5h,急性組急熏 2.5h,空白組不作處理。眼球取血,檢驗其血清中轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、膽紅素的指標并觀察其肝、肺、腎的病理切片。結果 肝功能:慢慢性組 AST 較慢性組、空白組著升高,慢性組 ALT 較慢性組顯著降低。病理切片:腎臟腎,及炎細胞現象;小白鼠的肝臟有水變性和肝小管上皮也出現水變性;肺臟
2、有肺不張,擴張血表現。結論 蚊香對小白鼠確害作用。:蚊香毒性;轉氨酶;谷草轉氨酶;膽紅素;肝損傷;水變性前面做過一個對比蚊香與香煙對小白鼠的毒性的實驗,對比蚊香與香煙對小白鼠的毒性,即分別用蚊煙熏小鼠。我們的預期結果為肺水腫,或肺有斑。但實驗結果顯示小鼠肺部變化不明顯,而肝臟紅腫充血,腸道失去正常的青灰色,而顯示為粉紅色。為了進一步研究蚊香對小白鼠的毒害作用,進行了此次實驗。1 材料和1.1 材料:第二次小白鼠 30 只,由廣西醫(yī)科大學動物試驗中心提供;錦江牌大盤微煙蚊香兩盒,福建省錦江日用化工兩個。1.2生產,購自還心愿超市廣西醫(yī)科店帶有通風觀察窗的紙盒(26 cm *15 cm *22cm
3、):同批小白鼠 30 只隨機分為 4 組,慢性組 13 只,慢性組 6 只,急性組 7 只,空白組 4 只。慢性組和慢性組放入同一內,每晚 23:00 時左右,關閉門窗,在其內點燃兩盤蚊香讓其自然燃燒。第二天 7:30 左右打開窗子通風,盡量模擬日常使用蚊香的情況,連續(xù) 6 晚。其余小鼠暫不作煙熏處理,并同等條件飼養(yǎng)。第七天,將慢性組和急性組分別放入事先熏兩紙盒中,急熏 2.5h。然后所有小鼠眼球取血以分離血清做肝功能檢測,再頸椎脫臼處死,并進行胸腹腔的解剖,取肝、肺、腎做病理切片。心、肺、肝、腸,并2結果2.1對肝功能檢測的結果見表 1。經方差分析統(tǒng)計學處理(SPSS),慢性組 AST 較慢
4、性組顯著ALT 較慢性組顯著升高升高(P<0.01);慢(P<0.05)。性組 AST較空白組著升高(P<0.05);慢性組蚊香對肝功能的影響(x±s)序號實驗組型nALTAST1234慢性組慢急性組空白組1367465.46±22.46130.5±43.0196.86±58.2096.25±79.21168.54±43.64249.50±92.60197.43±50.79155.25±48.94性組蚊香對肝功能的影響(x±s)(續(xù)表)nAST/ALTT-Bil序號 實驗組型1
5、234慢性組慢急性組空白組136742.81±1.082.03±0.812.40±0.952.02±0.666.69±1.418.22±1.747.67±2.337.15±0.86性組注:AST 比較2 組與 1 組P<0.01;2 組與 4 組P<0.05;ALT 比較1 組與 2 組 P<0.05。2.2病理切片結果:腎臟:急性組(22、23 號)少數腎小管上皮細胞水變性(圖 1),慢性組(15、19 號)少數腎小管有水變性,并有充血的表現(圖 2);肺臟:慢性組肺泡內可見(圖 1),有炎性浸
6、潤現象并有肺不張的現象(圖 3)。慢性組和急性組也有肺不張及炎細胞浸潤現象(圖 4)。肝臟:正常組肝細胞彌漫水變性部分肝細胞氣球樣變,肝竇變窄或消失(圖 5),其它組小白鼠有一些沒有表現出明顯的病理變化,有一部分小白鼠的肝細胞有不同程度的水變性(15 號、20 號、22 號),以 15 小白鼠的肝臟水變性最嚴重(圖 6),還有不少小白鼠的肝竇擴張充血,還可以看到有肝小葉號、19 號、20 號、26 號)(圖 7、8)。靜脈內皮被破壞的現象(2圖 1:急性組腎小管(22 號)(可見水變性)圖 2:慢性組腎臟(15 號)(可見水變性)圖 3:慢性組肺組織(2 號)(可見肺不張)圖 4:急性組肺組織
7、(26 號)(肺泡內可見)圖 5:空白組肝組織 (40 號)(水變性)圖 6:慢性組肝組織(15 號)(水變性)圖 7:急性組肝組織(26 號)(肝3 討論血)圖 8:慢性組(19 號)(靜脈充血,可見內皮破壞)有研究指出,AST有兩種同工酶,分別位于肝細胞線粒體內(ASTm)(占80)和細胞漿基質內(ASTs)(占20),肝細胞病變較輕,只有細胞膜通透性增加時,細胞漿基質內的ASTs和ALT入血,ASTm仍然保存,嚴重肝細胞壞死時,ASTm也入血,使血清AST升高幅度較ALT為大1,2。本次實驗中,慢性急性組小鼠AST相對于空白組升高,而ALT和空白組相似,說明AST較ALT升高較為大,因此
8、可以認為慢性組小鼠已經發(fā)生嚴重的肝損傷。還有,雖然結果顯示慢性組小白鼠血清中的ALT、AST并沒有性組小鼠血清ALT、AST升高,但也不能說長期使用蚊香對小鼠的肝功能沒有損害。升高,只有在慢因為急性組小鼠AST、ALT相對空白組并沒有升高,而慢性組的AST比空白組升高,這就表明慢性過程已經對肝細胞造成損傷,使得其膜的性下降,在急性條件下細胞更容易受損。已經有研究證明,在門窗關閉的的情況下,有煙蚊香和無煙蚊香燃燒后均會造成嚴重的室內空氣污染。蚊香燃燒屬全燃燒,可產生CO、CO2 、可吸入顆粒(IP)等空氣污染物。有煙蚊香燃燒后主要產生室內嚴重IP污染,無煙蚊香燃燒后主要造成室內嚴重CO污染3。C
9、O,CO2 污染均會造成機體組織缺氧,進而造成細胞缺氧性損傷, 導致細胞膜,線粒體膜,溶酶體膜的改變。同時,蚊香中的有效成分除蟲菊脂進入體內后若肝臟的防御功4。能失效,則會引起細胞受損,甚至肝細胞受損后肝竇中的KUPFFER細胞大量被激活,肝的清除能力加強。有研究表明肝AST的清除大于ALT 1, ALT的半衰期又較短5,而本次實驗是在煙熏后8h才取血做檢測,所以AST和ALT可以在這一段時間降到正常水平。還有本次試驗慢性組持續(xù)的時間僅6天,對小鼠的慢性損傷作用可能還沒有表現出來。因此試驗結果顯示的慢性組AST、ALT沒有升高不一定是真實的反映。AST、ALT這二種酶的活性對肝臟受損均是一項敏
10、感的指標,但AST/ALT ALT比值增高更能反映肝細胞受損的嚴重程度6。本次實驗雖然結果顯示四個實驗組AST/ALT的差別并無統(tǒng)計學意義,但是慢性組已經有升高的趨勢,差別沒有統(tǒng)計學意義可能是因為持續(xù)的時間太短,僅僅只有6天有關。如果持續(xù)的時間更長的話,它們之間的差別可能就顯示出統(tǒng)計學意義來。實驗時,只是從每個實驗組選取3個樣本做病理切片,因此樣本含量很少,實驗組之間的差別比一定能反映出來。從現有的切片結果可以看出:蚊香對腎、肺、肝組織都有損害作用。實驗組和空白組相比,腎臟腎小管上皮有水變性的表現;肺泡內有,肺不張以及肺部小擴張充血的現象,但是各實驗組之間沒有明顯的差別。而肝臟切片的結果則出現
11、反常的結果,正常組肝細胞水變性是最嚴重的,而實驗組卻有幾只小白鼠的肝臟沒有明顯病理變化,有病變的小白鼠也就是水變性,肝竇擴張充血,而且它們水變性的程度沒有空白組嚴重。這種反常現象可能是由于實驗過程中出現了某種失誤造成的。細胞發(fā)生水變性,說明蚊香的毒性物質已損及線粒體內ATP產生,其細胞膜上的Na-K-ATP酶活性降低,使細胞膜對電解質的主動的功能發(fā)生,的鈉、鈣離子和水進入細胞內,而細胞內鉀離子外逸,導致細胞內水分增多,形成細胞腫脹,細胞水變性7。因此,細胞發(fā)生水變性,說明已經損傷了細胞的線粒體,細胞的損傷比較嚴重。另有文獻現8:盤式蚊香點燃后產生的煙霧可以嗆人、刺激眼結膜,還出具有活性的苯并芘
12、。對肺的損傷主要是因為蚊香在燃燒過程中會產生大量的可吸入顆粒3,這些微粒會引起肺部的炎癥反映,炎癥反應產生的炎癥因子會對肺造成組織損傷。還有本次實驗的樣本含量太少而且各組間的樣本含量差別很大,而且慢性組持續(xù)的時間也比較短,各組之間本應有的差別不一定能夠表現出來,所以,本次實驗的結果有待于做進一步的研究。本次實驗還留給我們一些疑問:首先本次實驗慢性組ALT、AST均比慢性組顯著升高,說明急性試驗對小鼠的肝臟也是有損害的,但是急性組的AST、AST在試驗結果中并沒有顯示出于空白組的差別來,是正常小鼠對蚊香有耐受作用,還是另有其它機制,抑或是實驗過稱中出了問題;其次,肝臟受損,膽紅素的代謝也會出現,
13、血中的膽紅素也應該升高,但是本次實驗卻沒有表現出差別來,這是不是也隱藏著什么機制?再次,慢性組到底是因為實驗持續(xù)的時間短才出現這種和空白組無差別的結果,還是慢性實驗本來就對AST、ALT無影響?還有,病理切片中,空白組的肝組織細胞為什么會出現如此嚴重的水變性?這些個問題都有待于探討。4 結論蚊香對小白鼠的腎、肺、肝都有損害作用,特別是在門窗關閉的情況下,會產生很多對其有損害作用的污染物。所以在用蚊香時,一定注意開窗通風。還有,嬰幼兒的抵抗力比成人要低,盡量不要用蚊香, 要不然會對健康造成損害。參考文獻1、王英,. ASTALT比值在各種肝病中的變化和意義.熱帶醫(yī)學.2001,1(3):222223.2、3、. 肝病患者ASTALT比值的檢測及臨床意義. 浙江臨床醫(yī)學.2002,4(12):942943.霞,陳,煉. 兩種類型的蚊香對室內空氣污染的研究. 江蘇預防醫(yī)學. 2004,15(3)
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