1、生化考研重點知識總結(jié)第一章 單糖 多糖與碘顯色，至少需要的葡萄糖殘基數(shù)：6 唾液淀粉酶激活劑 ： Cl - 幾個典型非還原糖 ： 蔗糖、糖原、淀粉 形成N-糖肽鍵的單糖或衍生物是 ：第二章 油脂 幾個非飽和脂肪酸雙鍵數(shù)：油酸： 1亞油酸： 2亞麻酸： 3 人不能自身合成的必須脂肪酸： 亞油酸、亞麻酸 四種脂類轉(zhuǎn)運脂蛋白 ：CM乳糜微粒，轉(zhuǎn)運外源性三酰甘油酯VLDL:極低密度脂蛋白，轉(zhuǎn)運內(nèi)源性三酰甘油酯LDL：低密度脂蛋白，轉(zhuǎn)運內(nèi)源性膽固醇HDL高密度脂蛋白，轉(zhuǎn)運外源性膽固醇第三章 氨基酸與蛋白質(zhì) 幾種主要氨基酸及三字母縮寫兩特殊： Pro、Gly芳香：酪（Tyr ）色（Trp/Try，吸光最強

2、）苯（Phe）八種必需氨基酸： 甲攜來一本亮色書， Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr側(cè)鏈為羥基氨基酸：蘇（Thr ）絲（Ser ）酪（Tyr）酸性氨基酸： 天（Asp）谷（Glu）對應(yīng)兩酰胺：Asn、Gin堿性氨基酸： 賴（Lys ）精（Arg ）組（His ）其它： 丙氨酸（ Ala ） PI PI 的計算：PI= （ PK1+PK2 /2=（PK1+PKR：ooH/2=（PK2+PKRnh/2 PH 的計算：PH=PK1+Lg（R/R+） =PK2+Lg （ R/R）PH =7的水中溶蛋白，PH=6則該蛋白PI<6 :蛋白溶后PH下降為6,表明蛋白的CO

3、OH 電離出H：則產(chǎn)生了 R，PH=6>PI時有R 蛋白二級結(jié)構(gòu)a螺旋：Sn=3.613,存在Pro時不形成a螺旋，右手螺旋B折疊：同/反向，肽鍵中H與O成氫鍵，軸距0.35nmB轉(zhuǎn)角：轉(zhuǎn)角處為Gly 超二級結(jié)構(gòu)： 無規(guī)卷曲、結(jié)構(gòu)域 三級結(jié)構(gòu)： 作用力（ 二硫鍵、疏水作用力、氫鍵、靜電離子鍵、范德華力 ） 蛋白結(jié)構(gòu)分析N端分析法：FDNB（ Sanger）、PITC （Edmar）、DNS-Cl （丹磺酰氯）、氨肽酶法C端分析法：羧肽酶法、無水肼解法羧肽酶A：不能水解C端為Lys、Arg、Pro的肽鍵；羧肽酶B：能水解C端為Lys、Arg的肽 鍵；C端倒數(shù)第二位是 Pro時，A B都不能

4、水 解打開二硫鍵： 還原法（巰基化合物,碘乙酸保護）、氧化法（過甲酸）專一切斷：胰蛋白酶（Lys、Arg-COOH肽鍵）；CNBr （ Met-COOH肽鍵）；胰凝乳蛋白酶 （）； 顯色反應(yīng)Follin 酚：藍色，酚基（Tyr）、吲哚基（Trp），組分（CuSQ+磷鉬酸）Millon :紅色，酚基（Tyr），組分（HgNO+Hg （ NO） 2）坂口反應(yīng)：紅色，胍基（Arg ），組分（a萘酚，NaCIO）黃色反應(yīng)： 黃色,芳香氨基酸,組分（濃HNO3）雙縮脲反應(yīng)： 紫紅色,肽鍵,多肽,組分（NaOH+CuS4O乙醛酸反應(yīng)： 紫色,吲哚基（ Trp ） 幾種重要氨基酸提供活性甲基的：S-腺苷Me

5、t形成N-糖肽鍵的：Asp 膠原蛋白中含量高的氨基酸： Gly、 Ala、 Pro、 HO-Pro、 HO-Lys 蛋白分離純化技術(shù)： 透析、超濾；密度梯度離心；凝膠過濾； PI 法、鹽析、有機溶劑 法；電泳、離子交換；吸附層析；親和層析凝膠過濾大分子先出，凝膠電泳相反：機理分子運動速度決定因素： 大小、電荷量、形狀蛋白離子交換層析與洗脫：凝膠電泳三效應(yīng)： 電荷、分子篩、濃度效應(yīng) 蛋白含量測定測 N： 凱氏定氮、紫外吸光、雙縮脲吸光、福林酚顯色吸光測 M： 沉降離心、凝膠過濾（凝膠排阻層析）、 SDS-PAGE凱氏定氮：HNO反應(yīng)，生成的N2中氨基酸占1/2（11）其它分離二硫基的肽段可用：

6、SDS-PAGE幾個主要氨基酸的 PI 值：幾種重要蛋白：鐮刀貧血?。?Glu t Vai，第6位與烷化劑（碘乙酸）反應(yīng)的氨基酸：Cys （半胱氨酸）第四章 酶學 酶活化中心組成： 結(jié)合部位、催化部位 計算： 活力單位（ IU、Kat） 、比活力（ IU/mg） 、轉(zhuǎn)化數(shù) /轉(zhuǎn)化周期、米氏方程 各可逆抑制作用的動力學特點：Km、VmaxCN幾個抑制作用： 競爭抑制（ 丙二酸對琥珀酸脫氫酶 ）；有有機磷（ 與絲氨酸羥基共價不 可逆）；CO CN （作用于Cytaas）;不可逆抑制（重金屬、有機砷、 化物、硫化物、 CO） 酶促反應(yīng)初速度與 E 、 T 有關(guān) 以“三點結(jié)合”模型作用的酶：甘油激酶

7、酶的專一性專一水解葡萄糖形成的二酯鍵的酶：以02為直接氫受體的氧化酶：VC氧化酶、細胞色素氧化酶 別構(gòu)酶 兩獨立功能部位： 活性中心、變構(gòu)中心動力學曲線：S型，其它為雙曲線具有效應(yīng)： 協(xié)同效應(yīng)、變構(gòu)效應(yīng) 典型代表 血紅蛋白： 協(xié)同效應(yīng)、波爾效應(yīng)、變構(gòu)效應(yīng) 酶分離純化要求： 純化倍數(shù)高、回收率高純化倍數(shù) =比活力 / 純化前總比活力回收率 =活力單位數(shù) / 純化前活力單位數(shù)方法： 同蛋白質(zhì) 競爭性抑制劑： 增 S 可減弱抑制作用 患尿黑酸癥的病人是由于：缺少尿黑酸氧化酶（ 尿黑酸氧化酶遺傳缺陷 ）第五章 核酸 反向互補配對： ACG-CGT（U） N-苷鍵：¥（ C1 -C5），嘌呤（

8、N9-C1 '）,嘧啶（N1-C1'） SnRNA核仁不均一 RNA功能（促進轉(zhuǎn)錄、） 核酸分離技術(shù) 凝膠電泳： 三效應(yīng)、分子運動速度決定因素 見蛋白質(zhì)離子交換層析：陽離子交換層析，核苷酸脫下順序：3 C A陰離子交換層析，核苷酸脫下順序：S At Ui G 親和層析： 可用親和層析法分離的核酸：mRN（A PolyA 尾 ）Sanger 、 DNA測序三法： 加減法（Sanger、1975），化學斷裂法，雙脫氧終止法（1977、原理 ） 不能形成兩性離子的核苷酸是UMP： 原因 cNMP最重要的 cNMP： cAMP、 cGMPCAMP第二信使cAMP分子內(nèi)有：環(huán)化的磷酸二酯

9、鍵cAMP與 CGMP生物作用并不是完全相反第六章 分子生物學與基因工程 基因組學 啟動子組成 3部分：識別部位（-35、CG/CAAT，結(jié)合部位（-10、TATA，轉(zhuǎn)錄起始點 高度重復(fù)序列： 衛(wèi)星DNA小衛(wèi)星DNA微衛(wèi)星DNA原核生物基因重疊類型：基因家族按特點分三類： 簡單多基因家族、復(fù)雜多基因家族、發(fā)育調(diào)控的復(fù)雜多基因家 族基因家族按組成分三類： DNA復(fù)制DNA復(fù)制方式：線性（眼型），環(huán)狀【B （大腸桿菌）、滾環(huán)（病毒質(zhì)粒）、D型（線粒體、葉綠體）】DNA復(fù)制需引物：轉(zhuǎn)錄不需引物原核DNA聚合酶功能：損傷修復(fù)、校正、合成 DNA 基因工程酶RNase:RNaseA（嘧啶 3'宀

10、 5' ）、RNaseTI （G 的 3'5 '）、RNaseT2 （A 的 3'宀 5'）DNA連接酶所需能量： 原核ATP、真核NAD+轉(zhuǎn)移水解 DNA-RNA中的 RNA的酶：RNaseH逆轉(zhuǎn)錄酶（有 RNaseH活性）牛脾磷酸二酯酶水解 RNA所得產(chǎn)物：5'磷酸切開，產(chǎn)生 3'單磷酸核苷蛇毒磷酸二酯酶水解 RNA所得產(chǎn)物：3' -OH切開，產(chǎn)生5'單磷酸核苷核酸合成酶： DDDP（依賴 DNA的 DNA聚合酶）、RDDP（依賴 RNA的 DNA聚合酶）、DDRP （依賴DNA的 RNA聚合酶）RNAPOI2: RN

11、APolB 合成hnRNA 分布在核質(zhì)中RNA用強堿水解產(chǎn)生：2'-核苷酸、3'-核苷酸混合物限制內(nèi)切酶切割特點： 4-8bp、 6bp 主要，成黏性、平齊末端，成回文序列，甲基化難切 tRNA結(jié)構(gòu)含稀有堿基最多：D （二氫尿嘧啶）、"（假尿嘧啶）、I （次黃嘌呤）四環(huán)四臂五區(qū)：D臂、T" C臂、氨基酸臂（受體臂）、反密碼子臂二級： 三葉草三級： 倒 L 基因表達 DNA重組過程中DNA連接四方式：粘性末端連接、同聚物加尾法、加銜接物連接法、加DNA接頭連接法轉(zhuǎn)位：三類轉(zhuǎn)位因子【（插入序列IS ）、轉(zhuǎn)座子（Tn）、可轉(zhuǎn)座噬菌體】，轉(zhuǎn)位后遺傳效應(yīng)（突變、產(chǎn)生新

12、基因、染色體畸變）轉(zhuǎn)錄：轉(zhuǎn)錄5 '端常見起始核苷酸是 G A,原核終止子在終止位點前有PolyU翻譯：參與肽鏈延伸的因子（EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子），肽基轉(zhuǎn)移酶催化組分（23SrRNA，蛋白合成時生成肽鍵的能量來自高能酯鍵水解轉(zhuǎn)錄抑制劑：利福平、利迪鏈霉素、放線素Da -鵝膏覃堿翻譯抑制劑：抗生素（氯霉素、鏈霉素、卡那霉素、新霉素、四環(huán)素、土霉素）機理干擾素 （使起始因子 eIF2 磷酸化失活 ）， 毒素（抑制真核肽鏈延長 ）基因工程基因工程載體：必備條件 （ 自主復(fù)制、有標志基因便于篩選、易引入受體細胞、酶切位點少、M大可攜帶大片基因）常用載體 （ 質(zhì)粒、病毒、噬菌體、

13、人工大染色體改造而來 ）DNA文庫：含某種生物體全部被轉(zhuǎn)錄成 mRNA勺所有基因序列密碼子起始密碼子：原核（AUG GUG UUG對應(yīng)fMet）真核（AUG對應(yīng) Met）起始 tRNA： t R NAMet 、 tRNAfMet終止密碼子：UAA、 UAG、 UGA無義密碼子：UAA、 UAG、 UGA線粒體中三種特殊密碼子：UGA-色氨酸原核RF1識別的密碼子： UAA UAX探RF2識別的密碼子： UAA UGA密碼子性質(zhì)：不重疊、特殊性、通用性、簡并性、連續(xù)性、擺動性擺動性：A-U，U-A、G，C-G，G-C、U，I- A、U、C 其它Sn RNA功能：RNA成熟加工、與染色質(zhì)結(jié)合、調(diào)節(jié)

14、基因活性多拷貝基因有： 組蛋白基因、3 種印跡法對應(yīng)檢測對象：S-DNA、 N-RNA、 W-ProTm的影響三因素：C三G鹽濃度（Na+）、DNA均一性（均一宀窄）Tm=（ C+G % 0.41+69.3第七章 維生素與激素 幾種重要酶的輔酶脫羧酶：a酮酸脫羧酶（TPP/VB1）、氨基酸脫羧酶（磷酸吡哆醛（VB6）磷酸吡哆醛： 氨基酸脫羧酶、轉(zhuǎn)氨酶 的輔酶以FAD為輔酶的酶：二氫硫辛酰胺脫氫酶、脂酰輔酶A脫氫酶、琥珀酸脫氫酶、線粒體a磷酸甘油脫氫酶羧化酶的輔酶： 生物素（ VB7）VB12:鈷胺素（參與甲基轉(zhuǎn)移）氧化還原酶的輔酶： NAD+以NADP為輔酶的酶：蘋果酸酶、6-p-G脫氫酶以F

15、AK為輔酶的酶：脂酰輔酶A脫氫酶 幾種特定功能的維生素凝血維生素：VK,脂溶抗血維生素：VC,水溶含A的維生素：NAD+ NADP FAD CoASH探VD:體內(nèi)活性最高的 VD是：1,25-二羥基膽鈣化醇1,25- （ OH 2D3兩種VD原：VD3（ 7-脫氫膽固醇），VD2（麥角固醇）VD的形成：膽固醇t 7-脫氫膽固醇t VD3 胰島素等激素的受體是： 含N激素受體在激素作用下與腺苷酸環(huán)化酶的耦聯(lián)是由G蛋白介導(dǎo)實現(xiàn)的 蛋白質(zhì)類激素受體位于：細胞質(zhì)膜上 類固醇激素受體位于：細胞內(nèi)第八章 生物氧化 肌肉或神經(jīng)細胞儲存能量的高能化合物是：磷酸肌酸（ IP3） 高能化合物有： 磷酸肌酸、 1,

16、3- 二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）、 生物合成中主要的還原劑；NADPH來源于HMS（磷酸戊糖途徑/磷酸己糖旁路） 生物氧化過程中，ATP生成方式：底物水平磷酸化、氧化磷酸化 線粒體的嵴： 外表面與基質(zhì)接觸，含有氧化磷酸化組分 ATP合成酶F0F1-ATPase是：催化ATP合成的酶形式，一種膜結(jié)合復(fù)合物，單獨存在時沒ATP酶活性F0:含H+通道 ATP合成機理 細胞質(zhì)脫下的一對氫進入線粒體的三方式：異檸檬酸穿梭、蘋果酸穿梭、甘油磷酸穿梭 丙氨酸脫氫酶系的輔因子：TPP（VB1）、CoASH FAD NAD+硫辛酸、Mg2+丙氨酸脫氫酶系的酶： 丙酮酸脫羧酶、硫辛酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、二氫

17、硫辛酸脫氫酶 醛縮酶的底物是：F-1,6-2P（11）在TCA有氧呼吸鏈中產(chǎn)生的 ATP最多的是：a -酮戊二酸t(yī)琥珀酸第九章 糖代謝糖酵解 部位： 胞液 過程： 葡萄糖、糖元轉(zhuǎn)變?yōu)楸?三關(guān)鍵酶：己糖激酶：包括（葡糖糖激酶、果糖激酶），不受ATP/AMP的調(diào)節(jié)磷酸果糖激酶： 限速，主要激活劑（2,6-二磷酸果糖），抑制劑（ATP檸檬酸）丙酮酸激酶：受ATP/AMP的抑制 產(chǎn)能： 2ATP 醛縮酶的底物： F-1 ， 6-P2（1， 6-二磷酸果糖）糖代謝中既催化脫氫又催化脫羧的兩種酶： 異檸檬酸脫氫酶、 6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶 糖的有氧氧化 丙酮酸t(yī)乙酰輔酶 A：部位 ：線粒體內(nèi)膜丙酮酸脫

18、氫酶系： 3 酶（ 丙酮酸脫羧酶、硫辛酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、二氫硫辛酸脫氫酶 ）5 輔（TPP （VB1）、CoASH FAD NAD+ 硫辛酸、 Mg2+ TCA循環(huán)：檸檬酸循環(huán)、Krebs循環(huán)調(diào)節(jié)TCA循環(huán)運轉(zhuǎn)最主要的酶：異檸檬酸脫氫酶（限速）、a-酮戊二酸脫氫酶系部位： 線粒體基質(zhì)、內(nèi)膜- 酮戊二酸脫氫酶系酶：檸檬酸合酶、異檸檬酸脫氫酶（限速）、a 1分子葡萄糖有氧氧化產(chǎn)生 ATP數(shù)：36 (38) =2+6 (4) +6+24 草酰乙酸來源三途徑：蘋果酸酶和蘋果酸脫氫酶、丙酮酸脫羧酶、磷酸丙酮酸脫羧酶磷酸戊糖途徑、磷酸己糖旁路HMS 核糖的分解途徑是：HMS 生物合成中除ATP供能外合成糖還需

19、： UTP合成脂肪還需： GTP生物合成的還原力是 NADPH來源是HMS反應(yīng)部位總結(jié)糖酵解( EMP)： 胞質(zhì)TCA： 線粒體基質(zhì)、內(nèi)膜氧化磷酸化： 線粒體內(nèi)膜糖元代謝 合成糖元時，葡萄糖先活化成：UDPG 植物合成淀粉時需：ADPG 合成蔗糖需： UDPG、 6-P-G糖異生第十章 脂代謝三酰甘油代謝分解代謝B -氧化：反應(yīng)部位： 線粒體基質(zhì)產(chǎn)物：偶數(shù)碳(乙酰CoA、奇數(shù)碳(幾個乙酰CoA+1個丙酰CoA反應(yīng)過程：二步脫氫(生成1FADH+1NADH、產(chǎn)ATP ( 5個)飽和脂肪酸分解酮體生成部位： 肝內(nèi)成分：乙酰乙酸、B -羥丁酸、丙酮利用部位： 肝外，腦、肌不飽和脂肪酸氧化分解： 兩特殊酶：順-反烯酯酰CoA異構(gòu)酶、順-反-B羥酯酰CoA異構(gòu)酶1分子軟脂酸（16C）徹底氧化分解成 CO、H2O生成ATP數(shù)：脂肪酸合成脂肪酸合成代謝還原力是NADPH來源是HMS催化胞液脂肪酸合成的限速反應(yīng)由乙酰CoA羧化酶催化?；d體為 ACP 3 -氧化中?；d體是 乙酰CoA磷脂代謝合成磷脂所需能量來自： CTP膽固醇代謝在體內(nèi)可直接合成膽固醇的化合物是： 脂酰 CoA第十一章 氨基酸與蛋白質(zhì)代謝 幾種氨基酸生酮氨基酸： Leu 、 Lys生糖氨基酸： 除 Le