1、    國(guó)產(chǎn)舒他西林膠囊的相對(duì)生物利用度        摘要目的：了解國(guó)產(chǎn)舒他西林膠囊的相對(duì)生物利用度，評(píng)價(jià)其生物等效性。方法：10名健康志愿者隨機(jī)交叉po單劑量750mg國(guó)產(chǎn)舒他西林膠囊和進(jìn)口片劑后，采用HPLC測(cè)定血漿中的血藥濃度。結(jié)果：口服國(guó)產(chǎn)舒他西林膠囊和進(jìn)口片劑后，利用HPLC測(cè)得血漿中藥物濃度舒巴坦分別在(38.66±10.39)min和(36.68±11.37)min達(dá)到峰值(3.45±2.63)mg.L-1和(4.21±

2、3.67)mg.L-1；氨芐西林分別在(26.13±5.98)min和(28.00±7.54)min達(dá)到峰值(7.11±2.19)mg.L-1和(7.46±2.79)mg.L-1。血藥濃度曲線下面積舒巴坦分別為(629.98±177.34)mg.min.L-1和(687.78±225.44)mg.min.L-1；氨芐西林分別為(693.87±192.15)mg.min.L-1和(708.87±202.48)mg.min.L-1。經(jīng)藥動(dòng)力學(xué)程序計(jì)算擬合后，發(fā)現(xiàn)氨芐西林和舒巴坦在體內(nèi)的過程符合一級(jí)吸收和消除的二室模型。

3、國(guó)產(chǎn)舒他西林膠囊的相對(duì)生物利用度舒巴坦為95%(81%118%)，氨芐西林為99%(81%115%)兩藥的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)無顯著性差異(P0.05)。結(jié)論：國(guó)產(chǎn)舒他西林膠囊和進(jìn)口片劑具有生物等效性。 關(guān)鍵詞舒他西林；舒巴坦；氨芐西林；生物利用度；HPLCRelative bioavailability of domestic sultamicillin capsule Jin Rui (Jin R),Liu Hongmei (Liu HM),Ma Lin (Ma L),et al (Institute of Clinical pharmacy,the Second Affiliated Ho

4、spital,Harbin Medical University,Harbin150086)ABSTRACTOBJECTIVE：To observe the relative bioavailability of domestic sultamicillin and evaluate the bioequivalence between the domestic capsule and the imported tablet.METHODS:The pharmacokinetics of sultamicillin capsule was determined following a sing

5、le oral dose of 750mg give to 10 volunteers in an open randomized crossover study.Drug concentration in plasma was assayed by HPLC method.RESULTS:The sulbactam peak levels in plasma averaged(3.45±2.63) and (4.21±3.67)mg.L-1 at (38.66±10.39)and(36.68±11.37)min,respectively.The amp

6、icillin peak levels in plasma averaged(7.11±2.19)and(7.46±2.79)mg.L-1 at(26.13±5.98)and(28.00±7.54)min,respectively.The AUC were (629.98±177.34) and (687.78±225.44)mg.min.L-1for (693.87±192.15) and (708.87±202.48)mg.min.L-1 for domestic capsule and improrted t

7、ablet respectively.The concentration-time courses after medication conformed to a 2-compartment open model with a first order obsorption.The sulbactam bioavailability of domestic capsule was 95%(81%118%),the ampicillin bioavailability of it was 99%(81%115%) compared with the standard preparation.The

8、 pharmacokinetic parameters between two products had no significant difference (P0.05).CONCLUSION:The two formulations were of bioequivalence.KEYWORDSsultamicillin,sulbactam,ampicillin,bioavailability,HPLC甲苯磺酸舒他西林(簡(jiǎn)稱舒他西林sultamicillin,Stm)為等摩爾氨芐西林(ampicillin,Amc)和舒巴坦(sulbactam，Sbt)共價(jià)結(jié)合形成的甲苯磺酸酯，氨芐西林為廣

9、譜-內(nèi)酰胺類青霉素，舒巴坦為-內(nèi)酰胺酶抑制劑，本身無抗菌活性，但可以抑制細(xì)菌產(chǎn)生的-內(nèi)酰胺酶，使抗生素免受酶的水解滅活，從而發(fā)揮藥物對(duì)產(chǎn)酶菌的抗菌作用。該藥經(jīng)口服吸收后在胃腸上壁被體內(nèi)非特異性酯酶分解為氨芐西林的舒巴坦，并被吸收入血1。本實(shí)驗(yàn)采用專屬性好的高效液相色譜法測(cè)定血漿中氨芐西林和舒巴坦的藥物濃度2，觀察健康受試者口服國(guó)產(chǎn)舒他西林膠囊后血藥濃度的經(jīng)時(shí)過程，估算相應(yīng)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，并以進(jìn)口舒他西林片劑為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，為臨床用藥提供參考依據(jù)。1材料與方法1.1藥品與試劑氨芐西林對(duì)照品，批號(hào)410-9402，效價(jià)：85.6%；舒巴坦對(duì)照品，批號(hào)0430-9501，效價(jià)：99.8%，均購(gòu)自中國(guó)藥

10、品生物制品檢定所。舒他西林供試膠囊(哈爾濱制藥二廠產(chǎn)品，批號(hào)：961204，規(guī)格125mg.粒-1)。舒他西林對(duì)照片劑(美國(guó)輝瑞制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：606-39645，規(guī)格：375mg.片-1)。乙腈為色譜純，甲醇、高氯酸、乙醚、KH2PO4皆為分析純，各種溶液的配制均使用超純水。1.2儀器Waters 2010高效液相色譜儀(717自動(dòng)進(jìn)樣器，510泵，996 PDA檢測(cè)器，Millenium色譜管理系統(tǒng))，SPE C18預(yù)處理小柱，離心機(jī)，旋渦混合器XW-80型，純水制備儀(美國(guó)密理博公司)。1.3色譜條件1.3.1舒巴坦色譜條件色譜柱為Spherisorb C18 10不銹鋼柱，檢測(cè)

11、波長(zhǎng)210nm。流動(dòng)相：乙腈-0.068mol.L-1KH2PO4(298)，用前超聲脫氣。流速為1.2ml.min-1，進(jìn)樣量50l。1.3.2氨芐西林色譜條件色譜柱為YWG C18 10不銹鋼柱，檢測(cè)波長(zhǎng)210nm，流動(dòng)相：乙腈-0.068 mol.L-1KH2PO4(4.595.5)，流速為1.2ml.min-1，進(jìn)樣量100l，柱溫為室溫。1.4試驗(yàn)對(duì)象及方法男性健康受試者10名，年齡(21±2)歲，體重(65±5)kg，經(jīng)生化檢驗(yàn)證實(shí)肝、腎功能正常，實(shí)驗(yàn)前一周及實(shí)驗(yàn)期間未服用其它任何藥物，4h后方允許進(jìn)低脂肪的統(tǒng)一飲食。受試者隨機(jī)分成兩組，每組5人，分別服用膠囊制

12、劑和片劑。第二次試驗(yàn)兩組交叉，兩次試驗(yàn)間隔1周。于早800空腹單劑量服藥750mg，200ml溫開水送服，于服藥后即0，10，20，30，45，60，90，120，180，240，420min于肘靜脈取血4ml，置肝素化試管中，離心，取0.5ml血漿供分析。同時(shí)觀察可能出現(xiàn)的藥物不良反應(yīng)。1.5血樣處理和標(biāo)準(zhǔn)曲線1.5.1舒巴坦血樣處理和標(biāo)準(zhǔn)曲線取肝素化血漿0.5mol.L-1加入HCl 0.5ml酸化，然后用乙醚提取3次，每次2ml，4000r.min-1，離心5min后小心取出乙醚層，轉(zhuǎn)移至另一試管中，并于40水浴蒸干，殘?jiān)?.2ml流動(dòng)相溶解，進(jìn)樣50l，外標(biāo)法定量分析。取健康人血漿0

13、.5ml共9管分別加入舒巴坦標(biāo)準(zhǔn)品，使其濃度分別為0.125，0.25，0.5，1，2，4，6，8，10mg.L-1。樣品處理方法同上，經(jīng)HPLC測(cè)定，以樣品峰面積A對(duì)濃度c作線性回歸，得出回歸方程：c=0.354+1.74×10-5A，r=0.998。1.5.2氨芐西林血樣處理和標(biāo)準(zhǔn)曲線取肝素化血漿0.5ml，精密加入1倍0.5mol.L-1高氯酸沉淀蛋白，漩渦振蕩30s,9000r.min-1離心5min取上清液，100l進(jìn)樣，外標(biāo)法定量分析。取健康人血漿0.5ml共7管分別加入氨芐西林標(biāo)準(zhǔn)品，使其濃度分別為0.125，0.25，1，4，6，10，20mg.L-1。樣品處理方法同

14、上，經(jīng)HPLC測(cè)定，以樣品峰面積A對(duì)濃度c作線性回歸，得出回歸方程：c-0.2687+1.99×10-5A，r=0.9989。1.6方法回收率的測(cè)定1.6.1舒巴坦方法回收率的測(cè)定取肝素化血漿0.5ml，精密加入不同濃度的舒巴坦標(biāo)準(zhǔn)品100l，使其血漿中藥物濃度為0.5，2，8mg.L-1，按1.5.1項(xiàng)下操作，測(cè)得血漿中舒巴坦提取回收率，3個(gè)濃度的提取回收率分別為(78.11±7.37)%，(80.46±7.92)%，(82.36±5.41)%；RSD分別為9.43%，9.84%，6.57%。1.6.2氨芐西林方法回收率的測(cè)定取肝素化血漿0.5ml，精

15、密加入不同濃度的氨芐西林標(biāo)準(zhǔn)品100l，使其血漿中藥物濃度為0.5，2，8mg.L-1，按“1.5.2”項(xiàng)下操作，測(cè)得血漿中氨芐西林提取回收率，3個(gè)濃度的平均回收率分別為(88.07±7.11)%，(90.17±7.49)%，(94.09±3.18)%；RSD分別為8.07%，8.31%，3.38%。1.7方法精密度試驗(yàn)3個(gè)濃度在以上相同條件下測(cè)定日內(nèi)變異和五日內(nèi)的日間變異、舒巴坦和氨芐西林方法的精密度試驗(yàn)結(jié)果見表1。表1舒巴坦和氨芐西林方法的日內(nèi)和日間變異.n=5濃度/mg.L-1日內(nèi)變異日間變異±sRSD%±sRSD%舒0.50.49

16、77;0.05411.020.48±0.0459.36巴21.99±0.0713.552.01±0.0673.32坦87.85±0.445.648.05±0.242.95氨芐西林0.50.50±0.0316.200.50±0.0255.0022.06±0.0984.752.08±0.167.6987.99±0.0991.248.09±0.111.361.8數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)采用MCPKP處理，擬合，得到受試者的各項(xiàng)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。對(duì)兩種制劑中氨芐西林和舒巴坦的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)和(

17、1-2)置信區(qū)間法進(jìn)行生物等效性評(píng)價(jià)3。 2結(jié)果2.1口服750mg舒他西林的血藥濃度和藥-時(shí)曲線兩種制劑交叉給予10名受試者后，其藥-時(shí)曲線符合口服二室模型，血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)以Slidewrite Plus程序擬合，擬合曲線舒巴坦見1，氨芐西林見2。其藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)舒巴坦見表2，氨芐西林見表3。1舒巴坦平均藥-時(shí)曲線國(guó)產(chǎn)片劑；-進(jìn)口片劑，2同2.2統(tǒng)計(jì)分析上述試驗(yàn)中以進(jìn)口片劑為對(duì)照制劑，國(guó)產(chǎn)膠囊為待測(cè)品，對(duì)兩種制劑中舒巴坦和氨芐西林的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：兩藥的吸收半衰期、達(dá)峰時(shí)間、達(dá)峰濃度、峰面積無顯著性差異(P0.05)。兩藥AUC的1-2置信區(qū)間(90%)氨芐西林為2氨芐

18、西林平均藥-時(shí)曲線表2口服兩種舒他西林制劑后舒巴坦的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù).±s，n=10參數(shù)國(guó)產(chǎn)膠囊進(jìn)口片劑A/mg.L-137.39±49.5717.95±17.94B/mg.L-10.89±0.621.14±0.78/min-10.0402±0.02470.0306±0.0123/min-10.0019±0.00090.0027±0.0017K/min-10.0762±0.03830.0746±0.0311K12/min-10.0237±0.02030.0142±0.

19、0082K21/min-10.0059±0.00260.0075±0.0040K10/min-10.0124±0.00540.0117±0.0071t1/2k/min11.42± 5.6411.21±6.01t1/2/min24.49±16.3727.18±14.10t1/2/min433.29±191.57371.36±242.39tmax/min38.66±10.3936.68±11.37cmax/mg.L-13.45±2.634.21±3.67AUC

20、/mg.min.L-1639.98±177.19687.78±225.44681.05736.68mg.min.L-1，舒巴坦591.40784.15mg.min.L-1。國(guó)產(chǎn)制劑AUC平均值在以上置信區(qū)間內(nèi)，因此，可判斷兩藥的生物利用度等效。 3討論據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道舒他西林不同種屬及不同個(gè)體間差異較大4。本次實(shí)驗(yàn)采用3次乙醚提取可以使舒巴坦的回收率由兩次提取的60%提高到80%，所得到的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)和國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果基本一致。表3口服兩種舒他西林制劑后氨芐西林的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù).±s,n=10參數(shù)國(guó)產(chǎn)膠囊進(jìn)口片劑A/mg.L-183.64±73.5539.

21、10±23.99B/mg.L-12.85±1.382.68±1.34/min-10.0495±0.02010.0509±0.0172/min-10.0067±0.00280.0063±0.0025K/min-10.0818±0.03040.0929±0.0295K12/min-10.0188±0.01280.0194±0.0104K21/min-10.0143±0.00730.0136±0.0063k10/min-10.0231±0.00570.0241±0.0076t1/2k/min9.73±4.048.17±2.63t1/2/min16.21±6.6815.31±5.84t1/2/min129.45±73.63125.92±48.06tmax/min26.13±5.9828.00±7.54cmax/mg.L-17.11±2.197.46±2.79AUC/mg.min.L-1693.87±192.15708