1、期過由，至大屋分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)題目：鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵學(xué)院：專業(yè)：食品科學(xué)與工程班級(jí)：姓名：學(xué)號(hào)：同組者：一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康? .了解分光光度法測(cè)定物質(zhì)含量的一般條件及其選定方法2 .掌握鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵的方法3 .了解722型分光光度計(jì)的構(gòu)造和使用方法二.實(shí)驗(yàn)原理1 .光度法測(cè)定的條件：分光光度法測(cè)定物質(zhì)含量時(shí)應(yīng)注意的條件主要是顯色反應(yīng)的條件和測(cè)量吸光度的條件。顯色反應(yīng)的條件有顯色劑用量、介質(zhì)的酸度、顯色時(shí)溶液溫度、顯色時(shí)間及干擾物質(zhì)的消除方法等；測(cè)量吸光度的條件包括應(yīng)選擇的入射光波長(zhǎng)，吸光度范圍和參比溶液等。2 .在PH=2-9l勺條件下，F(xiàn)e2+與鄰二氮雜菲o-ph生成極

2、穩(wěn)定的橘紅色配合物，反應(yīng)式如下：此配合物的lgK穩(wěn)=21.3摩爾吸收系數(shù)e510X104在顯色前，首先用鹽酸羥胺把Fe2+復(fù)原成Fe3+.其反應(yīng)式如下：2Fe3+2NH2OH-HC1=2Fe2+N2T+2H2O+4H+2C1-測(cè)定時(shí)，控制溶液酸度在PH=5E右較為適宜。酸度過高時(shí)，反應(yīng)進(jìn)行較慢；酸度太低，則Fe2+水解,影響顯色。三、實(shí)驗(yàn)儀器分光光度計(jì)、容量瓶、移液管、洗瓶四、實(shí)驗(yàn)步驟1. 條件實(shí)驗(yàn)（1）吸收曲線的測(cè)繪準(zhǔn)確吸取20ngmL1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL于50mL容量瓶中，加入5%fc酸羥胺溶液1mL,搖勻，加入1molL-1NaOAC§755mL和0.1%鄰二氮雜菲溶液3mL。以

3、水稀釋至刻度，搖勻。放置10min,在722型分光光度計(jì)上，用1cm比色皿，以水為參比溶液，波長(zhǎng)從570nm到430nm為止，每隔10nm測(cè)定一次吸光度。如圖1所示，其最大吸收波長(zhǎng)為510nm,故該實(shí)驗(yàn)選擇測(cè)定波長(zhǎng)為510nm。（2）鄰二氮雜菲-亞鐵配合物的穩(wěn)定性用上面溶液繼續(xù)進(jìn)行測(cè)定，具方法是在最大吸收波長(zhǎng)510nm處，每隔一定時(shí)間測(cè)定其吸光度，及再加入顯色劑后立即測(cè)定一次吸光度，經(jīng)10、20、30、120min后，再各測(cè)一次吸光度。3顯色劑濃度實(shí)驗(yàn)取50mL容量瓶7只，編號(hào)。每只容量瓶中準(zhǔn)確加入20ugmL1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL以及1mL5%k酸羥胺溶液，經(jīng)2min后。再加入5mL1molL-

4、1NaOAC§液，然后分別加入0.1%鄰二氮雜菲溶液0.3mL、0.6mL、1.0mL1.5mL2.00mL3.0mL和4.0mL用水稀釋至刻度，搖勻，在分光光度計(jì)上，用最大吸收波長(zhǎng)510nm、1cm比色皿，以水為參比，測(cè)定上述溶液的吸光度。1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取50mL容量瓶6只，編號(hào)。分別吸取20仙gmL1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mL、4.0mL、6.0mL、8.0mL和10.0mL于5只容量瓶中，另一只容量瓶中不加標(biāo)準(zhǔn)溶液配制空白溶液，作參比。然后各加5%鹽酸羥胺溶液，搖勻，經(jīng)2min后，再各加5mL1molL-1NaAc溶液及3mL1gL-1鄰二氮雜菲溶液，以水稀釋至刻度線，搖勻。放置1

5、0min,在分光光度計(jì)上，用1cm比色皿，在510nm處，測(cè)定各溶液的吸光度。以鐵含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。（2）未知液中鐵含量的測(cè)定吸取5ml未知液代替標(biāo)準(zhǔn)溶液，其他步驟均同上測(cè)定吸光度。由未知液的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出5ml未知液中的鐵含量，然后以每毫升未知液中含鐵多少微克表示結(jié)果。五、記錄與計(jì)算(1)吸收曲線的測(cè)繪波長(zhǎng)/nm吸光度A570550530520510500490470450430討論：從曲線可以看出，在一定范圍內(nèi)，當(dāng)波長(zhǎng)較小時(shí)，隨波長(zhǎng)增加吸光度增加測(cè)定的適宜波長(zhǎng)是510nm2鄰二氮雜菲亞鐵配合物的穩(wěn)定性放置時(shí)間t/min05101520穩(wěn)定性檢定性曲戰(zhàn)必3加

6、50.39D. 33S5H. 389L 33855IQ1520檢定性討論：從曲線可以看出，配合物穩(wěn)定性較好。(3)顯色劑用量的測(cè)定容量瓶號(hào)顯色劑量/mL吸光度A10.12523530.38640.41850.42860.41570.424(4)標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)繪與鐵含量的測(cè)定試液編會(huì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的量V/mL總含鐵量m/ug吸光度A1000.0002400.1953800.35741200.47951800.67862000.831未都夜si標(biāo)準(zhǔn)曲線鐵含量/ u-V = 0. Q039苫+0, 0212討論：1 .再用分光光度計(jì)測(cè)量顯色劑量不同時(shí)的吸光度時(shí)應(yīng)注意什么？答:再用分光光度計(jì)測(cè)量顯色劑量不同時(shí)的吸光度時(shí)，應(yīng)保持用一個(gè)比色皿測(cè)量,這樣可以減小比色皿自身對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的影響。2 .如用配置已久的鹽酸羥胺溶液，對(duì)分析結(jié)果將帶來什么影響？答：鹽酸羥胺是用來將Fe3復(fù)原成Fe2的，如果配制已久，復(fù)原能力減弱，就會(huì)使部分鐵離子得不到復(fù)原，造成分析結(jié)果偏小3 .鄰二氮雜菲分光光度法測(cè)定鐵的適宜條件是什么？答：測(cè)定時(shí)，要控制PH=曲右較好，弱酸度較高，反應(yīng)速度較慢，酸度