1、間質(zhì)干細(xì)胞在移植排斥中的應(yīng)用間質(zhì)干細(xì)胞在移植排斥中的應(yīng)用及其相關(guān)機制的初步探討及其相關(guān)機制的初步探討研究研究背景背景移植移植目前治療終末期疾病的有效手段研究研究背景背景尿毒癥尿毒癥120,000例例腎移植腎移植6000 例例急性排斥急性排斥20%50%研究研究背景背景腎移植后腎移植后急性排斥急性排斥：他克莫司：他克莫司研究研究背景背景5年存活率年存活率51%74%神經(jīng)毒性神經(jīng)毒性腎毒性腎毒性研究研究背景背景白血病白血病40,000例例造血干細(xì)胞移植GVHDGVHD30%65%GVHD（graft-versus-host disease）：）：移植物抗宿主病移植物抗宿主病研究研究背景背景15%研

2、究研究背景背景 激素激素 免疫免疫抑制劑抑制劑aGVHDaGVHDcGVHDcGVHD 激素激素 抵抗性？抵抗性？GVHDGVHD研究研究背景背景MSC（mesenchymal stem cell）：間質(zhì)干細(xì)胞低免疫原性低免疫原性 自我更新自我更新容易獲取容易獲取免疫調(diào)節(jié)功能免疫調(diào)節(jié)功能快速體外擴增快速體外擴增 多向分化潛能多向分化潛能MSC研究研究背景背景Clinical TrailClinical Trail238238項項前期研究前期研究 研究研究目的目的探討MSCs治療的安全性 有效性MSCsMSCs聯(lián)合低劑量他克莫司對聯(lián)合低劑量他克莫司對腎移植后患者的影響腎移植后患者的影響第第一一部

3、分部分患者入選標(biāo)準(zhǔn) 性別性別年齡年齡診斷診斷供者供者組織匹配組織匹配實驗組實驗組1男35CG女4/62男39CG男4/63男51CG男4/64男26CG女4/65男24CG男4/66男27CG男4/6對照組對照組1女47CG男4/62男31CG男4/63男30CG男4/64男24CG女4/65女34CG女4/66男23CG男4/6CG: 慢性腎小球腎炎chronic glomerulonephritis實驗組對照組他克莫司0.04-0.05mg/kgMSCs 5106移植腎動脈MMF 17-20mg/kg強的松0.26-0.3mg/kg他克莫司0.07-0.08mg/kg1月后外周靜脈MSCs

4、 2106/kg移植時移植后方法方法 傳染病的檢測傳染病的檢測 培養(yǎng)過程中細(xì)菌、真菌的檢測培養(yǎng)過程中細(xì)菌、真菌的檢測 支原體污染的檢測支原體污染的檢測 內(nèi)毒素的檢測內(nèi)毒素的檢測MSCs制備 MSCs質(zhì)量控制 表面標(biāo)志細(xì)胞形態(tài)分化潛能 腎移植成功 對照組出現(xiàn)1例急性排斥 結(jié)果 結(jié)果 血清肌酐移植前、移植后外周血淋巴細(xì)胞T, B 和NK細(xì)胞比例 實驗組實驗組對照組對照組0 03M 3M 6M 6M 0 03M 3M 6M 6M T%T%76.9810.1372.0018.1967.5017.3381.425.4283.017.5666.9021.84CD4CD4+ +T%T%52.1616.684

5、7.4219.0560.3812.6747.9421.1742.7318.4263.2619.84CD8CD8+ +T%T%34.335.7636.987.8934.5316.3944.1016.8546.5615.4731.9723.12Treg%Treg%3.162.304.472.27*3.082.033.373.311.450.97*3.203.60B%B%9.525.0916.6513.06*8.538.497.894.884.803.21*3.831.28CD27CD27+ +B%B%25.698.5432.8511.4723.395.4949.5821.9638.1917.652

6、6.968.94NK%NK%7.246.245.835.337.304.793.572.504.773.325.091.52 結(jié)果 * * p0.05 p0.05實驗組對照組移植前移植后3月移植后6月移植前移植后3月移植后6月IFN-IFN-13.225.6020.1512.978.142.6916.6310.6213.196.489.423.61TNF-TNF-2.981.795.532.174.311.952.271.212.421.923.382.34 結(jié)果 移植前后炎性因子的變化 結(jié)果 移植前后抑炎因子的變化移植前移植后3個月移植后6個月實驗組對照組移植前移植后3月移植后6月移植前移植

7、后3月移植后6月IL-4IL-41.401.232.031.712.321.121.261.221.361.283.171.27IL-10IL-103.041.374.302.075.201.173.332.832.921.464.311.88移植前移植后3月移植后6月實驗組17.5812.2530.0318.6137.9727.65對照組21.695.3127.4513.5817.351.47實驗組對照組實驗組實驗組對照組對照組0 03M 3M 6M 6M 0 03M 3M 6M 6M B%B%9.525.0916.6513.06*8.538.497.894.884.803.21*3.831

8、.28 結(jié)果 CD19CD19+ +B B細(xì)胞細(xì)胞CD19CD19+ +B B細(xì)胞細(xì)胞MSCsMSCs+CD19+CD19+ +B B 結(jié)果 MSCs對CD19+B細(xì)胞凋亡的影響 結(jié)果 MSCs對CD19+B細(xì)胞增殖的影響MSCsMSCs在慢性移植物抗宿主病中的應(yīng)用在慢性移植物抗宿主病中的應(yīng)用 第第二二部分部分前期研究前期研究患者入組患者入組 p 2009年6月至2011年9月在南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院及中山大 學(xué)附屬孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院p 異基因造血干細(xì)胞移植超過6個月p 國立衛(wèi)生研究院（NIH）的共識標(biāo)準(zhǔn)p -級的廣泛性cGVHDp 通過常規(guī)的二聯(lián)或三聯(lián)免疫抑制方案治療2個月后病情無好 轉(zhuǎn)或持續(xù)進展

9、MSCsMSCsMSCs免疫表型免疫表型免疫表型免疫表型臨床癥狀及實驗室檢查臨床癥狀及實驗室檢查 2323名激素抵抗性慢性名激素抵抗性慢性GVHDGVHD患者患者0 month2 month1 month3 month4 monthMSCs治療前器官評分及治療后反應(yīng)MSCsMSCs治療后器官反應(yīng)治療后器官反應(yīng)CR：完全緩解 PR：部分緩解 NR：無緩解結(jié)結(jié) 果果p 1名患者死于真菌性肺炎名患者死于真菌性肺炎p 4名患者在名患者在MSCs輸注輸注6個月內(nèi)復(fù)發(fā)個月內(nèi)復(fù)發(fā)p 19名患者表現(xiàn)出完全緩解（名患者表現(xiàn)出完全緩解（CR）或部分緩解（）或部分緩解（PR）MSCsMSCs治療前后治療前后cGVHDcGVHD患者外周血患者外周血T T淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞亞群的變化亞群的變化*P0.05 *P0.01MSCsMSCs治療前后治療前后cGVHDcGVHD患者外周血患者外周血B B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞亞群的變化亞群的變化*P0.05 *P0.01p 腎移植患者應(yīng)用MSCs聯(lián)合低劑量的免疫抑制劑是安全的，無 毒副作用，未增加急性排斥的風(fēng)險。p MSCs可能是通過抑制CD19+B細(xì)胞的凋亡和促進CD19+B細(xì)胞的增殖增