1、染發(fā)劑是一類(lèi)含有染料的化妝品。根據(jù)其染色后的牢固程度，染發(fā)劑可分為暫時(shí)性、半永久性和永久性三類(lèi)。其中永久性染發(fā)劑染發(fā)原料又可分為氧化染料、還原染料和仿天然黑素染料。氧化染料是合成染料中最早用于毛發(fā)染色的，也是目前應(yīng)用最廣泛的持久性染發(fā)劑原料。氧化型染發(fā)劑以其染色效果好、色調(diào)變化寬、維持時(shí)間長(zhǎng)等諸多優(yōu)點(diǎn)而成為最受歡迎的染發(fā)劑。但氧化型染發(fā)劑主要由氧化型染料和氧化劑組成。染發(fā)劑中的染料成分多屬于芳香胺類(lèi)化合物，芳香胺中有很多物質(zhì)具有致癌性，所以染發(fā)劑的安全性一直受到人們的極大關(guān)注。由染發(fā)劑引起的過(guò)敏反應(yīng)非常普遍，長(zhǎng)期使用還可能致畸、致突變、致癌及引起內(nèi)分泌效應(yīng)等。目前對(duì)染發(fā)劑中氧化型染料的檢測(cè)方法

2、主要包括氣相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法和液相色譜法。為了加強(qiáng)對(duì)該類(lèi)產(chǎn)品中氧化型染料的監(jiān)管，中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部頒布的化妝品衛(wèi)生規(guī)范（2007年版明確規(guī)定了93種暫時(shí)允許使用的染發(fā)劑，并規(guī)定了限量要求。文章在相關(guān)文獻(xiàn)及化妝品衛(wèi)生規(guī)范（2007年版方法的基礎(chǔ)上，建立了一種高效液相色譜同時(shí)檢測(cè)染發(fā)劑中9種氧化型染料的方法。該方法前處理簡(jiǎn)單、快捷，檢測(cè)靈敏,有效地提高了檢測(cè)效率。1.1.1 試劑對(duì)苯二胺、對(duì)氨基苯酚、間苯二胺、對(duì)苯二酚、甲苯-2,5二胺硫酸鹽、問(wèn)氨基苯酚、鄰苯二胺、間苯二酚、對(duì)甲氨基苯酚硫酸鹽均為分析純；乙月青（色譜純;超純水,甲醇（分析純，其他試劑除特別標(biāo)注外均為分析純。1.1.2 儀器Wa

3、tersAlliance2695HPLC高效液相色譜儀（配紫外檢測(cè)器，美國(guó)沃特世公司;AvantiJ-E冷凍高速離心機(jī)，美國(guó)貝克曼公司；Milli-Q超純水純化系統(tǒng)，美國(guó)Millipore公司;分析天平，德國(guó)賽多利斯公司；渦旋混合器；超聲波振蕩器。1.2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制準(zhǔn)確稱(chēng)取對(duì)苯二胺等9種氧化型染料樣品各0.25g各加入0.1g亞硫酸鈉（精確至0.01g,其中對(duì)苯二胺、對(duì)氨基苯酚、間苯二胺、對(duì)苯二酚、問(wèn)氨基苯酚、鄰苯二胺、間苯二酚等7種氧化型染料樣品加入甲醇使之溶解，并在100mL容量瓶中定容至刻度；甲苯-2,5-二胺硫酸鹽和對(duì)甲氨基苯酚123451實(shí)驗(yàn)部分1.1 試劑與儀器1.2 實(shí)驗(yàn)方

4、法摘要:關(guān)鍵詞：中圖分類(lèi)號(hào)：文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：文章編號(hào):文章建立了染發(fā)劑中9種氧化型染料的高效液相色譜檢測(cè)方法。樣品經(jīng)甲醇提取、離心和過(guò)濾后，經(jīng)高效液相色譜分離檢測(cè)。方法對(duì)不同氧化型染料的檢測(cè)限低于40ug/g;9種氧化型染料空白樣品加標(biāo)回收率為72.7%108.0%相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于3%,9種氧化型染料在0.050mg/mL2mg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，線(xiàn)性回歸系數(shù)r土勻大于0.99。高效液相色譜法；氧化型染料；染發(fā)劑doi:10.3696/j.issn.1007-550X.2010.04.001O657.72A1007-550X（201004-0032-03高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定染發(fā)劑

5、中9種氧化型染料黃紅霞（福建省中心檢驗(yàn)所，福建福州350002;國(guó)家加工食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，福建福州350002收稿日期：作者簡(jiǎn)介:2010-03-05黃紅霞（1965-,女，高級(jí)工程師，研究方向：食品安全分析。黃紅霞:高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定染發(fā)劑中9種氧化型染料福隹軒加領(lǐng)I煽加硫酸鹽用水溶解并定容至刻度。1.2.2 樣品提取稱(chēng)取樣品于50ml具塞閉塞管，加入1ml2%亞硫酸鈉、25ml甲醇，渦旋振蕩30s,再加入15ml甲醇，混勻，超聲提取15min,用甲醇定容至刻度，充分混勻后，靜置，上清液經(jīng)0.45仙mPTFEg膜后上機(jī)測(cè)試。1.2.3 液相色譜條件色譜柱為XBC18柱（5小小4.61

6、50柱溫：35C;流動(dòng)相:A為純乙月青,B為三乙醇胺磷酸緩沖溶液（準(zhǔn)確移取10.0mL三乙醇胺溶解于1L水中，用HPO調(diào)節(jié)pH值8.5，經(jīng)過(guò)0.45濾膜過(guò)濾。洗脫程序?yàn)樘荻认疵摚ㄒ?jiàn)表1。流速1mL/min;進(jìn)樣量5L參考相關(guān)文獻(xiàn)，同時(shí)通過(guò)紫外分光光度計(jì)掃描200600nm發(fā)現(xiàn)9種氧化型染料在280.0nm處均具有較大吸收，因此實(shí)驗(yàn)選擇280nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)對(duì)染發(fā)劑中9種氧化型染料進(jìn)行檢測(cè)。通過(guò)化學(xué)結(jié)構(gòu)的分析，9種氧化型染料可以采用C18色譜柱、C8柱或苯基柱分離。實(shí)驗(yàn)采用C18柱對(duì)9種染發(fā)劑標(biāo)準(zhǔn)品及其空白加標(biāo)樣品進(jìn)行分析，獲得良好的分離，具有較好的峰型。并且比較了不同流動(dòng)相組成、梯度洗脫條件及

7、不同進(jìn)樣體積對(duì)色譜峰分離及峰型的影響。實(shí)驗(yàn)采用乙月青-三乙醇胺磷酸緩沖溶液（pH8.5作為流動(dòng)相。并通過(guò)調(diào)節(jié)不同流動(dòng)相比例及洗脫程序（見(jiàn)表1,獲得較好的色譜分離。同時(shí)試驗(yàn)表明進(jìn)樣量5仙L可獲得較好的峰型和色譜峰分離效果，色譜峰達(dá)到基線(xiàn)分離。而隨著進(jìn)樣體積的增加色譜峰展寬加大，色譜峰分離度降低。（見(jiàn)圖1實(shí)驗(yàn)比較了不同極性提取溶劑（包括水、甲醇、乙醇和95%乙醇對(duì)染發(fā)劑中9種氧化型染料的提取效果。資料表明，對(duì)苯二胺、對(duì)氨基苯酚、間苯二胺、對(duì)苯二酚甲苯、間氨基苯酚、鄰苯二胺、間苯二酚在極性溶劑中有較大溶解性，而2,5二胺硫酸鹽、對(duì)甲氨基苯酚硫酸鹽易溶于水，同時(shí)甲醇對(duì)上述氧化型染料的溶解性明顯強(qiáng)于乙醇

8、，且色譜峰型較好，無(wú)明顯拖尾。因此在試驗(yàn)過(guò)程中我們通過(guò)甲醇溶解對(duì)苯二胺、對(duì)氨基苯酚、間苯二胺、對(duì)苯二酚甲苯、間氨基苯酚、鄰苯二胺、間苯二酚純水溶解2,5二胺硫酸鹽、對(duì)甲氨基苯酚硫酸鹽。并且鑒于氧化型染料易氧化，不穩(wěn)定等特點(diǎn)，在配置標(biāo)準(zhǔn)溶液和提取樣品時(shí)均加入一定量的亞硫酸鈉，減緩目標(biāo)組分的氧化。實(shí)驗(yàn)還比較了不同時(shí)間（5、10、15、30min對(duì)超聲提取效果的影響，實(shí)驗(yàn)表明超聲時(shí)間為15min時(shí)獲得滿(mǎn)意的提取效果。Xmm;pm342結(jié)果與討論2.1液相色譜條件的選擇2.2樣品的提取Time（min061720rate20.125Flow111111A%999990659999B%11103611表

9、1液相色譜測(cè)定染發(fā)劑中9種氧化型染料的梯度洗脫條件圖1空白樣品（A、標(biāo)準(zhǔn)品（B、空白加標(biāo)樣品（B中9種氧化型染料的液相色譜圖（1:對(duì)苯二胺2對(duì)氨基苯酚；3:間苯二胺;4:對(duì)苯二酚;5:甲苯-2,5-二胺硫酸鹽;6:問(wèn)氨基苯酚；7:鄰苯二胺;8:間苯二酚;9:對(duì)甲氨基苯酚丁|Papers福建輕紡費(fèi)|睇口購(gòu)2.3分析方法確證2.3.1 選擇性實(shí)驗(yàn)通過(guò)空白染發(fā)劑樣品及9種氧化型染料標(biāo)準(zhǔn)品及實(shí)際樣品加標(biāo)實(shí)驗(yàn)表明，在9種氧化型染料標(biāo)準(zhǔn)品色譜保留時(shí)間無(wú)明顯干擾峰存在，該分析檢測(cè)方法無(wú)明顯干擾。2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)與檢測(cè)限配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，作出9種氧化型染料的線(xiàn)性方程（見(jiàn)表2,其線(xiàn)性范圍為0.050m

10、g/mL至I2mg/mL。按信噪比S/N為3計(jì)，方法中目標(biāo)組分的檢測(cè)限不高于40ng/g。2.3.3 回收率取空白染發(fā)劑樣品進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)添加實(shí)驗(yàn)，每個(gè)添加樣做3個(gè)平行試驗(yàn)，樣品回收率為72.7%108.0%相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于3%。具體試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。文章建立了染發(fā)劑中9種氧化型染料含量的液相色譜同時(shí)檢測(cè)方法，可有效滿(mǎn)足檢驗(yàn)部門(mén)、衛(wèi)生質(zhì)量檢驗(yàn)部門(mén)對(duì)染發(fā)劑中氧化型染料的快速檢測(cè)的需要，同時(shí)可應(yīng)用于相關(guān)化妝產(chǎn)品的檢測(cè)。為嚴(yán)格質(zhì)量管理和監(jiān)控提供必要的技術(shù)支持，提高產(chǎn)品質(zhì)量水平，保障人民身體健康。1周樺,張國(guó)棋，高巖，劉洪英，龍峰.氣相色譜法測(cè)定氧化型染發(fā)劑中化學(xué)物質(zhì)J.中國(guó)公共衛(wèi)生，2003,19,996

11、.2李海濤，吳平谷.氣相色譜法測(cè)定氧化型染發(fā)劑中染料J.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2002,12:435.3朱英,楊艷偉，李靜.氣相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定氧化型染發(fā)劑中的多種染料中間體J.色譜,2005,23:566.4王駿,胡俊明.高效液相色譜法測(cè)定化妝品中的染料J.色譜,1999,17:486.5化妝品衛(wèi)生規(guī)范S.北京:中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部,2007.3結(jié)論參考文獻(xiàn)：序號(hào)123466789目標(biāo)組份對(duì)苯二胺對(duì)氨基苯酚間苯二胺對(duì)苯二酚甲苯2,5二胺硫酸鹽間氨基苯酚鄰苯二胺間苯二酚對(duì)甲氨基苯酚硫酸鹽線(xiàn)性方程Y=1.73e+003X+2.12e+003Y=2.71e+003X-1.23e+003Y=3.25e

12、+003X+2.03e+004Y=4.63e+003X+2.90e+004Y=9.35e+002X+4.55e+003Y=4.65e+003X+2.90e+004Y=5.42e+003X+1.47e+004Y=4.49e+003X+1.82e+004Y=1.42e+003X+1.13e+004r0.9980.9970.9980.9980.9980.9990.9990.9970.9982表29種氧化型染料的檢測(cè)線(xiàn)性方程及線(xiàn)性回歸系數(shù)表3染發(fā)劑中9種氧化型染料的加標(biāo)回收率和精密度在舁廳廳(n=31 2 3 4 5 6 7 8 9目標(biāo)組份對(duì)苯二胺對(duì)氨基苯酚間苯二胺對(duì)苯二酚甲苯2,5二胺硫酸鹽間氨基苯酚鄰苯二胺間苯二酚對(duì)甲氨基苯酚硫酸鹽回收率86.287.684.690.284.289.5108.098.684.4精密度3.01