1、黑 龍 江 中 醫(yī) 藥 大 學教 案課程名稱 中藥化學使用教材 中藥化學主講教師 匡海學職務職稱 教授實驗名稱 實驗一 苦參中氧化苦參堿和苦參堿的提取、分離、鑒定實驗目的：1掌握用離子交換法提取生物堿的原理和方法。2掌握利用苦參總堿中各生物堿溶解性差異分離氧化苦參堿方法。 3了解和熟練應用滲漉提取法及索式提取器連續(xù)回流提取。 4掌握生物堿的常規(guī)定性檢識方法。實驗原理：苦參生物堿有一定堿性，可與酸結合成鹽，因此采用酸水提取法?？偵飰A呈陽離子狀態(tài)而被陽離子交換樹脂所交換，再用氨水堿化后生物堿游離以有機溶劑回流提取。利用總生物堿中氧化苦參堿在乙醚中難溶而與其它生物堿分離。實驗難點 離子交換樹脂法和

2、生物堿的定性檢識方法教學方法 少量課堂講授和實驗指導教 具 滲漉、回流提取裝置、薄層色譜裝置實 驗 進 程1.導 言（時 間）58min（1）中藥化學實驗課具體要求。（2）中藥化學實驗的成績評定規(guī)定。（3）試驗報告書寫要求。板 書 設 計【實驗目的】 1掌握用離子交換法提取生物堿的原理和方法。2掌握利用苦參總堿中各生物堿溶解性差異分離氧化苦參堿的方法。3了解和熟練應用滲漉提取法及索式提取器連續(xù)回流提取。4掌握生物堿的常規(guī)定性檢識方法?！緦嶒炘怼?苦參生物堿有一定堿性，可與酸結合成鹽，因此用酸水提取后，總生物堿呈陽離子狀態(tài)而被陽離子交換樹脂所交換，再用氨水堿化后生物堿游離，以有機溶劑回流提取。

3、【提取工藝】苦參粗粉100g 以0.1%鹽酸100ml濕潤半小時裝入滲漉中， 以0.1%鹽酸1100ml滲漉，速度12d/s。滲漉液2.講授（時間）（2030min） 講課內容（1）離子交換樹脂型號、適應類型及應用（2）離子交換樹脂法提取苦參總堿的原理（3）苦參總堿的溶解性（4）生物堿的定性檢識方法（5）索式提取器的使用掌握要點 （1）生物堿的定性檢識方法（2）離子交換樹脂法的應用 舉 例 離子交換樹脂法的應用提 問 苦參堿與氧化苦參堿的堿性和溶解性生物堿的定性檢識方法3.小結（時間）58min總結本實驗的基本情況，提出注意事項和新的要求。4.布置作業(yè)（1）試驗報告一周內交齊（2）預習第二個試

4、驗 通過裝濕重60g（60ml）樹脂的陽離子交換樹脂柱交換，交換速度12d/s。注意測定不同交換時間PH值的變化。（每隔15分鐘）吸堿樹脂將樹脂倒入燒杯中，以蒸餾水洗至洗液無色抽濾后室溫晾干。將樹脂置燒杯中，加入濃氨水，拌勻（加氨水量以手握成團但不粘手為度），密閉放置。 堿化樹脂放置20分鐘，裝入濾紙袋置索氏提取器中以氯仿連續(xù)回流提取610小時，回收氯仿至盡，蒸去水分。殘留物以丙酮回流殘留物，抽濾，溶液回收部分丙酮，加蓋放置，結晶，抽濾，干燥。粗品總堿結晶【精制工藝】粗品總堿以少量丙酮（粗品量的3040倍）回流溶解，白色總堿全部溶解后過濾。濾液 回收少量丙酮后加蓋放置，結晶后抽濾，干燥。精品總

5、堿（以氧化苦參堿為主）【色譜鑒定】色譜板：自制硅膠-CMC硬板 樣 品：精品總堿氯仿液對照品；氧化苦參堿的氯仿溶液 顯色劑：改良碘化鉍鉀試劑展開劑：氯仿：甲醇：氨水（15：4：0.5）結 果：樣品斑點與對照品斑點比較位置并計算Rf值【思考題】（1）以反應式表示出離子交換樹脂提取生物堿的原理。（2）苦參堿滲漉中若氫離子濃度過高，通過樹脂時對交換有何影響？課題名稱 實驗二 槐米中蘆丁的提取、分離、鑒定及槲皮素的制備實驗目的：掌握黃酮成分的主要性質、黃酮苷及苷元結構研究的一般程序和方法。通過蘆丁的結構檢識，了解苷類化合物結構研究的一般程序和方法。根據(jù)溶解性掌握提取、分離蘆丁的方法。實驗原理：蘆丁為黃

6、酮苷，利用其可溶于熱水、難溶于冷水的性質進行提取。又利用其在冷、熱醇中的溶解度差進行重結晶法分離精制。蘆丁可被稀酸水解，生成的苷元及糖可通過定性反應及色譜進行鑒別。實驗重點 蘆丁的結構檢識和提取分離方法教學方法 少量課堂講授和實驗指導教 具 薄層色譜裝置試 驗 進 程1.導言（時間）35min（1）復習蘆丁和槲皮素的結構和性質（2）復習蘆丁的2種主要提取分離方法板 書 設 計【實驗目的】 掌握黃酮成分的主要性質、黃酮苷及苷元結構研究的一般程序和方法。通過蘆丁的結構檢識，了解苷類化合物結構研究的一般程序和方法。根據(jù)溶解性掌握提取、分離蘆丁的方法?！緦嶒炘怼?蘆丁為黃酮苷，利用其可溶于熱水、難溶

7、于冷水的性質進行提取。又利用其在冷、熱醇中的溶解度差進行重結晶法分離精制。蘆丁可被稀酸水解，生成的苷元及糖可通過定性反應及色譜進行鑒別?！緦嶒瀮热荨?、提?。夯被?0g（稍研磨）以500ml的燒杯直火燒400ml蒸餾水，沸后將槐花米投入，繼續(xù)加熱保持微沸30分鐘，四層紗布過濾。藥渣再加水250ml，煮沸20分鐘，同上過濾，合并兩次濾液。 藥 渣 濾 液放置45小時，抽濾至干 濾 液 沉 淀 2.講授（時間）2025min 講課內容（1）蘆丁的提取方法（2）蘆丁的精制方法（3）蘆丁的水解方法（4）蘆丁、槲皮素的鑒定 掌握要點 （1）蘆丁的提取、精制方法（2）蘆丁的檢識方法 舉 例 提 問 黃酮

8、類化合物的主要性質 100以下干燥 粗品蘆丁2、精制：粗品蘆丁 加甲醇1520ml，水浴加熱（空氣冷凝）溶解， 至無黃色物，趁熱過濾。 沉 淀 濾 液放置，待結晶析出，抽濾至干 沉 淀干燥精品蘆丁3、水解：精品蘆丁0.5g放入150ml圓底燒瓶中，加入2%稀硫酸50ml, 空氣冷凝直火加熱（電爐上放石棉網(wǎng)）40分鐘，趁熱過濾。 沉 淀 濾 液 水洗至中性 取10ml，加氫氧化鋇約 抽濾、干燥。 1g調PH7.5，過濾。 槲皮素 沉淀 濾液水浴濃縮至12ml濃縮液（備檢查糖用）4、蘆丁、槲皮素的鑒定（1）試管定性反應：HCI-Mg粉反應：取樣品的乙醇溶液1ml加少許鎂粉，再加濃HCI 12滴，觀

9、察顏色。FeCl3反應：取樣品的乙醇溶液1ml加1%的FeCl3乙醇溶液23滴，觀察顏色。中性醋酸鉛反應：取樣品的乙醇溶液1ml加5%的中性醋酸鉛溶液12滴，觀察現(xiàn)象。-萘酚、濃H2SO4反應：取樣品的乙醇溶液1ml加-萘酚試液1 2滴后振搖，然后沿管壁加適量濃H2SO4，觀察兩界面處的顏色。（2）AlCl3紙斑反應 ;取樣品的乙醇溶液，在濾紙上各滴一個點，干燥后置紫外燈下觀察熒光。然后在原斑點上噴AlCl3，干燥后重新置紫外光燈下觀察熒光。3.小結（時間）58min總結本實驗的基本情況，提出注意事項和新的要求。4.布置作業(yè)（1）試驗報告一周內交齊。（2）思考題 據(jù)黃酮類化合物的性質，再設計一

10、種提取蘆丁的方法。 苷類水解有幾種方法？ 怎樣證明蘆丁分子中只含有一分子葡萄糖和一分子鼠李糖？ 如何確定蘆丁結構中的糖連在槲皮素的3-OH上？5、糖的檢識（徑向紙色譜）展開劑：正丁醇：冰醋酸：水（4：1：5）上層顯色劑：鄰苯二甲酸-苯胺試劑（95烘干）樣 品：水解濃縮液 對照品：葡萄糖、鼠李糖的水溶液展開方式：徑向結 果：對照樣品斑點及對照品斑點位置并計算Rf值。6、蘆丁及槲皮素紫外光譜測定（1）蘆丁溶液的配制精密稱取蘆丁純品1g，用無水甲醇溶解，并稀釋至10ml，從中吸取5ml，置50ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度。（2）槲皮素溶液的配制精密稱取槲皮素純品1g，用無水甲醇溶解，并稀釋至10m

11、l，從中吸取5ml，置50ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度。（3）蘆丁及槲皮素紫外光譜測定 甲醇光譜：取樣品置石英杯中，加入甲醇鈉溶液3滴后，立即測定，放置5分鐘后再測定一次。 甲醇鈉光譜：取樣品置石英杯中，200500nm進行掃描，重復一次，觀察紫外光譜。 三氯化鋁光譜：在盛有樣品液的石英杯中，加入三氯化鋁6滴，放置1分鐘后進行測定。測定后加入3滴鹽酸溶液（鹽酸：水1：1）再進行測定。 乙酸鈉光譜：取樣品液約3ml，加入過量的無水乙酸鈉固體，搖勻（杯底剩約2ml的乙酸鈉），加入乙酸鈉后2分鐘內進行測定，5分鐘到10分鐘再測定一次。 乙酸鈉硼酸光譜：在測定用的盛有樣品液和乙酸鈉00溶液的石英杯中

12、加入足夠量的硼酸使成飽和溶液進行測定。課 題 第六章 黃酮類化合物第六節(jié) 結構研究教學目的 1、掌握1H-NMR在黃酮類化合物結構研究中的應用2、掌握13C-NMR在黃酮類化合物結構研究中的應用教學重點 1、1H-NMR光譜特征2、13C-NMR光譜特征教學難點 1、1H-NMR光譜特征2、13C-NMR光譜特征教學方法 講授教 具多媒體幻燈片教學進程1.導言（時間）：35分鐘1H-NMR譜是黃酮類化合物結構研究的一種重要方法，具有簡便、快速而且可獲得大量信息等優(yōu)點。13C-NMR也以廣泛應用于黃酮類化合物結構研究，下面我們就這兩種方法逐一進行。復習提問 1、何謂診斷試劑？常用黃酮類化合物的診

13、斷試劑有哪幾種？2、如何利用UV光譜區(qū)別黃酮和黃酮醇類化合物？板書設計第六節(jié) 結構研究二、1H-NMR的應用（一）C環(huán)質子（二）A環(huán)質子1、5、7二OH黃酮類化合物2、7OH黃酮類化合物（三）B環(huán)質子1、4含氧取代2、3、4二氧取代2.講授（時間）：8085分鐘 課題內容 第六章 黃酮類化合物第六節(jié) 結構研究 掌握要點 1、1H-NMR在黃酮類化合物結構研究中的應用2、13C-NMR在黃酮類化合物結構研究中的應用 舉 例 各光譜數(shù)據(jù)。提 問綜合解析課堂練習3.小結（時間）：35分鐘 今天的內容是重點，又是難點，大家可能覺得有些吃力，不過沒關系，多做一些練習題效果就會好多了。老師也盡量慢點講，讓

14、大家慢慢理解、吸收。4.布置作業(yè) 1、習題集本章相應練習題。33、4、5三氧取代（四）糖基上質子1、單糖苷類2、雙糖苷類三、13C-NMR的應用1、基本母核的碳信號2、取代后的模式*課堂練習課 題 第六章 黃酮類化合物第六節(jié) 結構研究第七節(jié) 天然藥物實例教學目的 1、掌握黃酮類化合物MS的一般裂解規(guī)律2、掌握含黃酮類化合物的天然藥物實例（化學成分、性質及提取分離）教學重點 1、黃酮類化合物MS的裂解規(guī)律2、天然藥物實例（槐米、黃芩）教學難點 MS裂解規(guī)律。教學方法 講授（討論）教 具多媒體幻燈片 教學進程1.導言（時間）：35分鐘MS在黃酮類化合物的結構研究中作用很大，近來隨著FD-MS和FAB-MS及ESI-MS等軟電離質譜技術的應用，使得質譜在黃酮類化合物的結構研究中的應用更加廣泛。復習提問 1、黃酮、黃酮醇類的C環(huán)質子有何區(qū)別（1H-NMR）2、黃酮、黃酮醇類的C環(huán)碳原子個有何特征？（13C-NMR ）板書設計第六節(jié) 結構研究四、MS在黃酮類化合物中的應用（一）游離黃酮（二）黃酮苷類五、黃酮類化合物綜合光譜解析練習 第七節(jié) 天然藥物實例 2.講授（時間）：8085分鐘 課題內容 第六章 黃酮類化合物第六節(jié) 結構研究第七節(jié) 天然藥物實例 掌握要點 1、黃酮類化合物MS的裂解規(guī)律2、天然藥物實例的化學成分，性質及提取分離 舉 例 1、提取分離工