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1、什么是固定化酶?什么是固定化酶?水溶性酶水溶性酶水不溶性載體水不溶性載體固定化技術(shù)固定化技術(shù)水不溶性酶水不溶性酶固定化酶固定化酶l優(yōu)點(diǎn):優(yōu)點(diǎn):l不溶于水,易于與產(chǎn)物分別;不溶于水,易于與產(chǎn)物分別;l可反復(fù)運(yùn)用;可反復(fù)運(yùn)用;l可延續(xù)化消費(fèi);可延續(xù)化消費(fèi);l穩(wěn)定性好。穩(wěn)定性好。l缺陷:缺陷:l固定化過(guò)程中往往會(huì)引起酶的失活。固定化過(guò)程中往往會(huì)引起酶的失活。l制備固定化酶的根據(jù)制備固定化酶的根據(jù)l1.固定化酶必需能堅(jiān)持酶原有的專注性、固定化酶必需能堅(jiān)持酶原有的專注性、高效催化才干和常溫、常壓下能起催化高效催化才干和常溫、常壓下能起催化反響等特點(diǎn)。反響等特點(diǎn)。l2.固定化酶應(yīng)能回收、貯藏,利于反復(fù)固定
2、化酶應(yīng)能回收、貯藏,利于反復(fù)運(yùn)用。運(yùn)用。l3.固定化酶運(yùn)用于機(jī)械化和自動(dòng)化操作,固定化酶運(yùn)用于機(jī)械化和自動(dòng)化操作,所用載體常有一定的機(jī)械強(qiáng)度。所用載體常有一定的機(jī)械強(qiáng)度。l4.固定化酶應(yīng)能堅(jiān)持甚至超越原有酶液固定化酶應(yīng)能堅(jiān)持甚至超越原有酶液的活性。即要維護(hù)活性中心基團(tuán)。的活性。即要維護(hù)活性中心基團(tuán)。l5.固定化酶應(yīng)能最大程度與底物接近,固定化酶應(yīng)能最大程度與底物接近,從而提高產(chǎn)量。具有最小的空間位阻。從而提高產(chǎn)量。具有最小的空間位阻。l6.固定化酶應(yīng)有最大的穩(wěn)定性。固定化酶應(yīng)有最大的穩(wěn)定性。l7.固定化酶應(yīng)易與產(chǎn)物分別。固定化酶應(yīng)易與產(chǎn)物分別。1.吸附法吸附法物理吸附離子吸附物理吸附離子吸附2
3、.包埋法包埋法格子型包埋微膠囊型包埋格子型包埋微膠囊型包埋3.經(jīng)過(guò)雙功能試劑進(jìn)展共價(jià)交聯(lián)經(jīng)過(guò)雙功能試劑進(jìn)展共價(jià)交聯(lián)4.和水不溶性載體共價(jià)結(jié)合和水不溶性載體共價(jià)結(jié)合 吸附法吸附法酶被吸附于惰性的固相載體或離酶被吸附于惰性的固相載體或離子交換劑。根據(jù)子交換劑。根據(jù)酶分子與載體吸附的性質(zhì)有離子酶分子與載體吸附的性質(zhì)有離子吸附和物理吸附吸附和物理吸附之別。之別。物理吸附法運(yùn)用對(duì)酶蛋白有高度吸附才干的硅膠、活性炭,氧化鋁、高嶺土、石英沙、火棉膠、多孔玻璃等在一定條件下與水溶酶作用制得。優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)單,反響條件溫暖,優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)單,反響條件溫暖,酶活力損失少,載體可反復(fù)運(yùn)酶活力損失少,載體可反復(fù)運(yùn)用。用。
4、缺陷:易引起蛋白質(zhì)外表變性,缺陷:易引起蛋白質(zhì)外表變性,且由于結(jié)合力弱,當(dāng)反響液的且由于結(jié)合力弱,當(dāng)反響液的pH值、離子強(qiáng)度、溫度、底物值、離子強(qiáng)度、溫度、底物濃度等發(fā)生變化時(shí),會(huì)導(dǎo)致酶濃度等發(fā)生變化時(shí),會(huì)導(dǎo)致酶易從載體上部分或全部零落。易從載體上部分或全部零落。載體:纖維素、瓊脂糖、活性炭、載體:纖維素、瓊脂糖、活性炭、沸石及硅膠等。沸石及硅膠等。 離子結(jié)合法離子結(jié)合法利用含有離子交換基團(tuán)的固相載體利用含有離子交換基團(tuán)的固相載體如具有交換基團(tuán)的葡聚糖凝膠或纖維素如具有交換基團(tuán)的葡聚糖凝膠或纖維素與酶蛋白分子的帶電基團(tuán)相互吸引靠離子與酶蛋白分子的帶電基團(tuán)相互吸引靠離子鏈而構(gòu)成絡(luò)合物。鏈而構(gòu)成絡(luò)合物。 優(yōu)點(diǎn):制造簡(jiǎn)單,處置條件緩和,酶蛋白的優(yōu)點(diǎn):制造簡(jiǎn)單,處置條件緩和,酶蛋白的活性中心活性中心 和高級(jí)構(gòu)造破壞較少,可以制得活力較高的和高級(jí)構(gòu)造破壞較少,可以制得活力較高的固定化酶。固定化酶。 缺陷:離子鍵結(jié)合較松散,如在高離子強(qiáng)度缺陷:離子鍵結(jié)合較松散,如在高離子強(qiáng)度下進(jìn)展反下進(jìn)展反 應(yīng)時(shí),酶與載體易分開(kāi)。應(yīng)時(shí),酶與載體易分開(kāi)。第
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