1、藥物制劑微生物檢驗藥物制劑微生物檢驗?zāi)夸浤夸沴1、微生物檢驗分類l2、藥品微生物限度檢測的基本條件l3、非滅菌制劑的微生物限度檢查l4、滅菌制劑的無菌檢查法一、微生物檢驗分類一、微生物檢驗分類內(nèi)容內(nèi)容無菌檢查無菌檢查微生物限度檢查微生物限度檢查微生物總數(shù)檢查微生物總數(shù)檢查控制菌檢查控制菌檢查細(xì)菌數(shù)檢查細(xì)菌數(shù)檢查霉菌和酵母菌檢查霉菌和酵母菌檢查大腸埃希菌大腸埃希菌大腸菌群大腸菌群沙門菌沙門菌銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌梭菌梭菌白色念珠菌白色念珠菌非全檢，檢查種類與非全檢，檢查種類與劑型、給藥途徑、原劑型、給藥途徑、原料來源等有關(guān)。料來源等有關(guān)。 無菌檢查無菌檢查l凡直接進(jìn)

2、入人體血液循環(huán)系統(tǒng)、肌肉、皮下組織或接觸創(chuàng)傷、潰瘍部位而發(fā)生作用的制品或要求無菌的材料、滅菌器具都要進(jìn)行無菌檢查。注射用制劑：注射劑、輸液、注射粉針等；眼用制劑：滴眼劑、眼用膜劑、凝膠劑、軟膏劑等；植入型制劑：植入片等；創(chuàng)面用制劑：潰瘍、燒傷及外傷用溶劑、軟膏劑及氣霧劑等手術(shù)用制劑、止血海綿、骨蠟等二、藥品微生物限度檢測的基本條件二、藥品微生物限度檢測的基本條件二、藥品微生物限度檢測的基本條件二、藥品微生物限度檢測的基本條件檢查環(huán)境和人員要求環(huán)境要求:無菌室內(nèi)進(jìn)行。背景潔凈度C級下的局部A級(潔凈操作臺），單向流空氣。 操作人員：衛(wèi)生、著裝符合要求。 操作要求：嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，嚴(yán)防污染。 二

3、、藥品微生物限度檢測的基本條件二、藥品微生物限度檢測的基本條件方方法法 由于某些供試品具有抗菌活性，在建由于某些供試品具有抗菌活性，在建立測定方法或原測定法的檢驗條件發(fā)生改立測定方法或原測定法的檢驗條件發(fā)生改變時，可能影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，必須變時，可能影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，必須對供試品的抑菌活性及測定方法的可靠性對供試品的抑菌活性及測定方法的可靠性進(jìn)行驗證。進(jìn)行驗證。二、藥品微生物限度檢測的基本條件二、藥品微生物限度檢測的基本條件取取樣樣量量1 1. .檢測用量檢測用量所有劑型所有劑型2 2個個最小包裝最小包裝大蜜丸大蜜丸4 4丸丸膜劑膜劑4 4片片2 2. .檢測量檢測量半半/ /固體制劑

4、：固體制劑：10g10g液體制劑：液體制劑：10ml10ml膜劑：膜劑：100cm100cm二、藥品微生物限度檢測的基本條件二、藥品微生物限度檢測的基本條件培培養(yǎng)養(yǎng)條條件件二、藥品微生物限度檢測的基本條件二、藥品微生物限度檢測的基本條件供試品供試品檢出控制菌或其它致病菌時檢出控制菌或其它致病菌時，按一次檢，按一次檢出結(jié)果為準(zhǔn)，出結(jié)果為準(zhǔn)，不再復(fù)試。不再復(fù)試。 供試品的細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)其中任何一供試品的細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)其中任何一項不符合該品種項下的規(guī)定，應(yīng)從同一批樣品項不符合該品種項下的規(guī)定，應(yīng)從同一批樣品中隨機(jī)抽樣，獨立復(fù)試兩次，以中隨機(jī)抽樣，獨立復(fù)試兩次，以3 3次結(jié)果的平均次結(jié)

5、果的平均值報告菌數(shù)。值報告菌數(shù)。 供試品的細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母數(shù)及控制菌三項供試品的細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母數(shù)及控制菌三項檢驗結(jié)果均符合該品種項下的規(guī)定，判供試品檢驗結(jié)果均符合該品種項下的規(guī)定，判供試品符合規(guī)定；若其中任何一項不符合該品種項下符合規(guī)定；若其中任何一項不符合該品種項下的規(guī)定，判供試品不符合規(guī)定。的規(guī)定，判供試品不符合規(guī)定。 結(jié)結(jié)果果判判斷斷第三節(jié)第三節(jié) 藥品微生物限度檢測方法藥品微生物限度檢測方法微生物檢驗基本流程微生物檢驗基本流程l1、領(lǐng)取并配制培養(yǎng)基l2、擦拭工作臺及墻壁l3、開啟紫外燈滅菌1hl4、進(jìn)行微生物實驗l5、實驗完成后再次擦拭工作臺二二、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查、細(xì)菌數(shù)

6、、霉菌和酵母菌數(shù)檢查l1、平皿法數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)處理處理混合平板混合平板的制備的制備細(xì) 菌 、 真細(xì) 菌 、 真菌的培養(yǎng)菌的培養(yǎng)檢查結(jié)果、檢查結(jié)果、觀察與計數(shù)觀察與計數(shù)供試液供試液的制備的制備書寫檢驗書寫檢驗記錄單記錄單二二、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查1.1.平皿法平皿法1010-2-21010-2-21010-2-21010-2-21010-3-31010-3-31010-3-31010-3-3倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)3d3d營養(yǎng)瓊脂營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)基30353035玫 瑰 紅 鈉玫 瑰 紅 鈉瓊 脂 培 養(yǎng)瓊 脂 培 養(yǎng)基基倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)5d5d23282328 對照對照對

7、照對照對照對照對照對照1.0ml1.0ml9.0ml9.0ml 稀釋液稀釋液10g/10g/ml ml 供試品供試品 9.0ml9.0ml1010-2-21010-1-11.0ml1.0ml 9.0ml9.0ml1010-3-31.0ml1.0ml1010-1-11010-1-11010-1-11010-1-11010倍遞增稀釋法倍遞增稀釋法二二、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查10g10g或或10ml10ml 供試品供試品 10101 1供試液供試液取相當(dāng)于取相當(dāng)于1g1g或或1ml1ml供試液用濾膜過濾、供試液用濾膜過濾、沖洗沖洗取下濾膜，菌面朝取下濾膜，菌面朝上放培

8、養(yǎng)基上培養(yǎng)上放培養(yǎng)基上培養(yǎng)結(jié)果觀察結(jié)果觀察 與計數(shù)與計數(shù)數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)處理處理書 寫 檢 驗書 寫 檢 驗記錄單記錄單2.2.薄膜過濾法薄膜過濾法封閉式薄膜過濾器封閉式薄膜過濾器傳統(tǒng)開放式薄膜過濾器傳統(tǒng)開放式薄膜過濾器二二、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查3.3.操作注意事項操作注意事項1.1.盡量使菌細(xì)胞分散開，使每個菌細(xì)胞生成盡量使菌細(xì)胞分散開，使每個菌細(xì)胞生成一個菌落，否則將會導(dǎo)致重大的技術(shù)誤差。一個菌落，否則將會導(dǎo)致重大的技術(shù)誤差。 2.2.為防止細(xì)菌增殖及產(chǎn)生菌苔，制為防止細(xì)菌增殖及產(chǎn)生菌苔，制成供試液后，應(yīng)盡快稀釋，注皿。成供試液后，應(yīng)盡快稀釋，注皿。一般稀釋后應(yīng)在

9、一般稀釋后應(yīng)在1 1小時內(nèi)操作完畢。小時內(nèi)操作完畢。 二二、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查3.3.操作注意事項操作注意事項3.3.使用吸量管時，應(yīng)小心沿管壁加入，不使用吸量管時，應(yīng)小心沿管壁加入，不用觸及管內(nèi)溶液，以防吸管尖端外側(cè)黏附用觸及管內(nèi)溶液，以防吸管尖端外側(cè)黏附的溶液混入其中。的溶液混入其中。 4.4.注意抑菌現(xiàn)象。由于防腐劑未被中和，往注意抑菌現(xiàn)象。由于防腐劑未被中和，往往使平板計數(shù)結(jié)果受影響，如低稀釋時菌落往使平板計數(shù)結(jié)果受影響，如低稀釋時菌落少。而高釋釋度時菌落數(shù)反而增大。遇此情少。而高釋釋度時菌落數(shù)反而增大。遇此情況應(yīng)重復(fù)檢驗，以確定是防腐劑影響還是操況

10、應(yīng)重復(fù)檢驗，以確定是防腐劑影響還是操作技術(shù)誤差。作技術(shù)誤差。 二二、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查3.3.操作注意事項操作注意事項5.5.為檢查和控制滅菌效果，應(yīng)做空白對照，為檢查和控制滅菌效果，應(yīng)做空白對照，以檢驗所使用的物品是否徹底滅菌及檢驗過以檢驗所使用的物品是否徹底滅菌及檢驗過程是否無菌操作。程是否無菌操作。 6.6.為便于區(qū)別藥品中的顆粒與菌落，可在為便于區(qū)別藥品中的顆粒與菌落，可在每每100mL 100mL 營養(yǎng)瓊脂中加入營養(yǎng)瓊脂中加入1mL0.51mL0.5的的TTC TTC 溶液，如有細(xì)菌存在，培養(yǎng)后菌落呈紅色，溶液，如有細(xì)菌存在，培養(yǎng)后菌落呈紅色，而藥

11、品的顆粒顏色無變化。而藥品的顆粒顏色無變化。二二、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查4.4.菌落計數(shù)及報告方法菌落計數(shù)及報告方法 宜選取細(xì)菌、酵母菌平均菌落數(shù)宜選取細(xì)菌、酵母菌平均菌落數(shù)在在30-30030-300之間之間、霉菌、霉菌平均菌落數(shù)小于平均菌落數(shù)小于100 cfu100 cfu的稀釋級，作為菌數(shù)報告（取兩位的稀釋級，作為菌數(shù)報告（取兩位有效數(shù)字）的依據(jù)。有效數(shù)字）的依據(jù)。（1 1）當(dāng)僅有）當(dāng)僅有1 1個稀釋級的菌落數(shù)符合上述規(guī)定，以該級的個稀釋級的菌落數(shù)符合上述規(guī)定，以該級的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告菌數(shù)平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告菌數(shù); ;當(dāng)有當(dāng)有2 2個或個或

12、2 2個以上稀釋個以上稀釋級的菌落數(shù)符合上述規(guī)定，以最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍級的菌落數(shù)符合上述規(guī)定，以最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)的值報告之。數(shù)的值報告之。（2 2）如各稀釋級的平板均無菌落生長，或僅最低稀釋級）如各稀釋級的平板均無菌落生長，或僅最低稀釋級的平板有菌落生長，但平均菌落數(shù)小于的平板有菌落生長，但平均菌落數(shù)小于1 1時，以時，以1 1乘以最低乘以最低稀釋倍數(shù)的值報告菌數(shù)。稀釋倍數(shù)的值報告菌數(shù)。 二二、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查4.4.菌落計數(shù)及報告方法菌落計數(shù)及報告方法細(xì)菌總數(shù)平均菌落數(shù)細(xì)菌總數(shù)平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)二、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查二

13、、細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢查l當(dāng)有兩個相鄰稀釋級的菌落數(shù)在當(dāng)有兩個相鄰稀釋級的菌落數(shù)在30-300之間之間比值比值2 2時，則以時，則以2 2個稀釋級的平均值報告。比值個稀釋級的平均值報告。比值2 2時，則以低時，則以低稀釋級的平板菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告。稀釋級的平板菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告。 高稀釋級的平板菌落數(shù)高稀釋級的平板菌落數(shù)*稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)比值比值=低稀釋級的平板菌落數(shù)低稀釋級的平板菌落數(shù)*稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)細(xì)菌總數(shù)檢查表細(xì)菌總數(shù)檢查表l培養(yǎng)溫度：30-35l培養(yǎng)基名稱：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（批號：14040901）特殊藥品微生物限度檢驗特殊藥品微生物限度檢驗三三、控制菌檢查檢查項目、控制菌

14、檢查檢查項目（1 1）陰性對照陰性對照試驗：取稀釋液試驗：取稀釋液10ml10ml按相應(yīng)按相應(yīng)供試品控制菌檢查法檢查，應(yīng)無菌生長。供試品控制菌檢查法檢查，應(yīng)無菌生長。（2 2）陽性對照陽性對照試驗：供試品試驗：供試品+10100CFU +10100CFU 陽陽性對照菌，應(yīng)檢出相應(yīng)的陽性對照菌。性對照菌，應(yīng)檢出相應(yīng)的陽性對照菌。 （3 3）供試品供試品控制菌檢查：依相應(yīng)的檢查方控制菌檢查：依相應(yīng)的檢查方法進(jìn)行。法進(jìn)行。 三三、控制菌檢查檢查流程、控制菌檢查檢查流程供試品供試品增菌培養(yǎng)增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)純培養(yǎng)純培養(yǎng)染色鏡檢染色鏡檢生化反應(yīng)試驗生化反應(yīng)試驗報告結(jié)果報告結(jié)果三三、控制菌檢查檢查流

15、程、控制菌檢查檢查流程1.1.增菌培增菌培養(yǎng)目的養(yǎng)目的使被檢藥物中的使被檢藥物中的被檢菌增殖，避被檢菌增殖，避免出現(xiàn)漏檢。免出現(xiàn)漏檢。三三、控制菌檢查檢查流程、控制菌檢查檢查流程2.2.分離培分離培養(yǎng)目的養(yǎng)目的經(jīng)增殖培養(yǎng)后經(jīng)增殖培養(yǎng)后, ,被檢菌大被檢菌大量繁殖，同時其他一些量繁殖，同時其他一些雜菌也出現(xiàn)增殖。因此雜菌也出現(xiàn)增殖。因此分離培養(yǎng)能使目的菌從分離培養(yǎng)能使目的菌從混合菌中分離出來。混合菌中分離出來。三三、控制菌檢查檢查流程、控制菌檢查檢查流程3.3.純培養(yǎng)純培養(yǎng)目的目的只是大量增殖被檢菌，只是大量增殖被檢菌，用于后面的進(jìn)一步檢驗。用于后面的進(jìn)一步檢驗。三三、控制菌檢查檢查流程、控制菌

16、檢查檢查流程4.4.染色鏡染色鏡檢目的檢目的初步鑒定，觀察細(xì)菌的初步鑒定，觀察細(xì)菌的形態(tài)大小。形態(tài)大小。三三、控制菌檢查檢查流程、控制菌檢查檢查流程5.5.生化試生化試驗?zāi)康尿災(zāi)康淖罱K的鑒定依據(jù)，最終的鑒定依據(jù)，結(jié)合染色鏡檢得出結(jié)合染色鏡檢得出實驗結(jié)果，填寫檢實驗結(jié)果，填寫檢驗報告。驗報告。三三、控制菌檢查大腸埃希菌檢查、控制菌檢查大腸埃希菌檢查大腸埃希菌大腸埃希菌 俗稱大腸桿菌，屬腸桿俗稱大腸桿菌，屬腸桿菌科埃希菌屬，革蘭陰性桿菌科埃希菌屬，革蘭陰性桿菌，兼性厭氧菌，能發(fā)酵多菌，兼性厭氧菌，能發(fā)酵多種糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。種糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。三三、控制菌檢查大腸埃希菌檢查、控制菌檢查大腸埃希菌檢查大腸埃希菌

17、檢查意義大腸埃希菌檢查意義 大腸埃希菌為條件致病菌，當(dāng)人體免疫力低下或大腸埃希菌為條件致病菌，當(dāng)人體免疫力低下或是侵入腸外組織、器官，可引起腸外感染，乃至敗是侵入腸外組織、器官，可引起腸外感染，乃至敗血癥。也可隨人和動物的糞便排出體外，污染環(huán)境，血癥。也可隨人和動物的糞便排出體外，污染環(huán)境，一旦食品、藥品、水等物品中檢出該菌，說明已受一旦食品、藥品、水等物品中檢出該菌，說明已受糞便污染，可能存在其他腸道致病菌和寄生蟲卵，糞便污染，可能存在其他腸道致病菌和寄生蟲卵，人們飲用或服用它們則可能引起消化道傳染病。人們飲用或服用它們則可能引起消化道傳染病。三三、控制菌檢查大腸埃希菌檢查、控制菌檢查大腸埃

18、希菌檢查書寫檢驗書寫檢驗記錄單記錄單雙陽或雙陰性雙陽或雙陰性增增菌菌培培養(yǎng)養(yǎng)供試供試液的液的制備制備檢查檢查結(jié)果結(jié)果判斷判斷配培配培養(yǎng)基養(yǎng)基和稀和稀釋液釋液靛基質(zhì)試驗靛基質(zhì)試驗熒光檢查熒光檢查一陰一陰一陽一陽分分離離純純化化最終結(jié)最終結(jié)果判斷果判斷大腸埃希菌檢查流程圖大腸埃希菌檢查流程圖膽鹽乳糖膽鹽乳糖M M藍(lán)白螢光藍(lán)白螢光玫瑰紅色液面玫瑰紅色液面EMBEMB瓊脂瓊脂/ /麥康麥康凱瓊脂平板凱瓊脂平板菌落特征菌落特征革蘭染色、鏡檢革蘭染色、鏡檢 生化試驗生化試驗: :乳糖發(fā)酵乳糖發(fā)酵試驗、試驗、IMViCIMViC試驗試驗乳糖膽鹽培養(yǎng)基乳糖膽鹽培養(yǎng)基伊紅美藍(lán)伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基瓊脂培養(yǎng)基靛基質(zhì)試

19、驗靛基質(zhì)試驗氣泡，氣泡，培養(yǎng)基培養(yǎng)基呈黃色呈黃色紫黑色紫黑色金屬光金屬光澤澤玫瑰紅玫瑰紅色液面色液面大腸埃希菌大腸埃希菌產(chǎn)氣桿菌產(chǎn)氣桿菌 I M Vi C I M Vi C試驗試驗 大腸埃希菌大腸埃希菌 +(+(或或- -） + - -+ - - 產(chǎn)氣桿菌產(chǎn)氣桿菌 - - + +- - + +吲哚（靛基質(zhì)）甲基紅二乙酰枸櫞酸鹽利用三三、控制菌檢查大腸埃希菌檢查、控制菌檢查大腸埃希菌檢查大腸埃希菌檢查結(jié)果報告大腸埃希菌檢查結(jié)果報告檢出大腸檢出大腸埃希菌埃希菌MUGMUG陽性，靛基質(zhì)陽性陽性，靛基質(zhì)陽性MUGMUG陽性，靛基質(zhì)陰性，陽性，靛基質(zhì)陰性，IMViCIMViC為，為，G G- -MUGM

20、UG陰性，靛基質(zhì)陽性，陰性，靛基質(zhì)陽性，IMViCIMViC為，為，G G- -MUG陽性:紫外光下管內(nèi)培養(yǎng)物呈現(xiàn)藍(lán)白色熒光三三、控制菌檢查大腸菌群檢查、控制菌檢查大腸菌群檢查大腸菌群檢查意義大腸菌群檢查意義 大腸菌群主要存在于溫血動物糞便中，大腸菌群主要存在于溫血動物糞便中，隨糞便排出體外后可直接污染藥品，若產(chǎn)隨糞便排出體外后可直接污染藥品，若產(chǎn)品中檢出該菌群，表明該產(chǎn)品受到糞便污品中檢出該菌群，表明該產(chǎn)品受到糞便污染，可能存在腸道致病菌并引起疾病，以染，可能存在腸道致病菌并引起疾病，以此作為糞便指示菌比大腸埃希菌更具廣泛此作為糞便指示菌比大腸埃希菌更具廣泛衛(wèi)生學(xué)意義。衛(wèi)生學(xué)意義。三、控制菌

21、檢查大腸菌群檢查三、控制菌檢查大腸菌群檢查產(chǎn)酸：黃色產(chǎn)酸：黃色產(chǎn)氣：氣泡產(chǎn)氣：氣泡產(chǎn)酸產(chǎn)氣產(chǎn)酸產(chǎn)氣書寫檢驗書寫檢驗記錄單記錄單不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣增增菌菌培培養(yǎng)養(yǎng)供試供試液的液的制備制備配培配培養(yǎng)基養(yǎng)基和稀和稀釋液釋液檢查檢查結(jié)果結(jié)果判斷判斷30-3530-3518-24h18-24h分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)乳糖發(fā)酵乳糖發(fā)酵驗證試驗驗證試驗最終結(jié)最終結(jié)果判斷果判斷30-3530-3524-48h24-48h特特征征菌菌落落36361 1 1824h1824h膽鹽乳糖膽鹽乳糖M M產(chǎn)酸：黃色產(chǎn)酸：黃色產(chǎn)氣：氣泡產(chǎn)氣：氣泡紫黑色紫黑色/ /桃桃紅色紅色大腸菌群檢查流程圖大腸菌群檢查流程圖EMBEMB瓊

22、脂瓊脂/ /麥康麥康凱瓊脂平板凱瓊脂平板三、控制菌檢查大腸菌群檢查三、控制菌檢查大腸菌群檢查大腸菌群檢查結(jié)果報告大腸菌群大腸菌群檢查結(jié)果報告大腸菌群MPNMPN表表 根據(jù)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，平板上有根據(jù)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，平板上有典型菌落，并經(jīng)證實為革蘭氏陰性短桿典型菌落，并經(jīng)證實為革蘭氏陰性短桿菌，靛基質(zhì)試驗陽性，則可報告被檢樣菌，靛基質(zhì)試驗陽性，則可報告被檢樣品中檢出糞大腸菌群。品中檢出糞大腸菌群。三三、控制菌檢查銅綠假單胞菌檢查、控制菌檢查銅綠假單胞菌檢查銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌 銅綠假單胞菌屬于假銅綠假單胞菌屬于假單胞菌屬，為革蘭氏陰性單胞菌屬，為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶陽性，能產(chǎn)桿菌，氧化

23、酶陽性，能產(chǎn)生綠膿菌素。此外還能液生綠膿菌素。此外還能液化明膠，還原硝酸鹽為亞化明膠，還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，在硝酸鹽，在424211條條件下能生長。件下能生長。三三、控制菌檢查銅綠假單胞菌檢查、控制菌檢查銅綠假單胞菌檢查銅綠假單胞菌檢查意義銅綠假單胞菌檢查意義 銅綠假單胞菌在特殊情銅綠假單胞菌在特殊情況下可引起皮膚化膿感染、況下可引起皮膚化膿感染、泌尿道感染、中耳炎等。外泌尿道感染、中耳炎等。外傷及燒傷患者感染后最易引傷及燒傷患者感染后最易引起化膿，并引起敗血癥。為起化膿，并引起敗血癥。為保證消費者安全，化妝品中保證消費者安全，化妝品中不得檢出銅綠假單胞菌。不得檢出銅綠假單胞菌。三三、控制菌檢

24、查銅綠假單胞菌檢查、控制菌檢查銅綠假單胞菌檢查最終結(jié)最終結(jié)果判斷果判斷增增菌菌培培養(yǎng)養(yǎng)供試供試液的液的制備制備書寫檢驗書寫檢驗記錄單記錄單分分離離純純化化無菌落或無特征菌落無菌落或無特征菌落配培配培養(yǎng)基養(yǎng)基和稀和稀釋液釋液革蘭染色、鏡檢革蘭染色、鏡檢 氧化酶試驗氧化酶試驗 綠膿菌素試驗綠膿菌素試驗生化試驗生化試驗 硝酸鹽還原試驗硝酸鹽還原試驗 4242生長試驗生長試驗 明膠液化試驗明膠液化試驗銅綠假單胞菌檢查流程圖銅綠假單胞菌檢查流程圖膽鹽乳糖培養(yǎng)基膽鹽乳糖培養(yǎng)基十六烷三甲基十六烷三甲基溴化銨瓊脂溴化銨瓊脂30-3530-351824h1824h30-3530-351824h1824h特征菌落

25、特征菌落灰白色、扁平、灰白色、扁平、周圍有水溶性周圍有水溶性藍(lán)綠色素藍(lán)綠色素十六烷三甲基溴化銨平板十六烷三甲基溴化銨平板膽鹽乳糖培養(yǎng)基膽鹽乳糖培養(yǎng)基黃綠色黃綠色菌膜菌膜灰白色灰白色濕潤濕潤氧化酶試驗氧化酶試驗粉紅粉紅/紫紅色紫紅色綠膿菌素試驗綠膿菌素試驗鹽酸層呈粉紫色鹽酸層呈粉紫色氯仿層呈藍(lán)綠色氯仿層呈藍(lán)綠色硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗N2明膠液化明膠液化試驗試驗明膠培養(yǎng)基（高層）明膠培養(yǎng)基（高層）明膠液化明膠液化三三、控制菌檢查金黃色葡萄球菌檢查、控制菌檢查金黃色葡萄球菌檢查金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌 金黃色葡萄球菌為革蘭氏金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性球菌，呈葡萄狀排列，無陽性球菌，

26、呈葡萄狀排列，無芽胞，無莢膜，能分解甘露醇，芽胞，無莢膜，能分解甘露醇，血漿凝固酶陽性。血漿凝固酶陽性。三三、控制菌檢查金黃色葡萄球菌檢查、控制菌檢查金黃色葡萄球菌檢查革蘭染色、鏡檢革蘭染色、鏡檢 生化試驗生化試驗: :血漿凝固酶試驗血漿凝固酶試驗最終結(jié)最終結(jié)果判斷果判斷增增菌菌培培養(yǎng)養(yǎng)供試供試品的品的處理處理書寫檢驗書寫檢驗記錄單記錄單分分離離純純化化無菌落或無特征菌落無菌落或無特征菌落配培配培養(yǎng)基養(yǎng)基和稀和稀釋液釋液30-3530-3530-3530-35營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基或亞碲酸鈉肉湯或亞碲酸鈉肉湯18-24h18-24h卵黃氯化鈉或甘卵黃氯化鈉或甘露醇氯化鈉瓊脂露醇氯化鈉瓊脂24-72h24-72h特征菌落特征菌落金黃色、邊緣金黃色、邊緣有渾濁帶有渾濁帶金黃色葡萄球菌檢查流程圖金黃色葡萄球菌檢查流程圖卵黃氯化鈉瓊脂卵黃氯化鈉瓊脂金黃色，有金黃色，有乳濁圈乳濁圈甘露醇發(fā)酵試驗甘露醇發(fā)酵試驗血漿凝固酶試驗血漿凝固酶試驗血漿凝塊血漿凝塊液態(tài)血漿液態(tài)血漿三三、控制菌檢查白色念珠菌檢查、控制菌檢查白色念珠菌檢查白色念珠球菌檢查意義白色念珠球菌檢查意義 白色念珠菌可侵犯人體白色念珠菌可侵犯人體許多部位，可引起：許多部位，可引起：1.1.皮膚皮膚念珠菌病，念珠