1、論文發(fā)表專家一類肝素酶論文非酒精性脂肪肝論文：類肝素酶在非酒精性脂肪肝模型大鼠肝臟組織中的表達(dá)及意義【摘要】目的：研究類肝素酶在非酒精脂肪肝大鼠模型肝臟組織中的表達(dá)，以探討類肝素酶在非酒精性脂肪肝發(fā)生中的作用，為脂肪肝的臨床監(jiān)測(cè)與治療提供新思路。方法：建立正常大鼠模型（30只），非酒精性脂肪肝模型大鼠（30只），采用免疫組化sabc法測(cè)定兩組模型肝臟組織中類肝素酶的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)方法：計(jì)量資料采用單因素方差分析和t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)。結(jié)果：在非酒精性脂肪肝大鼠模型肝臟組織中類肝素酶的陽(yáng)性率高于正常模型肝臟組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（pvO.01）。結(jié)論：非酒精性脂肪肝模型大鼠肝臟組織

2、中類肝素酶的表達(dá)增加，提示類肝素酶與非酒精性脂肪肝的發(fā)生有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】類肝素酶；非酒精性脂肪肝非酒精性脂肪肝病（nonalcoholicfattyliverdisease,nafld）是一種無(wú)過(guò)量飲酒史、以肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞脂肪變性和脂肪貯積為特征的臨床病理綜合征。隨著人們生活方式及飲食習(xí)慣的改變，其發(fā)病率正在逐年升高，在世界范圍內(nèi)成為慢性肝病的最常見(jiàn)病因之一。nafld的發(fā)病機(jī)制還不十分清楚，目前被廣泛接受的理論是day和james在1998年提出的二次打擊學(xué)說(shuō)。nafld各種病因引發(fā)脂質(zhì)代謝異常，論文發(fā)表專家一ffa和甘油三酯在肝內(nèi)沉積，通過(guò)線粒體和過(guò)氧化物酶體氧化及微粒體3氧化等途徑觸發(fā)氧應(yīng)激

3、反應(yīng)，脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)通過(guò)上述機(jī)制損傷線粒體，激發(fā)機(jī)體釋放炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子，導(dǎo)致肝細(xì)胞發(fā)生變性、凋亡、壞死和纖維化的發(fā)生因此，炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子的產(chǎn)生在非酒精性肝病的發(fā)生、發(fā)展中居于重要地位。研究表明，在nafld的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中有大量細(xì)胞因子產(chǎn)生并參與了疾病的演變過(guò)程，目前的研究認(rèn)為類肝素酶在nafld的發(fā)病過(guò)程中，由脂代謝異常引起機(jī)體釋放大量的活性氧和氧自由基，脂質(zhì)過(guò)氧化的終產(chǎn)物和蛋白質(zhì)結(jié)合成復(fù)合物，激活機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)而參與肝損害，誘導(dǎo)細(xì)胞死亡、炎癥和纖維化9。免疫系統(tǒng)的大量細(xì)胞和體液成分都貯存在血管內(nèi)，在免疫反應(yīng)的過(guò)程中，它們要通過(guò)血管內(nèi)皮進(jìn)入炎性反應(yīng)部位的細(xì)胞外基質(zhì)、(extrac

4、ellularmatrix,ecm)。目前研究更傾向于強(qiáng)調(diào)ecm成分的改變對(duì)免疫反應(yīng)的影響。本實(shí)驗(yàn)著重了解肝素酶是否參與非酒精性脂肪肝的發(fā)生發(fā)展。1材料與方法1.1標(biāo)本來(lái)源：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：清潔級(jí)雄性wistar大鼠60只，體重180-220g，由山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.2實(shí)驗(yàn)方法：1.2.1實(shí)驗(yàn)分組造模：wistar雄性大鼠60只，隨機(jī)分論文發(fā)表專家一為兩組，正常組30只，模型組30只。對(duì)照組：飼以普通飼料和自來(lái)水；模型組：采用高脂飲食致大鼠非酒精性脂肪性肝：高脂飲食配方：普通飼料84%、豬油14%、膽固醇2%;分別在第&10周末每組各取6只隔夜禁食處死大鼠采集標(biāo)本，留取肝組織待

5、檢,12周取18只隔夜禁食處死大鼠采集標(biāo)本，留取肝組織待檢(預(yù)試驗(yàn)表明類肝素酶和tgf-B1在8,10周肝組織中表達(dá)不明顯)。1.2.2肝臟組織he染色及脂肪肝判斷標(biāo)準(zhǔn)：取部分肝右葉放于10%中性福爾馬林液中固定，石蠟包埋，5卩m切片，并he染色后在顯微鏡下觀察。1.3標(biāo)本處理：所有標(biāo)本連續(xù)切片5張，厚為4卩m,置于經(jīng)多聚賴氨酸(poly-1-lysin)處理過(guò)的玻片上，58C烤片2h后4C保存。再各取石蠟標(biāo)本10卩m3張，置于1.0ml無(wú)菌eppendorf管中，4C保存?zhèn)溆谩?.4類肝素酶的免疫組化檢測(cè)：采用免疫組織化學(xué)方法將組織切片與兔抗鼠類肝素酶抗體共孵化,4C過(guò)夜，生物素標(biāo)記的羊抗兔免疫球蛋白g(igg)處理后，滴加sabc,dab顯色,蘇木素輕度復(fù)染，脫水、透明、封片