1、(一)植物細(xì)胞工程專(zhuān)題2細(xì)胞工程(3)意義：(二)動(dòng)物細(xì)胞工程粧捕#A蟲(chóng)叫觸剛網(wǎng)嘰地種飜1. 理論基礎(chǔ)(原理)：全能性表達(dá)的難易程度：2. 植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1) 過(guò)程：離體的植物器官、組織或細(xì)胞一-愈傷組織一-試管苗一-植物體(2) 用途：(3) 地位：是培育、培育植物新品種的最后一道工序。3. 植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1) 過(guò)程:1. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(1) 概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的,將它分散成,然后放在適宜的中，讓這些細(xì)胞。(2) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織剪碎t用處理分散成t制成t轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)T貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原

2、蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)。(3) 細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就，稱(chēng)為。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面時(shí)，細(xì)胞就會(huì),這種現(xiàn)象稱(chēng)為。(4) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件 :培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止。 :合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入_等天然成分。 :適宜溫度：哺乳動(dòng)物多是;pH:。 :95+5%。02是所必需的，CQ的主要作用(2) 誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括等?；瘜W(xué)法一般是用作為誘導(dǎo)劑。(5) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：2. 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克

3、隆動(dòng)物(1) 哺乳動(dòng)物核移植可以分為核移植(比較容易)和核移植(比較難)。(2)選用去核卵(母)細(xì)胞的原因：卵(母)細(xì)胞卵(母)細(xì)胞。的重要手段。(4)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較：(3)體細(xì)胞核移植的大致過(guò)程是：(下圖)核移植iaije去竝卵如胞沖卵胚胎移植比較項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用法植物體細(xì)細(xì)胞膜的流動(dòng)性去除細(xì)胞壁后誘離心、電刺激、克服了遠(yuǎn)緣雜交胞雜交導(dǎo)原生質(zhì)體融合振動(dòng)，聚乙二醇的不親和性，獲得等試劑誘導(dǎo)雜種植株動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性使細(xì)胞分散后誘除應(yīng)用植物細(xì)胞制備單克隆抗體融合導(dǎo)細(xì)胞融合雜交手段外，再加的技術(shù)之一滅活的病毒誘導(dǎo)労一共母綜羊的于富4.單克隆抗體(1

4、)抗體：一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種。從血清中分離出的抗體(4)體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:(2)單克隆抗體的制備過(guò)程:(5)體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題:克隆動(dòng)物存在著問(wèn)題、表現(xiàn)出缺陷等。3.動(dòng)物細(xì)胞融合(1)動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱(chēng)為(2)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類(lèi)似，常用的誘導(dǎo)因素有等。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合的意義：克服了，成為研究(3)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量，又能產(chǎn)生。(4)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):。(5)單克隆抗體的作用:準(zhǔn)確識(shí)別各種物質(zhì)的細(xì)微差異

5、，并跟發(fā)生特異性結(jié)合，具有的優(yōu)點(diǎn)。:主要用于治療，可制成，也有少量用(二)動(dòng)物細(xì)胞工程傳代細(xì)胞的接觸抑制于治療其它疾病。受精卵生殖細(xì)胞干細(xì)胞體細(xì)胞;植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞2.(2)微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)(3) 轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交3離心、振動(dòng)、電刺激聚乙二醇(PEG克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。1組織單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)和繁殖。(2) 胰蛋白酶或膠原蛋白酶單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液原代(3) 貼附在瓶壁上細(xì)胞貼壁相互抑制停止分裂增殖(4無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:無(wú)菌抗生素代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害營(yíng)養(yǎng)：血清、血漿 溫度:C+0.5C;pH:二。 氣體環(huán)境:空氣CO2o細(xì)胞代謝維持培養(yǎng)液的pH。(5)制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測(cè)有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。2. (1)胚胎細(xì)胞體細(xì)胞(2)比較大，容易操作細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富(4) 加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)良畜群繁育；保護(hù)瀕危物種，增大存活數(shù)量;生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白；作為異種移植的供體； 用于組織器官的移植等。(5) 健康遺傳和生理3. (1)細(xì)胞雜交兩個(gè)或多個(gè)雜交細(xì)胞(2) 聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激(3) 遠(yuǎn)緣雜交的不親和性細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育4.(1)特異性抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差(3) 繁殖專(zhuān)一的抗