1、關于免疫學檢測免疫學預防關于免疫學檢測免疫學預防現(xiàn)在學習的是第一頁，共25頁主要內容主要內容l第一節(jié) 免疫細胞及其亞群的檢測（自學）l第二節(jié) 免疫分子的檢測（重點）l一、抗原、抗體的檢測l（一）抗原 - 抗體反應的特點（自學）l（二）抗原 - 抗體反應的影響因素（自學）l（三）抗原 - 抗體反應的類型和檢測方法（重點）l1.沉淀反應（自學）l2.凝集反應（自學）l3.補體參與的抗原抗體反應（自學）l4.免疫標記技術（重點）l5.蛋白芯片技術（自學）l二、細胞因子的檢測（自學）l第三節(jié) 免疫學檢測的臨床應用現(xiàn)在學習的是第二頁，共25頁第二節(jié)第二節(jié) 免疫分子的檢測免疫分子的檢測n（三）抗原抗體反應

2、的類型和檢測方法（三）抗原抗體反應的類型和檢測方法n4.免疫標記技術免疫標記技術（1）免疫熒光技術）免疫熒光技術（3）放射免疫測定法）放射免疫測定法（2）酶免疫測定法）酶免疫測定法.現(xiàn)在學習的是第三頁，共25頁 Ag-Ab + 標記技術標記技術。用以檢測用以檢測Ag或或Ab的一種試驗方法。的一種試驗方法。熒光素、酶、放射性同位素等。標記后的熒光素、酶、放射性同位素等。標記后的Ag或或Ab仍仍 有原有的生物學活性。有原有的生物學活性。敏感性高、特異性強、應用范圍廣，可定性、定量敏感性高、特異性強、應用范圍廣，可定性、定量、定位。、定位。4、免疫標記技術、免疫標記技術 免疫熒光技術免疫熒光技術 免

3、疫酶測定法免疫酶測定法 放射免疫測定法放射免疫測定法 發(fā)光免疫分析發(fā)光免疫分析 免疫膠體金技術免疫膠體金技術 免疫印跡技術免疫印跡技術現(xiàn)在學習的是第四頁，共25頁Ag熒光素熒光素Ag放射性同位素放射性同位素酶酶熒光顯微鏡熒光顯微鏡酶標檢測儀酶標檢測儀射線測量儀射線測量儀化學發(fā)光物、金屬顆粒等化學發(fā)光物、金屬顆粒等用用熒光素熒光素、放射性放射性同位素同位素、酶酶、金屬金屬顆粒顆粒及及化學化學（或（或生生物物）發(fā)光劑發(fā)光劑等等作為作為追蹤物追蹤物，標記抗體標記抗體或或抗原抗原進行的抗原進行的抗原抗體反應抗體反應n免疫標記技術免疫標記技術現(xiàn)在學習的是第五頁，共25頁Ag硝酸纖維素膜硝酸纖維素膜和和醋

4、酸纖維素膜醋酸纖維素膜利用利用吸附載體作為固吸附載體作為固相相進行抗原抗體反應進行抗原抗體反應聚苯乙烯聚苯乙烯微量反應板（微量反應板（酶標板）酶標板）現(xiàn)在學習的是第六頁，共25頁Ag聚苯乙烯聚苯乙烯微量反應板（微量反應板（酶標板）酶標板）封阻封阻/ /封閉（封閉（blockblock）包被（包被（coatcoat）AgAg現(xiàn)在學習的是第七頁，共25頁熒光素：熒光素：異硫氰酸熒光素（異硫氰酸熒光素（FITC）-黃綠色熒光黃綠色熒光 四乙基羅丹明（四乙基羅丹明（RB200）-橙色熒光橙色熒光四甲基異硫氰酸羅丹明（四甲基異硫氰酸羅丹明（TMRITC）-橙紅色橙紅色現(xiàn)在學習的是第八頁，共25頁待檢標本

5、（固定在玻片上）待檢標本（固定在玻片上）+已知熒光抗體已知熒光抗體洗去游離的熒光洗去游離的熒光Ab 干燥后，熒光顯微鏡下觀察。干燥后，熒光顯微鏡下觀察。用途：病毒感染的細胞、攜帶某種特異性用途：病毒感染的細胞、攜帶某種特異性Ag的細胞的檢測。的細胞的檢測。a、直接熒光法、直接熒光法問題思考：問題思考：直接法會給我們的檢測工作帶來什么不方面直接法會給我們的檢測工作帶來什么不方面？檢測多種檢測多種Ag需制備多種相應的熒光抗體標需制備多種相應的熒光抗體標記。記。 現(xiàn)在學習的是第九頁，共25頁用來檢測標本中未知的用來檢測標本中未知的Ag。檢測檢測Ag。未標記。未標記Ab+待檢待檢Ag（未知）（未知）（

6、沖洗）（沖洗）+熒光標熒光標 記抗記抗Ab沖洗、干燥、熒光顯微鏡下觀察。沖洗、干燥、熒光顯微鏡下觀察。b、間接熒光法、間接熒光法優(yōu)點：敏感性高，制備一種熒光標記抗優(yōu)點：敏感性高，制備一種熒光標記抗Ab即可對多種即可對多種Ab-Ab系統(tǒng)進系統(tǒng)進行檢測。行檢測。缺點：易出現(xiàn)非特異性熒光。缺點：易出現(xiàn)非特異性熒光?，F(xiàn)在學習的是第十頁，共25頁直接酶標法直接酶標法間接酶標法間接酶標法辣根過氧化物酶（辣根過氧化物酶（HRP） 堿性磷酸酶堿性磷酸酶抗抗體、二抗酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）現(xiàn)在學習的是第十一頁，共25頁雙抗體夾心法雙抗體夾心法現(xiàn)在學習的是第十二頁，共25頁間接法間接法現(xiàn)在學習的是第十三頁，

7、共25頁“免疫標記技術免疫標記技術”小結小結熒光標記熒光標記法法酶聯(lián)免疫酶聯(lián)免疫吸附試驗吸附試驗直直 接接熒光法熒光法間間 接接熒光法熒光法夾心法夾心法間接法間接法已知抗體已知抗體包被于固相載體包被于固相載體，加，加待測抗原待測抗原，再加，再加酶標酶標抗體抗體，顯色；反之亦然（，顯色；反之亦然（先加已知抗原）先加已知抗原）標記抗原標記抗原或者或者一抗一抗抗原抗原包被于固相載體，包被于固相載體，加加酶標一抗酶標一抗，再加，再加酶標酶標二抗二抗，顯色，顯色標記標記二抗二抗現(xiàn)在學習的是第十四頁，共25頁課堂測試課堂測試n1、下列哪項不是免疫標記技術的特點、下列哪項不是免疫標記技術的特點_nA、提高了

8、反應的靈敏度、提高了反應的靈敏度 B、反應的特異性更強、反應的特異性更強nC、能進行定量檢測、能進行定量檢測 D、能進行定性檢測、能進行定性檢測nE、具有快速的優(yōu)點、具有快速的優(yōu)點n2、下列免疫學測定方法靈敏度最高的是、下列免疫學測定方法靈敏度最高的是_nA、沉淀反應、沉淀反應 B、凝集反應、凝集反應 C、ELISAnD、放射免疫測定、放射免疫測定 E、補體結合試驗、補體結合試驗n3、免疫熒光抗體技術間接法是將熒光素標記在、免疫熒光抗體技術間接法是將熒光素標記在_nA、被檢抗原上被檢抗原上 B、已知抗體上已知抗體上nC、抗抗Ig抗體上抗體上 D、AgAb復合物上復合物上nE、已知抗原上已知抗原

9、上現(xiàn)在學習的是第十五頁，共25頁n4、ELISA的雙抗體夾心法，固相載體的標記物是的雙抗體夾心法，固相載體的標記物是_nA、待檢抗原、待檢抗原 B、已知抗原、已知抗原 C、已知抗體、已知抗體nD、酶標抗體、酶標抗體 E、酶標抗原、酶標抗原n5、檢測可溶性抗原可以用、檢測可溶性抗原可以用_nA、直接凝集反應、直接凝集反應 B、酶聯(lián)免疫吸附實驗、酶聯(lián)免疫吸附實驗nC、放射性免疫分析法、放射性免疫分析法 D、直接熒光標記、直接熒光標記n6、間接標記技術一般主要用于檢測、間接標記技術一般主要用于檢測_nA、未知抗原、未知抗原 B、未知抗體、未知抗體nC、兩者都可以、兩者都可以現(xiàn)在學習的是第十六頁，共2

10、5頁第二十四章第二十四章 免疫學防治免疫學防治l第一節(jié)第一節(jié) 免疫預防（重點）免疫預防（重點）l一、疫苗（重點）一、疫苗（重點）l二、疫苗的基本要求（自學）二、疫苗的基本要求（自學）l三、計劃免疫和預防接種注意事項（了解）三、計劃免疫和預防接種注意事項（了解）l第二節(jié)第二節(jié) 免疫治療（自學）免疫治療（自學）現(xiàn)在學習的是第十七頁，共25頁老問老問題思題思考考n第一次患嚴重疾病而病愈，第第一次患嚴重疾病而病愈，第二次二次遭受同一嚴重疾病，患病結果會怎樣？怎么解釋？患病結果會怎樣？怎么解釋？現(xiàn)在學習的是第十八頁，共25頁現(xiàn)在學習的是第十九頁，共25頁初次抗原刺激初次抗原刺激再次抗原刺激再次抗原刺激時

11、間（天）時間（天）現(xiàn)在學習的是第二十頁，共25頁人工主動免疫和人工被動免疫的特點人工主動免疫和人工被動免疫的特點人工主動免疫人工主動免疫 人工被動免疫人工被動免疫輸入物質輸入物質抗原抗原抗體等抗體等免疫力出現(xiàn)免疫力出現(xiàn)時間時間慢（慢（2-32-3周）周）快（輸注即生效）快（輸注即生效）免疫力維持免疫力維持時間時間數(shù)月至數(shù)年數(shù)月至數(shù)年2-32-3周周主要用途主要用途預防預防治療或緊急預防治療或緊急預防接種次數(shù)接種次數(shù)1 1到到3 3次次1 1次次現(xiàn)在學習的是第二十一頁，共25頁是是給機體輸入給機體輸入抗原性物質抗原性物質，剌激機體產(chǎn)生特異性，剌激機體產(chǎn)生特異性免疫力免疫力一、疫苗 1. 滅活疫苗滅活疫苗/死疫苗死疫苗 2. 減毒活疫苗減毒活疫苗 3. 類毒素類毒素 4. 新型疫苗新型疫苗現(xiàn)在學習的是第二十二頁，共25頁