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1、機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的和任務(wù)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)的目的和任務(wù)是通過驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)使學(xué)生掌握機(jī)能學(xué)常用的基本實(shí)驗(yàn)技術(shù),驗(yàn)證所學(xué)的基本理論知識(shí);通過設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn),使學(xué)生了解機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)研究的設(shè)計(jì)思路,培養(yǎng)學(xué)生運(yùn)用知識(shí)能力、創(chuàng)新能力和團(tuán)結(jié)協(xié)作精神,充分發(fā)揮學(xué)生主觀能動(dòng)性;通過綜合性實(shí)驗(yàn)使學(xué)生在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)過程的觀察和結(jié)果分析中進(jìn)一步提高獨(dú)立分析問題和解決問題的能力,培養(yǎng)學(xué)生的初步科研意識(shí),為今后從事科學(xué)研究打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物: 蛙和蟾蜍均屬于兩棲綱動(dòng)物,常用于實(shí)驗(yàn)教學(xué),蛙和蟾蜍均屬于兩棲綱動(dòng)物,常用于實(shí)驗(yàn)教學(xué),其心臟在離體后仍可有節(jié)律地跳動(dòng),常用于心臟生其心臟在離體后仍可有節(jié)律地跳動(dòng),常用于心臟生理實(shí)驗(yàn)。
2、理實(shí)驗(yàn)。 家兔屬于哺乳綱動(dòng)物,具有性情溫順、對(duì)溫度家兔屬于哺乳綱動(dòng)物,具有性情溫順、對(duì)溫度適應(yīng)敏銳和便于靜脈注射等特點(diǎn),是教學(xué)實(shí)驗(yàn)中常適應(yīng)敏銳和便于靜脈注射等特點(diǎn),是教學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的動(dòng)物之一??捎糜谘獕?、呼吸和泌尿系統(tǒng)等多用的動(dòng)物之一??捎糜谘獕?、呼吸和泌尿系統(tǒng)等多種實(shí)驗(yàn),還可用于體溫實(shí)驗(yàn)和熱原的研究與鑒定。種實(shí)驗(yàn),還可用于體溫實(shí)驗(yàn)和熱原的研究與鑒定?!緦?shí)驗(yàn)器材】 蛙類手術(shù)器械一套、哺乳類手術(shù)器械蛙類手術(shù)器械一套、哺乳類手術(shù)器械一套、氣管插管;任氏液,生理鹽水。一套、氣管插管;任氏液,生理鹽水?!緦?shí)驗(yàn)對(duì)象】 蟾蜍,家兔蟾蜍,家兔【實(shí)驗(yàn)步驟和觀察項(xiàng)目】1. 蛙類實(shí)驗(yàn)的基本手技與操作蛙類實(shí)驗(yàn)的基本
3、手技與操作 破壞腦和脊髓破壞腦和脊髓 暴露蛙心,觀察蛙心臟跳動(dòng)情況暴露蛙心,觀察蛙心臟跳動(dòng)情況 辨認(rèn)靜脈竇、心房、心室并辨認(rèn)靜脈竇、心房、心室并觀察他們的波動(dòng)順序觀察他們的波動(dòng)順序蛙的捉拿與固定方法蛙的捉拿與固定方法破壞蟾蜍腦和脊髓的方法破壞蟾蜍腦和脊髓的方法考核方式 實(shí)驗(yàn)課成績(jī)根據(jù)學(xué)生的平時(shí)表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)技能的掌握情況、實(shí)驗(yàn)報(bào)告或?qū)嶒?yàn)論文以及實(shí)驗(yàn)操作和實(shí)驗(yàn)理論考核等綜合評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)一 制備坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本【目的和原理】 由于蛙類的一些基本生理活動(dòng)規(guī)律與溫血?jiǎng)游锵嗨?,并且維持其離體組織正?;顒?dòng)需要的理化條件比較簡(jiǎn)單,易于建立和控制。因此,在實(shí)驗(yàn)中常用蟾蜍的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本來觀察和研究興奮與興
4、奮性、刺激與肌肉收縮等基本的生理現(xiàn)象和過程?!緦?shí)驗(yàn)對(duì)象】蟾蜍【實(shí)驗(yàn)器材和藥品】蛙板、玻璃板、普通剪刀、手術(shù)剪、眼科剪、鑷子、眼科鑷、探針、玻璃分針、瓷盤、滴管、培養(yǎng)皿、鋅銅弓、任氏液。 鋅銅弓用金屬鋅和銅鉚接而成,鋅銅弓在極性溶液中形成回路時(shí),鋅與銅兩極產(chǎn)生約0.50.7V的直流電壓,因此可用來刺激神經(jīng)和肌肉,使神經(jīng)或肌肉興奮?!緦?shí)驗(yàn)步驟】破壞腦和脊髓取蟾蜍一只,用自來水沖洗干凈。左手握住蟾蜍,用食指按壓其頭部前端,拇指按壓背部,使其脊柱伸直,右手持探針從枕骨大孔處垂直向下刺入,然后轉(zhuǎn)向前刺入顱腔,左右攪動(dòng),充分搗毀腦組織。然后將探針抽回至進(jìn)針處,再轉(zhuǎn)向后刺入椎管,反復(fù)上下提插搗毀脊髓。此時(shí)如
5、蟾蜍的四肢松馳無力,呼吸消失,表明腦和脊髓已破壞完全,否則應(yīng)反復(fù)按上述方法進(jìn)行操作剪除軀干上部和內(nèi)臟在骶髂關(guān)節(jié)水平上.5cm1cm處剪斷脊柱,左手握住蟾蜍的后肢,將骶骨向上,使蟾蜍頭和內(nèi)臟自然下垂,右手持剪刀,沿脊柱兩側(cè)剪除一切內(nèi)臟和頭胸部,留下后肢、骶骨、脊柱以及緊貼于脊柱兩側(cè)的坐骨神經(jīng)。剝皮左手握緊脊柱斷端(注意不要握住或壓迫神經(jīng)),右手捏住其上的皮膚邊緣,用力向下剝掉全部后肢的皮膚。把標(biāo)本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。將手及用過的剪刀、鑷子等全部手術(shù)器械洗凈,再進(jìn)行下面的步驟。分離兩腿用鑷子夾住脊柱將標(biāo)本提起,背面朝上,剪去向上突起的尾骨(注意勿損傷坐骨神經(jīng))。然后沿正中線用剪刀將脊柱和恥骨
6、聯(lián)合中央剪開兩條大腿,并完全分開。將兩條腿浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本游離坐骨神經(jīng)將腿標(biāo)本腹面朝上放置,用玻璃分針沿脊柱旁游離坐骨神經(jīng)。再沿坐骨神經(jīng)溝(股二頭肌和半膜肌之間的裂隙處),找出坐骨神經(jīng)的大腿段。用玻璃分針仔細(xì)剝離,剪斷坐骨神經(jīng)的所有分支,然后剪斷脊柱,保留約1cm與坐骨神經(jīng)相連處,并將神經(jīng)一直游離到腘窩。完成坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本將游離干凈的坐骨神經(jīng)搭在腓腸肌上,在膝關(guān)節(jié)周圍,剪掉全部大腿肌肉,并用普通剪刀將股骨刮干凈,然后在股骨中部剪去上段股骨,保留1cm的股骨,剩下的部分就是坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本。完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本將上述坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本在跟腱處穿線結(jié)扎后,于結(jié)扎處
7、遠(yuǎn)心端剪斷跟腱。游離腓腸肌至膝關(guān)節(jié)處,然后從膝關(guān)節(jié)囊將小腿其余的部分剪掉,這樣就制得一個(gè)具有附著在股骨上的腓腸肌并帶有支配腓腸肌的坐骨神經(jīng)的標(biāo)本。 檢驗(yàn)標(biāo)本興奮性用經(jīng)任氏液濕潤的鋅銅弓輕輕的接觸一下坐骨神經(jīng),如腓腸肌發(fā)生迅速而明顯的收縮,則表明標(biāo)本的興奮性良好,即可將標(biāo)本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中,以備實(shí)驗(yàn)用。實(shí)驗(yàn)要求:掌握制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的技能,并獲得興奮性良好的一對(duì)標(biāo)本?!咀⒁馐马?xiàng)】 操作中勿污染,壓榨,損傷,過度牽拉神經(jīng)和肌肉,動(dòng)作要輕,避免損傷神經(jīng)。 操作中經(jīng)常給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液,防止表面干燥,以保持其始終有正常的興奮性。 制備好的神經(jīng)肌肉標(biāo)本為何要放在仁氏液中? 用鋅銅弓刺激
8、神經(jīng),為何會(huì)引起肌肉收縮? 坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本可完成哪些方面的實(shí)驗(yàn)。思考題 實(shí)驗(yàn)二 骨骼肌收縮的影響因素【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?觀察改變電刺激頻率與刺激強(qiáng)度對(duì)肌肉收縮的影響,明確閾下刺激、閾刺激、閾上刺激以及最適刺激的概念?!緦?shí)驗(yàn)原理】單收縮:一個(gè)短暫的有效刺激復(fù)合收縮:相繼兩個(gè)有效刺激,間隔時(shí)間小于肌肉單收縮的總時(shí)程不完全強(qiáng)直收縮:串刺激,后一刺激落在前一刺激引起肌肉收縮的舒張期完全強(qiáng)直收縮:串刺激,后一刺激落在前一刺激引起肌肉收縮的收縮期【實(shí)驗(yàn)對(duì)象】 蟾蜍或蛙【實(shí)驗(yàn)器材和試劑】 蛙類手術(shù)器械一套、萬能支架、任氏液、BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、張力換能器(100克)、神經(jīng)-肌肉標(biāo)本屏蔽盒、【實(shí)驗(yàn)步驟】坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備(見坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備方法)。儀器連接和標(biāo)本放置【觀察項(xiàng)目】刺激強(qiáng)度對(duì)肌肉收縮的影響。 逐步增加刺激強(qiáng)度,觀察肌肉收縮反應(yīng)是否也相應(yīng)增大,即描記出的曲線幅度是否相應(yīng)增高。讀出最大刺激強(qiáng)度數(shù)值。 刺激頻率對(duì)肌肉收縮的影響 選用單次采集,應(yīng)用最大刺激強(qiáng)度,單脈沖刺激神經(jīng),觀察肌肉單收縮波形的高度與寬度。 雙脈沖數(shù)刺激神經(jīng),并縮短刺激之間的時(shí)間間隔(0.06-0.08s),記錄舒張期復(fù)合收縮曲線。進(jìn)一步縮短刺激的時(shí)間間隔(0.02-0.04s),記錄收縮收縮期復(fù)合收縮曲線 選擇串脈沖為5-10,串脈沖間隔從100 ms
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